天津中醫(yī)藥大學(xué)本科生學(xué)位論文-2010-資源版

1、<p>　　天津中醫(yī)藥大學(xué)本科畢業(yè)論文</p><p>　　不同產(chǎn)區(qū)甘草質(zhì)量比較研究</p><p>　　The Comparative Study on the Quality of Several Kinds of </p><p>　　Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</p><p>　　in Dif

2、ferent Producing Regions</p><p>　　學(xué) 院 中藥學(xué)院 </p><p>　　專 業(yè) 中藥學(xué)（中藥資源與開發(fā)方向） </p><p>　　學(xué)生姓名 尹業(yè)菠 </p><p>　　學(xué) 號(hào) 201014022066

3、 </p><p>　　指導(dǎo)教師 元英群 </p><p><b>　　天津中醫(yī)藥大學(xué)</b></p><p><b>　　2014年 05月</b></p><p>　　天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明</p><p>　　本

4、人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用和致謝之處外，論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果。也不包含獲得天津中醫(yī)藥大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位、學(xué)歷使用過的材料。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。本人完全意識(shí)到該聲明的法律后果，并由本人承擔(dān)相應(yīng)責(zé)任。</p><p>　　學(xué)位論文作者簽名：

5、 日期： 年 月 日</p><p>　　學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書</p><p>　　本學(xué)位論文作者完全了解天津中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，特授權(quán)天津中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印

6、件和電子版。</p><p>　　學(xué)位論文作者簽名： 導(dǎo)師簽名：</p><p>　　日期： 年 月 日 日期： 年 月 日</p><p><b>　　目錄</b></p><p>　　中文摘

7、要………………………………………………………………………………………1</p><p>　　ABSTRACT………………………………………………………………………………………2</p><p>　　緒言…………………………………………………………………………………………………………3</p><p>　　論文正文………………………………………………………………………

8、………………5</p><p><b>　　1.材料和方法5</b></p><p><b>　　1.1材料5</b></p><p><b>　　1.2方法6</b></p><p><b>　　2.實(shí)驗(yàn)材料6</b></p>&l

9、t;p><b>　　3.實(shí)驗(yàn)方法6</b></p><p>　　3.1 甘草酸、甘草苷含量測(cè)定7</p><p><b>　　3.2聚類分析7</b></p><p>　　3.3 有機(jī)氯農(nóng)藥殘留測(cè)定8</p><p>　　3.4重金屬及有害元素含量測(cè)定9</p><

10、;p>　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理11</p><p><b>　　5.結(jié)果11</b></p><p>　　5.1 甘草酸、甘草苷含量測(cè)定11</p><p>　　5.2 聚類分析12</p><p>　　5.3有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留測(cè)定14</p><p>　　5.4重金屬及有害元素測(cè)定14

11、</p><p><b>　　6.討論15</b></p><p><b>　　7.結(jié)論16</b></p><p><b>　　綜述19</b></p><p>　　甘草質(zhì)量研究現(xiàn)狀19</p><p><b>　　譯文26<

12、/b></p><p>　　高血壓異常原因26</p><p><b>　　致謝33</b></p><p><b>　　中文摘要</b></p><p>　　目的：對(duì)目前不同產(chǎn)區(qū)的甘草的質(zhì)量進(jìn)行比較研究。方法：采用2010版《中國藥典》的色譜條件與方法,用高效液相色譜法，以甘草酸、甘草苷

13、為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)不同產(chǎn)區(qū)的甘草進(jìn)行結(jié)果測(cè)定、分析。并用所得的高效液相色譜圖做了聚類分析，此外，還包括用原子吸收光譜（AAS）測(cè)重金屬及有害元素和氣相色譜法（GC-ECD）測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留。結(jié)果：高效液相色譜圖，原子吸收分光光度法測(cè)，農(nóng)藥殘留和重金屬含量測(cè)定均已取得預(yù)期結(jié)果。結(jié)論：以產(chǎn)區(qū)的環(huán)境綜合機(jī)制（即地域特征）做為甘草的質(zhì)量評(píng)價(jià)及控制的參考依據(jù)是可行的。有利于生產(chǎn)企業(yè)對(duì)不同產(chǎn)區(qū)的原藥材的購進(jìn)和生產(chǎn)，以有效利于如通脈養(yǎng)心丸等藥品質(zhì)量保證

14、。</p><p>　　關(guān)鍵詞: 質(zhì)量評(píng)價(jià)；高效液相色譜法；有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留測(cè)定；重金屬測(cè)定</p><p><b>　　ABSTRACT</b></p><p>　　Objective:The essay aims at making a comparative study on the quality of several kinds o

15、f glycyrrhizae radix et rhizoma in different producing regions at present.Methods:Adopting the conditions and methods used in Version 2010 Chinese Pharmacopoeia ,utilizing HPLC,taking glycyrrhizic acid and liquiritin as

16、an evaluation target, to examine and analyze the glycyrrhizae radix et rhizoma in different regions.And utilizing the results from HPLC for clustering analysis,besides,including the determinat</p><p>　　KEY W

17、ORDS: Quality evaluating;HPLC;Determination of organochlorine pesticide residues;Determination of heavy metal content</p><p><b>　　緒言</b></p><p>　　甘草，為豆科植物甘草屬多年生草本植物，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，并有國老、

18、靈通譽(yù)稱。在中醫(yī)處方中離不開甘草，俗稱“十方九草”，并被稱為“百草之王”，也是世界自然基金會(huì)全球14個(gè)重點(diǎn)保護(hù)物種之一。甘草具有耐寒、耐熱、耐旱、抗鹽堿等優(yōu)良適應(yīng)特性，生命力旺盛，為干旱、半干旱地區(qū)的重要作物。藥用為其地下根莖部分，2010版中國藥典規(guī)定其來源為豆科(Leguminosae)植物甘草屬（Glycyrrhiza L.）甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.(又稱烏拉爾甘草)、脹果甘草Glycyrrhi

19、za inflate Bat.或光果甘草（又名歐甘草）Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根莖[1]。為常用及大宗出口中藥。其性平，味甘。歸心、肺、脾、胃經(jīng)。具有清熱解毒、止咳祛痰、緩急止痛、補(bǔ)脾益氣、調(diào)和諸藥的功效。甘草，作為一種常用中藥，已被人們接受和使用，通過對(duì)國內(nèi)外的學(xué)者在不同的領(lǐng)域?qū)ζ溥M(jìn)行了研究，在了解足夠多的文獻(xiàn)資料后，其主要化學(xué)成分有四類：三萜類、黃酮類、生物堿類和多糖類。其中三萜類有甘草酸、24-羥基甘草

