幾種抗氧化劑組合對(duì)豬精子冷凍保存效果的影響.pdf

1、豬精子的抗凍性較差，在冷凍解凍過(guò)程中容易受到活性氧(ROS)增多引起的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。為了提高冷凍-解凍后豬精子質(zhì)量，探索抗氧化劑對(duì)冷凍保存豬精液的保護(hù)作用，本試驗(yàn)以長(zhǎng)白公豬為試驗(yàn)對(duì)象，在精液冷凍稀釋液中添加超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、褪黑素(MLT)、谷胱甘肽(GSH)等抗氧化劑，采用0.5ml細(xì)管精液冷凍劑型對(duì)豬精液進(jìn)行冷凍；并檢測(cè)解凍后精子活力、質(zhì)膜完整性、頂體完整性及DNA完整性，以評(píng)價(jià)豬精液冷凍效果。同時(shí)探

2、索精子染色質(zhì)擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)(SCD)檢測(cè)冷凍保存豬精子DNA完整性所適合的實(shí)驗(yàn)條件，應(yīng)用于試驗(yàn)中精子DNA完整性檢測(cè)，并探討SCD試驗(yàn)結(jié)果與精子活力、質(zhì)膜完整性、頂體完整性的相關(guān)性。
　　 試驗(yàn)表明，采用的裂解液配方為：Tris0.2mol/L;NaCl2.5mol/L;DTT0.2mol/L;Triton X-1001％的SCD實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)冷凍-解凍后豬精子DNA完整性。冷凍稀釋液中分別單獨(dú)添加SOD200U/mL、CAT200U/

3、mL、MLT0.05mg/mL、GSH0.5mg/mL，能夠顯著提高精子活力、質(zhì)膜完整性、頂體完整性及DNA完整性(P＜0.05）。聯(lián)合添加SOD和CAT的最佳濃度為SOD100U/mL×CAT200U/mL，精子活力及質(zhì)膜完整率極顯著高于兩種抗氧化劑單獨(dú)添加的效果(P＜0.01），DNA完整率有顯著提高(P＜0.05)，在頂體完整率上無(wú)顯著差異（P＞0.05）。聯(lián)合添加MLT和GSH的最佳濃度為MLT0.05mg/mL×GSH0.5m

4、g/mL，精子活力及頂體完整率都顯著高于兩種抗氧化劑單獨(dú)添加的效果(P＜0.05），在質(zhì)膜完整率及DNA完整率上無(wú)顯著差異(P＞0.05）。聯(lián)合添加SOD×CAT與聯(lián)合添加MLT×GSH相比較，前者質(zhì)膜完整率顯著高于后者（P＜o(jì).05），后者頂體完整率顯著高于前者(P＜0.05），在活力和DNA完整率上無(wú)顯著差異(P＞0.05)。冷凍-解凍后豬精子DNA完整性與精子活力高度相關(guān)(r=0.670，P＜0.01);與質(zhì)膜完整性相關(guān)系數(shù)為0.