玉米自交系幼胚轉(zhuǎn)化體系建立及DWF4基因的農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化.pdf

1、玉米是重要的糧飼兼用作物，對(duì)于我國(guó)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展具有重要意義。玉米的遺傳改良是生物技術(shù)育種和種質(zhì)創(chuàng)新的重要途徑。本研究以齊319、昌7-2、178、18-599玉米自交系幼胚為試材，系統(tǒng)研究了幼胚遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)建立和農(nóng)桿菌介導(dǎo)影響因素，并運(yùn)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法將油菜素類酯生物合成相關(guān)酶基因DWF4進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。主要研究結(jié)論如下：
　　 1、幼胚受體系統(tǒng)建立研究發(fā)現(xiàn)，在外植體雌穗授粉后10～15天，取長(zhǎng)度為1.6

2、mm的幼胚,24～25℃盾片向上培養(yǎng)，胚性愈傷不但得率最高，而且質(zhì)量較好，最適宜做轉(zhuǎn)化受體；在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加“2,4-D(3.0 mg L-1)＋NAA(0.2 mg L-1)”可以顯著增加胚性愈傷組織的形成，其中，齊319出愈率能達(dá)到100％，昌7-2、178出愈率可以達(dá)到85％和35％；篩選劑巴龍霉素的愈傷濃度分別確定，齊319三輪篩選的PRM濃度依次為80、120和80 mg L-1，18-599為90、120和90 mg L-