20、次酸等；黃酮類成分有甘草黃酮、異甘草黃酮、甘草素、</p><p>　　全世界甘草屬植物29種6變種，中國分布14種2變種，其中有烏拉爾甘草G. uralensis Fisch.、光果甘草G. glabra L.、脹果甘草G.ihflata Bat.、無腺毛甘草G. eglandulosa X. Y. Li.,蜜腺甘草G .glabra L. vai. glandulosa X. Y. L.及變種、疏小葉甘草G

21、.glabra L. vai. laxifoliolata X. Y. Li及變種、黃甘草G.eurycarpa P. C. Li.、石河子甘草G. shiheziensis X. Y. Li.、粗毛甘草G. aspera Pall.、平臥甘草G. prostrata X.Y. Li.、大葉甘草G. macrophylla X. Y. Li.,圓果甘草G. squamulosa Franch.、刺果甘草G. pallidiflora M

22、axim. ,云南甘草G. yunnanesis Cheng f. et L. K. Tai ex P.C.Li.,2010年版《中國藥典》收錄前3種。[2]</p><p>　　內(nèi)蒙古和新疆自治區(qū)是甘草適宜和重點(diǎn)分布區(qū)域，其產(chǎn)量約占全國的一半以上。甘草是新疆荒漠區(qū)最主要的植被物種之一，分布面積廣，貯藏量大。新疆的82個(gè)縣市分布有9種甘草[3]。新疆野生光果甘草資源僅零星分布。[4]甘肅省有包括有烏拉爾甘草、黃甘

23、草、脹果甘草、光果甘草等4種，主要以烏拉爾甘草、黃甘草為主；脹果甘草除在安西零星分布外，其他地區(qū)幾乎沒有分布；而光果甘草資源已基本絕跡[5]。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)中，從天津中新藥業(yè)集團(tuán)公司藥材公司處獲得共12個(gè)甘草代表不同產(chǎn)地樣品，并且均有藥材公司的副主任藥師王樹全部長鑒定為烏拉爾甘草G. uralensis Fisch.。隨后，各個(gè)樣品中選擇適當(dāng)?shù)母什輼?。?duì)各個(gè)樣選擇適當(dāng)量，藥材處理，粉碎，過篩,得到細(xì)

24、粉，然后分袋裝好，并做標(biāo)記，記錄。本實(shí)驗(yàn)所用樣品覆蓋三個(gè)重要產(chǎn)地，具有代表性。用甘草酸，甘草苷含量，聚類分析，有機(jī)氯農(nóng)藥殘留測(cè)定和重金屬及有害元素測(cè)定等“一測(cè)多評(píng)”方法，，來比較不同產(chǎn)區(qū)的甘草的質(zhì)量差異。有利于生產(chǎn)企業(yè)對(duì)采購甘草原材料的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(jìn)，保證藥品的質(zhì)量安全有效。</p><p><b>　　論文正文</b></p><p><b>　　1.

25、材料和方法</b></p><p><b>　　1.1材料</b></p><p>　　1.1.1（甘草酸、甘草苷含量測(cè)定）</p><p>　　島津LC-2010液相色譜儀,配有AOC20i自動(dòng)進(jìn)樣器，ECD檢測(cè)器；</p><p>　　色譜柱為EQYUTY-1701，0.25×30m 。LC-2

26、010色譜工作站數(shù)據(jù)處理儀</p><p>　　KQ-250TDB超聲波振蕩器</p><p>　　甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為優(yōu)級(jí)純</p><p>　　甘草酸單銨鹽對(duì)照品、甘草苷對(duì)照品，購自中國藥品生物制品鑒定所（批號(hào)：110731-201116，111610-201106，質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%)</p><p>　　1.1.2（聚類分

27、析）</p><p>　　TGL-16G離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；AS20500A型超聲波清洗機(jī)。</p><p>　　甘草酸銨對(duì)照品購于中國藥品生物制品檢定所，甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素對(duì)照品均購買國家規(guī)定的檢定所</p><p>　　1.1.3（有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留測(cè)定）</p><p>　　島津GC-2014氣相色譜儀，配有AO

28、C-20i自動(dòng)進(jìn)樣器，NPD檢測(cè)器；色譜柱為EQYUTY-1701（0.25mm×30m） 。LC-2014色譜工作站數(shù)據(jù)處理儀</p><p>　　二氯甲烷（農(nóng)殘級(jí)）批號(hào)：50438；</p><p>　　丙酮、石油醚、（60℃-90℃）分析純，農(nóng)殘級(jí)；無水硫酸鈉 分析純；硫酸 優(yōu)級(jí)純；水為去離子水（MilliQ凈化）</p><p>　　六六六（BHC

29、）、滴滴涕（DDT）及五氯硝基苯（PNCB）(0.05mg/ml，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心)。</p><p>　　1.1.4（重金屬及有害元素測(cè)定）</p><p>　　微波消解儀MARS-5, 熱電M6型原子吸收分光光度計(jì)(AAS);熱電V9P0氫化物發(fā)生系統(tǒng)。</p><p>　　硝酸BV-Ш級(jí)，水為石英蒸餾器蒸餾過的超純水；硼氫化鈉、高錳酸鉀、碘化鉀、抗壞血酸均

30、為分析純；鹽酸、硫酸為優(yōu)級(jí)純。</p><p>　　鉛、鎘、砷、汞、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液（濃度均為1000mg·L-1，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）。</p><p><b>　　1.2方法</b></p><p>　　均參照2010版《中國藥典》規(guī)定測(cè)定方法進(jìn)行。</p><p><b>　　2.實(shí)驗(yàn)材料&

31、lt;/b></p><p>　　實(shí)驗(yàn)所用的甘草，均于60℃干燥4h后，粉碎，得到粗粉。本實(shí)驗(yàn)中所用的甘草藥材性狀如表示。</p><p>　　表1 實(shí)驗(yàn)中甘草藥材基本形狀</p><p><b>　　3.實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　3.1 甘草酸、甘草苷含量測(cè)定</p><p>

32、;　　3.1.1對(duì)照品的制備</p><p>　　取甘草苷、甘草酸銨對(duì)品適量，精密稱定，制成含0.1mg/ml的溶液，為對(duì)照品溶液。取10μl，進(jìn)樣入高效液相色譜儀，記錄色譜圖和保留時(shí)間</p><p>　　3.1.2供試品制備</p><p>　　稱取過四號(hào)篩的甘草中粉，0.4g，精密稱定，置于100ml具塞錐形瓶中，加入50%甲醇50ml，稱質(zhì)量，超聲處理0.5

