番茄VIGS體系構(gòu)建及在番茄白粉病抗性研究上的應(yīng)用.pdf

1、植物病毒侵染植物體后，植物將啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS，post-transcriptionalgenesilencing)機(jī)制，通過(guò)沉默病毒的某些功能基因抵制病毒浸染。根據(jù)植物的這種防御機(jī)制，可利用植物病毒構(gòu)建基因沉默載體，用攜帶來(lái)源于植物的目標(biāo)基因片段的病毒載體侵染植物，隨著PTGS的啟動(dòng)可以使目標(biāo)基因發(fā)生沉默，根據(jù)植物表型變化可推測(cè)目標(biāo)基因的功能，這種利用病毒載體來(lái)沉默植物基因的方法被稱為病毒誘導(dǎo)的基因沉默(VlGS，virus

2、-induced gene silencing)。
　　 我們利用由煙草脆裂病毒(TRV)構(gòu)建而來(lái)的病毒載體，在番茄中成功沉默VIGS報(bào)告基因-八氫番茄紅素脫氫酶(PDS)基因，使番茄葉片表現(xiàn)白化現(xiàn)象，從而成功構(gòu)建了番茄VIGS體系，為大規(guī)模番茄基因功能分析提供了技術(shù)平臺(tái)。另外，還對(duì)獲得較好VIGS效果的番茄生長(zhǎng)條件進(jìn)行了探索。
　　 番茄白粉病(Oidium neolycopersici)是一種世界性植物病害，由活體寄

3、生真菌番茄白粉病菌引起，在番茄(Solanum lycopersicum)的整個(gè)生育期間均可發(fā)生，流行時(shí)間長(zhǎng)，蔓延速度快，嚴(yán)重影響番茄的生產(chǎn)。目前對(duì)番茄白粉病的防治主要是利用殺菌劑，導(dǎo)致生產(chǎn)成本增加和環(huán)境污染。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗性品種是防治番茄白粉病的最佳途徑之一，因此，鑒定番茄白粉病抗性反應(yīng)關(guān)鍵基因顯得尤為重要。
　　 我們以前利用cDNA-AFLP技術(shù)和電子作圖，確定了一個(gè)功能未知的番茄白粉病抗性反應(yīng)關(guān)鍵基因的候選基因DL