玉米內(nèi)生細菌群落動態(tài)調(diào)查及對玉米生長發(fā)育影響的研究.pdf

1、植物內(nèi)生細菌數(shù)量多，種類繁雜，分布廣泛，通過長期協(xié)同進化，在植物體內(nèi)占據(jù)有利生態(tài)位。合理應用有益內(nèi)生細菌可減少施用化肥對環(huán)境和作物造成的污染，因此將植物內(nèi)生細菌作為一種生物肥料資源進行開發(fā)和利用已勢在必行。本研究以黑龍江地區(qū)主栽品種玉米為材料，分離其內(nèi)生細菌進行群落動態(tài)調(diào)查，從中篩選出具有促進玉米生長發(fā)育作用的內(nèi)生細菌菌株，結(jié)合活性驗證，對其進行發(fā)酵條件優(yōu)化，以使其達到最佳促生效果。
　　 將分離自供試玉米的內(nèi)生細菌進行形態(tài)及生

2、理生化鑒定，確定其分屬芽孢桿菌屬、微球菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、棒狀桿菌屬、腸桿菌屬以及假單胞菌屬6個菌屬。其中芽孢桿菌為絕對優(yōu)勢菌屬，將其鑒定為7個不同種，分別為：枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、蕈狀芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌和環(huán)狀芽孢桿菌。
　　 篩選出一株具有促進玉米生長發(fā)育的內(nèi)生細菌菌株SYL4，進行16SrDNA核苷酸序列測定及分析，結(jié)果顯示其與多株枯草芽孢桿菌的16SrDNA基因序列相似性均達99％，

3、結(jié)合形態(tài)及生理生化鑒定結(jié)果，將SYL4鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。并利用Rif抗性標記法完成SYL4的內(nèi)生性驗證。
　　 對SYL4進行促生發(fā)酵優(yōu)化，優(yōu)化后培養(yǎng)基成分配比為：葡萄糖0.5%，蛋白胨1.5%，CaCO30.25%。優(yōu)化后培養(yǎng)條件為：在250mL三角瓶中，加入50mLpH7.0的發(fā)酵培養(yǎng)基，接入5%的種子液,31℃，200r/min發(fā)酵培養(yǎng)48h。發(fā)酵優(yōu)化后，進行發(fā)酵液對玉米生長促進的活性