33、h，取出放冷，補(bǔ)足重量，搖勻，取上清液離心（10000r/min），即可。</p><p>　　3.1.2 實(shí)驗(yàn)條件</p><p>　　以甘草酸、甘草苷為質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合比較不同產(chǎn)地甘草的品質(zhì)，其中對(duì)照品溶液和供試品溶液的制備、色譜條件及測(cè)定方法均嚴(yán)格依據(jù)2010版《中國藥典》規(guī)定的條件和方法，以保證分析結(jié)果的可評(píng)價(jià)性和準(zhǔn)確性。</p><p>　　色譜條件：

34、分析柱：Luna C18（250mm×4.60mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.2mol/L醋酸鹽緩沖溶液（0.2mol/L醋酸銨-3%冰醋酸）梯度洗脫60min。0~12min從12：88→22：78，12~25min從22：78→25：75，25~40min從25：75→40：60，40~60min從40：60→15：48，45~60min保持15：85不變；體積流量：1.0ml/min；檢測(cè)波長：276nm；柱溫：30℃

35、；進(jìn)樣量：10μl；理論塔板數(shù)以甘草苷計(jì)算，不低于5000。</p><p><b>　　3.2聚類分析</b></p><p><b>　　3.2.1實(shí)驗(yàn)條件</b></p><p>　　3.2.1.1流動(dòng)相選擇</p><p>　　選用C18色譜柱作為分析柱，乙腈-0.2mol/L的錯(cuò)酸鹽緩沖溶

36、液流動(dòng)相系統(tǒng)</p><p>　　3.2.1.2檢測(cè)波長</p><p>　　根據(jù)試驗(yàn)的需要，分別選擇了甘草酸、甘草苷和甘草素、異甘草苷和異甘草素，最大吸收波長250、276、372作為指紋圖譜的檢測(cè)波長。</p><p>　　3.2.1.3色譜條件分析柱：Luna C18（250mm×4.60mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.2 mol/L醋酸鹽緩沖溶

37、液（0.2mol/L醋酸銨-3%冰醋酸）梯度洗脫60min。0~12min從12：88→22：78，12~25min從22：78→25：75，25~40min從25：75→40：60，40~60min從40：60→15：48，45~60min保持15：85不變；體積流量：1.0ml/min；檢測(cè)波長：276nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μl；理論塔板數(shù)以甘草苷計(jì)算，不低于5000。</p><p>　　3.2.

38、1.4取各供標(biāo)準(zhǔn)品，供試品各10μL，進(jìn)樣，記錄色譜圖，即得。</p><p>　　3.3 有機(jī)氯農(nóng)藥殘留測(cè)定</p><p><b>　　3.3.1實(shí)驗(yàn)條件</b></p><p>　　為2010版《中國藥典》一部附錄ⅨQ，附錄57。</p><p>　　色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)</p><p>

39、;　　彈性石英毛細(xì)管柱（30×0.25×0.25μm）DB-17MS，氮磷檢測(cè)器（NPD)，進(jìn)樣溫度220℃，檢測(cè)溫度300℃，不分流進(jìn)樣。</p><p>　　程序升溫：初始120℃，每分鐘10℃升至200℃，每分鐘5升至240℃，保持2分鐘，每分鐘20升至270℃度，保持0.5分鐘。理論板數(shù)按敵敵畏峰面積計(jì)算不低于6000，兩個(gè)相鄰色譜的分離度大于1.5。</p><

40、p>　　3.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　混合標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液的制備：分別精密稱取六六六（BHC）（α-六六六，β-六六六，γ-六六六，δ-六六六）、滴滴涕（DDT）（pp'-DDE、pp'-DDD、op'-DDT、pp'-DDT)及五氯硝基苯（PCNB）1ml，置于同一50ml量瓶中，用石油醚（60~90℃）稀釋至刻度，搖勻，作為混合標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液（濃度為1μg/ml）

41、。分別精密量取標(biāo)注貯備液（濃度1ug/ml）適量，用石油醚（60~90℃）稀釋制成1ml含250、100、50、10、5、1ng的溶液。</p><p>　　3.3.3 測(cè)定方法</p><p>　　精密量取各濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)。根據(jù)樣品中待測(cè)成分的峰面積選擇不同的濃度范圍（至少4個(gè)濃度點(diǎn)），繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。α-六六六，β-六六六，

42、γ-六六六，δ-六六六和pp’-DDE的線性回歸方程如下：</p><p>　　Y=6.416×103X-5.679×103,R2=0.9997</p><p>　　Y=4.153×103X+2.464×103,R2=1.000</p><p>　　Y=6.204×103X-3.421×103,R2=0.9

43、998 </p><p>　　Y=5.069×103X-1.927×103,R2=0.9999</p><p>　　Y=5.768×103X+3.364×103,R2=0.9997</p><p>　　線性范圍均為1~500ng·ml-1</p><p>　　3.3.4供試品配制</p&

44、gt;<p>　　取碎粉 ，過四號(hào)篩，量取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加丙酮40ml，稱重，超聲處理30min，放冷，補(bǔ)重，再加氯化鈉6g及二氯甲烷30ml，稱重，超聲處理15min，用二氯甲烷補(bǔ)重，靜置使分層，將有機(jī)相轉(zhuǎn)入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具賽錐形瓶中，反復(fù)操作2次，使石油醚溶解并定容至5ml，加硫酸1ml，振搖1min，離心（3000轉(zhuǎn)/分）10分鐘，精密量取上清液

45、2mL置具刻度的濃縮瓶中。連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，40℃下將其濃縮至適量，然后精密稀釋至1ml，取上清液，加水1次洗滌，水液棄去，取上清液作為供試品溶液，即得。同法制備試劑空白對(duì)照溶液。</p><p>　　3.4重金屬及有害元素含量測(cè)定</p><p><b>　　3.4.1標(biāo)準(zhǔn)試液</b></p><p>　　鉛、鎘、砷、汞、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，由

46、國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供。</p><p>　　3.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備</p><p>　　為操作方便，可將各單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液用2%硝酸稀釋成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于低溫保存，臨用前，取此貯備液，按要求稀釋并制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。</p><p>　　Pb的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 (lμg/ml)適量，用2%溶液稀釋制成每lml含鉛 0.5、20、40、60、8

47、0ng的溶液。</p><p>　　Cd 的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.4ug/ml)適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每lml含鎘0、0.8、2.0、4.0、6.0、8.0ng的溶液。</p><p>　　Cu的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別精密量取銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.1ug/ml)適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每lml含銅0、0.05、0.2、0.4、0.6、0.8μg的溶液。</p>

48、<p>　　As的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別精密量取銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.1ug/ml)適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每lml含砷0、5、10、20、30、40ng的溶液，分別精密量取10ml，加25%碘化鉀溶液（臨時(shí)配制）1ml，搖勻，加10%抗壞血酸溶液（臨時(shí)配制）1ml，搖勻，用鹽酸溶液（20→100）稀釋至25ml，搖勻，即得。</p><p>　　Hg的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.1ug/ml)，

49、0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，置于50ml量瓶中，加4%的硫酸溶液40ml，5%高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5%鹽酸羥胺溶液，至顯紫紅色恰消失，用4%硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。</p><p>　　結(jié)果鉛、鎘、銅、砷、汞標(biāo)準(zhǔn)曲線方程分別為：</p><p>　　Y=-9×10-5X2+5.47×10-3+0.0251,R2=0.9990&l

50、t;/p><p>　　Y=-4.088×10-3X2+ 0.0786X0.0147,R2=0.9974</p><p>　　Y=1.070×10-3X2+0.01664×X-6×10-4,R2=0.9997</p><p>　　Y=-3.0×10-5X2+4.74×10-3 X+6.8×10-3,R2

51、=0.9997</p><p>　　Y=1.6×10-5X2+2.97×10-3 X-1.0×10-3,R2=0.9997</p><p>　　線性范圍分別為5~80ng/ml，0.8~8.0ng/ml， 0.05~0.8ug/ml，5~40ng/ml, </p><p>　　0.1~0.9ug/ml。</p><p

52、>　　3.4.3供試品溶液及供試品溶液及空白對(duì)照溶液的制備</p><p>　　精密稱取待測(cè)樣品0.5g，分別置于消解罐中，加硝酸5ml，按操作規(guī)定安裝好裝置，按下述程序消解：</p><p>　　以50%功率，在3min內(nèi)自室溫加熱至100℃，持續(xù)5min；</p><p>　　以100%功率，3min內(nèi)自100℃加熱至180℃，保持14min。消解結(jié)束后，

53、冷卻至罐內(nèi)溫度低于70℃，緩緩放氣，取出內(nèi)罐，置加熱板上，于125℃加熱，使NO2蒸汽揮盡，并持續(xù)濃縮至2~3ml，放冷，加4%硫酸溶液5~6ml，5%高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5%鹽酸羥胺液至紫紅色恰好消失，用4%硫酸溶液稀釋至10ml，搖勻，即得。同法同時(shí)制備試劑空白溶液。</p><p><b>　　3.4.4測(cè)定法</b></p><p>　　Pb 測(cè)

54、定法：Pb的測(cè)定采用石墨爐原子吸收法，檢測(cè)波長283.3nm，其他檢測(cè)參數(shù)可根據(jù)儀器具體情況加以優(yōu)化調(diào)查；</p><p>　　Cd 測(cè)定法：Cd的測(cè)定采用石墨爐原子吸收法，檢測(cè)波長228.8nm；</p><p>　　Cu 測(cè)定法：Cu的測(cè)定采用火焰原子吸收法；</p><p>　　As 測(cè)定法：As的測(cè)定采用氫化物發(fā)生-原子吸收法。吸收管溫度為800~900℃，

55、檢測(cè)波長為193.7nm；</p><p>　　Hg 測(cè)定法：Hg的測(cè)定采用冷蒸汽-原子吸收法，氮?dú)鉃檩d氣，檢測(cè)波長為253.6nm。</p><p><b>　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理</b></p><p>　　4.1甘草酸甘草苷含量測(cè)定</p><p>　　用島津2010高效液相色譜工作站，生成結(jié)果。</p>

56、<p><b>　　4.2聚類分析</b></p><p>　　為了消不同批次藥材含水量和稱樣量不同對(duì)色譜峰面積的影響，因此將峰面積換算成每克干燥品的峰面積。為了消除個(gè)指標(biāo)變化幅度不同對(duì)聚類分析結(jié)果的影響，聚類分析之前，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行了數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化處理，即把每批樣品的峰面積數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化為均值為0、方差為1的數(shù)據(jù)。采用的是SPSS19軟件下的Classify函數(shù)下的Hierarchica

57、l cluster方法處理標(biāo)準(zhǔn)化后的特征峰面積。公式：</p><p>　　其中：xk表示每批樣品中的第k個(gè)峰的峰面積；表示12批樣品第k個(gè)峰的峰面積總和的平均值；sk表示12個(gè)批樣品第k個(gè)峰的峰面積的方差。</p><p><b>　　5.結(jié)果</b></p><p>　　5.1 甘草酸、甘草苷含量測(cè)定</p><p>

58、;　　以干燥品計(jì)算樣品中甘草酸、甘草苷的百分含量，如表2。</p><p>　　表2 不同產(chǎn)地甘草中甘草酸、甘草苷百分含量的比較</p><p><b>　　5.2 聚類分析</b></p><p>　　表3.1 12批藥品每克干燥品指標(biāo)成分峰面積（A）及標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果</p><p>　　表3.2 聚類步驟表<

59、/p><p>　　圖3 聚類分析樹狀圖</p><p>　　聚類分析結(jié)果顯示，以甘草酸、甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素5種活性成分為指標(biāo)，對(duì)12批樣品HPLC數(shù)量化特征進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析。計(jì)算機(jī)結(jié)果辨識(shí)表明，5、6、7、11聚為一類，除11號(hào)為甘肅產(chǎn)，其余均為新疆所產(chǎn)；1、2、3、4聚為一類；新疆8和甘肅11聚為一類；9和12、10成一類，均為甘肅產(chǎn)。</p><p&g

60、t;　　5.3有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留測(cè)定</p><p>　　表4 甘草甘草有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量檢測(cè)結(jié)果 單位（μg/kg）</p><p>　　5.4重金屬及有害元素測(cè)定</p><p>　　表5 甘草重金屬及有害元素檢測(cè)結(jié)果</p><p><b>　　6.討論</b></p><p>　　從表2

61、中可以到處，按2010版《中國藥典》對(duì)甘草中甘草酸、甘草苷含量要求（本品按干燥品計(jì)算，所含甘草酸≥2.0%，甘草苷≥0.50%），除其中的新疆產(chǎn)樣品中甘草苷的較低外，樣品符合要求；此外，甘肅地區(qū)的樣品有效成分含量整體較高；內(nèi)蒙古地區(qū)次之。由此可以得出，不同產(chǎn)區(qū)的地理位置、氣候特點(diǎn)、土壤特性等環(huán)境綜合機(jī)制對(duì)甘草的有效成分的影響極為明顯。此外，對(duì)比內(nèi)蒙古和新疆的甘草樣品，及近年來對(duì)野生甘草甘草酸、甘草苷含量的相關(guān)報(bào)道[6～13]（其中，內(nèi)蒙

62、古甘草酸約為2.44~5.82%，甘草苷含量[13]約為2.3%；新疆甘草甘草酸含量約為6.81%，甘草苷含量約0.23%；黑龍江肇州甘草中甘草酸含量約為8.74%；山東東營甘草甘草苷含量為0.74%），說明甘肅產(chǎn)地甘草的有效成分含量相對(duì)較高。</p><p>　　聚類分析結(jié)果顯示，以甘草酸、甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素5種活性成分為指標(biāo)，對(duì)12批樣品HPLC數(shù)量化特征進(jìn)行的系統(tǒng)聚類分析。三大產(chǎn)區(qū)的甘草差異

63、較小，考慮到地域特征因素，因此，說明雖然有環(huán)境因素影響，但仍是符合《中國藥典》規(guī)定的藥用要求。</p><p>　　藥用植物長期在自然環(huán)境生長過程中，期間由于其自身蓄積或受環(huán)境污染等因素，可能存在有重金屬或有害元素鉛、鉻、砷、汞、銻、鎘、銅、錫、鈹、鉍等，其中鉛、鎘、砷、汞對(duì)人體危害最大，銅為人體必須元素，但是過量，也會(huì)有害人體健康。</p><p>　　有機(jī)氯類農(nóng)藥以其高效、廉價(jià)的特點(diǎn)，

64、曾經(jīng)在世界范圍內(nèi)被廣泛使用，但是目前已被世界上多數(shù)國家所禁用。其在自然環(huán)境中的半衰期大約為20年，可隨大氣和水體環(huán)境，污染到各個(gè)生態(tài)群，并在生物體內(nèi)蓄積。通過本實(shí)驗(yàn)對(duì)12批不同產(chǎn)地的甘草測(cè)試分析結(jié)果顯示，重金屬與有害元素遠(yuǎn)低于2010版《中國藥典》一部規(guī)定的限度。農(nóng)藥殘留測(cè)試結(jié)果顯示，樣品除一個(gè)樣檢出微量滴滴涕（DDT），其他樣未檢出滴滴涕（總DDT）和五氯硝基苯（PNCB），各樣品均殘留微量六六六（總BHC），說明樣品遠(yuǎn)低于《中國藥典

65、》規(guī)定的限量。這表明，從重金屬和農(nóng)藥殘留量標(biāo)準(zhǔn)上，個(gè)產(chǎn)地甘草均是可以安全使用的。</p><p><b>　　7.結(jié)論</b></p><p>　　可以看到，不同產(chǎn)區(qū)，包括內(nèi)蒙古、新疆、甘肅的甘草，從各自的不同方面顯示出各地生產(chǎn)的甘草有明顯的地域差異，在實(shí)際生產(chǎn)中，應(yīng)當(dāng)注意到環(huán)境綜合機(jī)制（即地域特征）作為甘草質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)的科學(xué)依據(jù)。</p><p

66、>　　本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)甘草的指標(biāo)成分（甘草酸、甘草苷）以及以HPLC圖譜所得的其他三個(gè)成分（甘草素，異甘草素異甘草苷）做聚類分析，并對(duì)齊重金屬及有害元素和有機(jī)氯農(nóng)藥殘留進(jìn)行了測(cè)定，以便對(duì)不同產(chǎn)區(qū)的甘草進(jìn)行全面的質(zhì)量比較研究。</p><p>　　對(duì)結(jié)果的分析中，可以看到：</p><p>　　甘草酸、甘草苷含量結(jié)果顯示未檢出，說明按照《中國藥典》規(guī)定，三大產(chǎn)的</p>&l

67、t;p>　　甘草都是符合藥用的；</p><p>　　聚類分析顯示，甘肅，內(nèi)蒙產(chǎn)的部分的聚為一類，新疆的自成一類；</p><p>　　重金屬及有害元素含量檢測(cè)顯示，遠(yuǎn)低于2010版《中國藥典》規(guī)定的限度；</p><p>　　農(nóng)藥殘留測(cè)定結(jié)果顯示，有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留項(xiàng)下，各產(chǎn)區(qū)地的甘草都符合標(biāo)準(zhǔn)。</p><p>　　由以上結(jié)果，多方面

68、比較 內(nèi)蒙古的甘草品質(zhì)較好，質(zhì)量教穩(wěn)定。此外，甘肅產(chǎn)甘草，無論是有效成分的積累和重金屬含量，都是較高的；新疆甘草則是有效成分含量次之，重金屬含量較其他產(chǎn)區(qū)較低；而內(nèi)蒙古甘草則含量總體都是較穩(wěn)定的，重金屬含量較其他兩產(chǎn)區(qū)，居中。</p><p>　　由此，藥品企業(yè)在原藥材的購進(jìn)和生產(chǎn)上，各產(chǎn)區(qū)的都可以選擇。從有效成分成分含量上考慮，應(yīng)當(dāng)以甘肅甘草為宜，內(nèi)蒙古產(chǎn)其次，最后是新疆產(chǎn)甘草；從藥品安全性考慮，以新疆產(chǎn)甘草為

69、優(yōu)，其次是甘肅產(chǎn)甘草，最后是內(nèi)蒙古甘草。綜合藥品質(zhì)量和安全性評(píng)價(jià)考慮，以及成本效益考慮，應(yīng)以內(nèi)蒙古甘草為首選，其次是甘肅產(chǎn)甘草，最后為新疆甘草。</p><p>　　此外，通過對(duì)不同產(chǎn)區(qū)甘草質(zhì)量的比較研究，HPLC法測(cè)甘草酸和甘草苷的質(zhì)量控制，聚類分析，有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量測(cè)定，重金屬及有害元素含量的檢測(cè)等“一測(cè)多評(píng)”方法技術(shù)，是中藥特點(diǎn)指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)的新模式，顯示出對(duì)中藥質(zhì)量控制的可行性，科學(xué)性和指導(dǎo)性。對(duì)企業(yè)的生產(chǎn)

70、及質(zhì)量控制都有極為重要的指示作用。本實(shí)驗(yàn)很好的體現(xiàn)了這一點(diǎn)。</p><p>　　從實(shí)際情況出發(fā)，考慮到甘草的種植范圍廣泛，本實(shí)驗(yàn)的甘草樣品量較少，不足以概括其他產(chǎn)區(qū)（如黑龍江，山東等地）。因此，本實(shí)驗(yàn)需要再進(jìn)行更廣泛地收集甘草樣品，以助于對(duì)甘草的質(zhì)量評(píng)價(jià)。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論，有利于生產(chǎn)企業(yè)制定藥品的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。在選擇藥材購進(jìn)方面，有指導(dǎo)意義。對(duì)企業(yè)的生產(chǎn)有建設(shè)性作用，本實(shí)驗(yàn)

71、可以繼續(xù)做，以完善不同數(shù)據(jù)。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1]中華人民共和國藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].北京：2010.80~81.</p><p>　　[2]劉洋洋,劉春生,曾斌芳,范冰舵,李朋收,徐暾海,劉銅華. 甘草種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2013,24:3593-3598.&

72、lt;/p><p>　　[3]李學(xué)禹. 中國甘草屬 (Glycyrrhiza L. ) 植物種質(zhì)資源[A] // 第二屆中國甘草學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第二屆新疆植物資源開發(fā)、利用與保護(hù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集 [C]. 石河子: 中國植物學(xué)會(huì), 2004.</p><p>　　[4]張繼,姚健,丁蘭,郭守軍,楊永利. 甘草的利用研究進(jìn)展[J]. 草原與草坪,2000,02:12-17.</p>

73、<p>　　[5]李碩,李成義,楊扶德,王明偉,侯嘉. 甘肅不同產(chǎn)地野生烏拉爾甘草的質(zhì)量比較研究[A]. 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥鑒定分會(huì).中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十屆中藥鑒定學(xué)術(shù)會(huì)議暨WHO中藥材鑒定方法和技術(shù)研討會(huì)論文集[C].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥鑒定分會(huì):,2010:4. </p><p>　　[6]王其灝,裴雅群,蔣挺大,李榮春,都靜瑩. 甘草酸的提取、分離和純化[J]. 醫(yī)藥工業(yè),1987,11:481-4

74、84. </p><p>　　[7]周如珍,沈祥龍,張國安. 不同產(chǎn)地甘草的品質(zhì)考察[J]. 中成藥研究,1988,02:11-12. </p><p>　　[8]段天璇,于密密,劉春生,馬長華,王文全,魏勝利. HPLC法同時(shí)測(cè)定甘草指紋圖譜暨甘草苷、甘草酸含量[J]. 中成藥,2006,02:161-165. </p><p>　　[9]王月輝,喬斌,蔣建蘭,元

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76、藥雜志,2008,22:2650-2652. </p><p>　　[12]崔淑芬,張信青,許柏球,黎先春,王小如. 甘草HPLC指紋圖譜研究[A]. 中國植物學(xué)會(huì).第二屆中國甘草學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第二屆新疆植物資源開發(fā)、利用與保護(hù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C].中國植物學(xué)會(huì):,2004:1. </p><p>　　[13]伍蔚萍,閻宏濤,孫文基. HPLC法測(cè)定甘草中甘草苷的含量[J]. 藥物分析

77、雜志,2010,04:425-427.</p><p><b>　　綜述 </b></p><p><b>　　甘草質(zhì)量研究現(xiàn)狀</b></p><p>　　【摘要】甘草主要分部在新疆和內(nèi)蒙古，其分布區(qū)域廣泛，形態(tài)變異幅度大。種質(zhì)資源的遺傳多樣性也越豐富。本文從種質(zhì)資源方面，重金屬農(nóng)藥殘留，聚類分析方面三方面對(duì)近些年來對(duì)甘

78、草的質(zhì)量研究做一綜述，以便為含甘草藥劑的生產(chǎn)的企業(yè)的藥材采購提供內(nèi)控參考，保證藥劑質(zhì)量，讓患者服用安心。</p><p>　　【關(guān)鍵詞】甘草；不同產(chǎn)區(qū)；質(zhì)量研究；種質(zhì)資源；重金屬；農(nóng)藥殘留；聚類分析</p><p>　　甘草又名國老、靈通、甜草、棒草，為豆科(Leguminosae)植物甘草屬（Glycyrrhiza L.）甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.(又稱

79、烏拉爾甘草)、脹果甘草Glycyrrhiza inflate Bat.或光果甘草（又名歐甘草）Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根莖[1]。多在春秋二季采挖，除去須根，曬干。其性味甘平，歸心、肺、脾、胃經(jīng)，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥的功效；主要用于脾胃虛弱、倦怠乏力、癰腫瘡毒、緩解藥物毒性和烈性。甘草首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。《名醫(yī)別錄》：“溫中下氣，煩滿，短氣，傷臟咳嗽，止咳，通經(jīng)脈，利

80、血?dú)?，解百藥毒?！痹趥鹘y(tǒng)中醫(yī)藥中被稱為“百草之王”，是世界自然基金會(huì)全球14個(gè)重點(diǎn)保護(hù)植物之一?，F(xiàn)代研究表面，甘草主要活性成分是三萜皂苷和黃酮類化合物，具有抗?jié)?、抗炎、解痙、抗氧化、抗病毒、抗癌、抗抑郁、保肝、祛痰和增強(qiáng)記憶力等多種功效。[2]</p><p>　　甘草最早產(chǎn)于山西、陜西、山東及東北3省，現(xiàn)其野生資源已絕跡或甚少，這是與歷代帝王建都中原有關(guān)。目前，寧夏、甘肅、青海、內(nèi)蒙古、新疆和陜西榆林地區(qū)作為

81、甘草大宗商品的供貨地，新疆甘草的蘊(yùn)藏量較多、種質(zhì)資源最豐富[3]、近幾年甘草作為藥材、食物及煙草添加劑的市場需求量猛增，結(jié)果野生資源過度被采挖，致使甘草藥材產(chǎn)量和質(zhì)量急劇下降，與此同時(shí)，加之甘草本生的固沙特性，所以加速了北方荒漠化的擴(kuò)展，嚴(yán)重影響了生態(tài)環(huán)境?？紤]到甘草的栽培育種還未形成規(guī)范、科學(xué)的生產(chǎn)體系，因此，甘草資源的合理開發(fā)利用、種質(zhì)控制評(píng)價(jià)是一項(xiàng)重要課題[4]。從質(zhì)量上研究甘草的資源特性，有利于藥企采購優(yōu)質(zhì)甘草，進(jìn)而藥材來源上內(nèi)

82、控甘草的質(zhì)量問題，便于生產(chǎn)含甘草為輔藥的質(zhì)量過硬的藥，如天津中新藥業(yè)的通脈養(yǎng)心丸等，保證臨床療效，讓患者安心。</p><p>　　甘草的種質(zhì)資源的研究[2]</p><p>　　甘草種質(zhì)資源的多樣性為甘草及其近緣植物變異總和，主要包括物種多樣性和遺傳多樣性2個(gè)層次。其外在表現(xiàn)為不同區(qū)域、不同居群、不同植株的植物形態(tài)以及藥材的有效成分的差異。</p><p>　　1

83、.1甘草屬物種多樣性</p><p>　　全世界甘草屬植物29種6變種，中國分布14種2變種，其中有烏拉爾甘草G. uralensis Fisch.、光果甘草G. glabra L.、脹果甘草G.ihflata Bat.、無腺毛甘草G. eglandulosa X. Y. Li.,蜜腺甘草G .glabra L. vai. glandulosa X. Y. L.及變種、疏小葉甘草G .glabra L. vai.

84、 laxifoliolata X. Y. Li及變種、黃甘草G.eurycarpa P. C. Li.、石河子甘草G. shiheziensis X. Y. Li.、粗毛甘草G. aspera Pall.、平臥甘草G. prostrata X.Y. Li.、大葉甘草G. macrophylla X. Y. Li.,圓果甘草G. squamulosa Franch.、刺果甘草G. pallidiflora Maxim. ,云南甘草G. y

85、unnanesis Cheng f. et L. K. Tai ex P.C.Li.,2010年版《中國藥典》收錄前3種。[2]</p><p>　　內(nèi)蒙古和新疆自治區(qū)是甘草適宜和重點(diǎn)分布區(qū)域，其產(chǎn)量約占全國的一半以上。甘草是新疆荒漠區(qū)最主要的植被物種之一，分布面積光，貯藏量大。新疆的82個(gè)縣市分布有9種甘草[3]，為烏拉爾甘草，無腺毛甘草，光果甘草（兩變種，密腺甘草和疏小葉甘草），脹果甘草，黃甘草，石河子甘草，

86、粗毛甘草，平臥甘草，大葉甘草。新疆野生光果甘草資源僅零星分布。[4]甘肅省有包括有烏拉爾甘草、黃甘草、脹果甘草、光果甘草等4種，主要以烏拉爾甘草、黃甘草為主；脹果甘草除在安西零星分布外，其他地區(qū)幾乎沒有分布；而光果甘草資源已基本絕跡[5]。</p><p>　　1.2甘草生物形態(tài)的多樣性</p><p>　　甘草分布區(qū)域越廣泛，其形態(tài)變異幅度越大。無論生長年限、土壤類型和生態(tài)環(huán)境如何，在莖

87、皮顏色，莖附屬物（刺毛）和葉片邊緣形狀等形態(tài)特征均存在明顯的差異與變化。[6]楊全等人[7]以人工栽培甘草為系統(tǒng)研究對(duì)象，來劃分甘草的形態(tài)變異類型。馬春英等[8]發(fā)現(xiàn)白花和紫花萼類型甘草的甘草酸、甘草苷和異甘草素量均高于普通白花類型。此外，甘草的農(nóng)藝性狀和品質(zhì)性狀間也存在不同的相關(guān)關(guān)系。[9]</p><p>　　對(duì)甘草重金屬農(nóng)藥殘留的研究</p><p>　　重金屬能直接或通過蓄積對(duì)人體

88、產(chǎn)生不理影響。隨著人們對(duì)中藥安全意識(shí)的提高，重金屬問題已經(jīng)成為當(dāng)今國內(nèi)外學(xué)術(shù)界關(guān)注的熱點(diǎn)。中國藥典規(guī)定了甘草屬及有害元素、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的限度。有學(xué)者對(duì)不同產(chǎn)地的甘草進(jìn)行了重金屬，農(nóng)藥殘留分析。</p><p>　　李偉等[10]對(duì)內(nèi)蒙古的道地主產(chǎn)地土壤和甘草重金屬做過含量分析，發(fā)現(xiàn)土壤中As、Hg和Cu相互之間均呈極顯著負(fù)相關(guān)性，其他重金屬之間均無顯著相關(guān)性，證明土壤中這三種重金屬之間存在著一種平衡和制約的關(guān)

89、系。對(duì)甘草的重金屬含量進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)甘草中重金屬As、Cd和Pb相互之間，均呈極顯著正相關(guān)性，其他之間沒有顯著相關(guān)性。對(duì)土壤和甘草中的重金屬含量進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)土壤中的重金屬Pb與甘草中As、Cd和Pb呈現(xiàn)顯著正相關(guān)性.</p><p>　　王坤等[11,12]以2005年版中國藥典一部規(guī)定的方法對(duì)寧夏栽培和野生甘草的重金屬及有害元素、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留進(jìn)行了比較分析，結(jié)果表明寧夏9批甘草重金屬及有害元素遠(yuǎn)

90、低于符合中國藥典2005年版一部規(guī)定。農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果除一批檢出及微量DDT（0.7ug·kg-1）外，其他均未檢出滴滴涕（總DDT）和五氯硝基苯（PCNB），各樣品均有殘留微量的六六六（總BHC），但遠(yuǎn)低于中國藥典2005年版一部規(guī)定的限度。</p><p>　　甘草的聚類分析方面的研究</p><p>　　在中藥分析 ，植物的內(nèi)在化學(xué)性質(zhì)，是從分子水平上研究植物類群及其親緣關(guān)

91、系，增加分類依據(jù)，以檢驗(yàn)、修正原有的分類系統(tǒng)，來測(cè)定高的、自然的分類群。[13]中紅外光譜技術(shù)適用于各種形態(tài)的樣品，一般不需要做特殊處理，樣品用量少，信息量大，指紋性強(qiáng),對(duì)樣品無污染。[14]莫文龍等[15]借助于無損紅外光譜的指紋性，用模式識(shí)別的方法中的聚類分析對(duì)譜圖差異較小的同種藥材甘草的產(chǎn)區(qū)進(jìn)行了聚類。從結(jié)果上看，采用紅外光譜聚類分析能很好地將同一地理位置和氣候條件的樣品歸類在一起，同時(shí)也表明采用紅外數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類時(shí)，完全能體現(xiàn)出聚

92、類算法側(cè)重于揭示具有最相近關(guān)系的優(yōu)點(diǎn)來。</p><p>　　李成義等[16]以西北地區(qū)商品甘草建立HPLC指紋圖譜并進(jìn)行聚類分析。對(duì)16批商品甘草色譜數(shù)據(jù)中10個(gè)共有特征峰的相對(duì)峰面積值，使用SPSS19軟件進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，選用類間平均法作為聚類方法，采用平方歐式距離作為測(cè)度方法。圖譜結(jié)果顯示，由于商品等級(jí)的不同，指標(biāo)成分甘草酸和甘草苷的峰面積以及其他共有峰峰面積不同，它們之間的相似度存在一定的差異。<

93、/p><p>　　王躍飛等[17]以內(nèi)蒙古伊克昭盟杭錦旗為主的甘草藥材中所含活性成分為分析，選擇適宜HPLC條件，建立甘草的指紋圖譜分析方法。以甘草酸、甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素5個(gè)活性成分峰面積的標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果對(duì)17批樣品進(jìn)行聚類分析。研究結(jié)果表明：杭錦旗伊泰集團(tuán)西北溝基地甘草人工栽培品中甘草酸及甘草黃銅的量略高于杭錦旗其他地區(qū)甘草；烏蘭察布市察右后旗烏拉哈鄉(xiāng)產(chǎn)甘草與內(nèi)蒙古和林縣新店子鄉(xiāng)產(chǎn)甘草的甘草酸及甘草黃銅

94、的量高于其他地區(qū)產(chǎn)甘草，活性成分的量差異較大，提示甘草活性成分的積累與產(chǎn)地有一定的相關(guān)性。把杭錦旗3大甘草種植基地(西北溝基地、吉爾成郎圖基地、賽格臺(tái)基地)的大部分樣品均聚為一類，表明杭錦旗的3大甘草種植基地所產(chǎn)甘草藥材品質(zhì)較好，質(zhì)量較穩(wěn)定。</p><p>　　此外，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已經(jīng)證明，微量元素與人體的健康密切關(guān)系?，F(xiàn)代已經(jīng)發(fā)現(xiàn)鐵、鎂、鋅、銅硒、錳等微量元素都參與了生命體內(nèi)的許多重要生理過程，與生命體內(nèi)的許多疾病

95、的發(fā)生密切相關(guān)。所以中醫(yī)藥微量元素的研究顯得極為重要。微量元素的分布及含量的差異是道地藥材的奧秘之一，種質(zhì)是影響道地藥材中微量元素的主要因素。</p><p>　　曹紅翠等[18]對(duì)西北地區(qū)12個(gè)不同產(chǎn)地的幾個(gè)主要種類的甘草，以微量元素含量為指標(biāo)，應(yīng)用主成分分析法，結(jié)合SPSS13.0軟件對(duì)甘草的微量元素進(jìn)行聚類分析。篩選出特征根累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)83.260%的3個(gè)主成分，對(duì)選出的品種進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析 ，在離差水平和

96、的水平上將其劃分為甘肅酒泉、甘肅金塔、新疆博樂3大類群。結(jié)果表明，甘草中的9種微量元素，除鉛外，都是對(duì)人體有一定生理功能的必需元素。其中鈣、鎂、鐵含量較高，其次是錳、鋅、銅含量也較豐富。</p><p>　　馬存花等[19]用火焰原子吸收光譜法（FAAS）測(cè)新疆15個(gè)甘草樣品中13種中無機(jī)元素的含量，并做了聚類分析及其指紋圖譜特征研究。數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件包中的Classify函數(shù)下的Hierarchic

97、al cluster方法處理。由結(jié)果可知，新疆甘草中含有豐富的無機(jī)元素，其中常見元素Ca、Mg、K含量較高，微量元素Cr、Cu、Co、Ni、Mo含量較低，而微量元素Se只有在一個(gè)樣中檢出。聚類分析結(jié)果顯示，在要求相似度不高（即距離大時(shí)），南北疆甘草樣品不存在明顯的區(qū)域差異。而曲線分析顯示，12種無機(jī)元素（除去Se）的含量呈現(xiàn)相似的峰形，認(rèn)為這一共性可以作為新疆甘草的專屬性區(qū)別于其他中藥材?？紤]到15個(gè)樣的曲線并不完全重合，說明每個(gè)樣中各

98、無機(jī)元素的含量存在差異，與聚類分析分析結(jié)果是一致的。</p><p><b>　　小結(jié)[20]</b></p><p>　　甘草作為世界各國廣泛使用的藥用植物之一，從甘草中提取和精制的工業(yè)產(chǎn)品主要有甘膏、甘草霜、甘草酸粉、甘草甜味素等?？梢灶A(yù)料，隨著市場經(jīng)濟(jì)的建立，以及對(duì)甘草開發(fā)利用范圍的擴(kuò)大，甘草的需求量和出口量將急劇增長。進(jìn)入21世紀(jì)，甘草在國際市場更成為搶手的緊

99、缺商品，其身價(jià)越來越高。目前，世界上能出口甘草的國家只有伊朗、伊拉克、前蘇聯(lián)、阿富汗、土耳其和中國。兩伊戰(zhàn)爭以來，我國甘草更受國際關(guān)注，日本每年進(jìn)口甘草的半數(shù)以上來自我國;在美國進(jìn)口甘草中，中國甘草曾占到98 %。然而，對(duì)甘草無計(jì)劃的采挖，使甘草資源遭到嚴(yán)重破壞。目前國內(nèi)對(duì)甘草原料需求量已達(dá)50-70萬噸。隨著甘草市場需求的發(fā)展，今后甘草品種選育會(huì)注重品種的多樣化，同時(shí)，考慮到甘草細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量生產(chǎn)甘草的主要成分甘草酸未成功，隨著制藥

100、行業(yè)需求變化，甘草酸、甘草黃酮量高的品種可能會(huì)受到種植戶偏好。這會(huì)給以甘草為原藥材做要藥劑的企業(yè)帶來一定的改革更新。</p><p><b>　　綜述參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1]中國藥典 [S].二部.2010.</p><p>　　[2] 劉洋洋,劉春生,曾斌芳,范冰舵,李朋收,徐暾海,劉銅華. 甘草種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J].

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109、呼,史智. 甘草的利用價(jià)值、研究現(xiàn)狀及存在的問題[J]. 中國草地,2002,01:74-77.</p><p><b>　　譯文</b></p><p><b>　　高血壓異常原因</b></p><p>　　【摘要】我們以一位有高血壓兼低血鉀癥的女性為觀察對(duì)象。鑒別診斷會(huì)涵蓋原發(fā)型醛固酮過多癥, 利尿藥或者萊參特（la