豬長(zhǎng)效精液稀釋劑的研制及臨床應(yīng)用研究.pdf

1、豬精液的常溫保存技術(shù)是實(shí)行人工授精的重要環(huán)節(jié)，對(duì)降低生產(chǎn)成本，提高經(jīng)濟(jì)效益有非常重要的意義。然而，我國(guó)常溫保存精液的有效時(shí)間一般僅為2～3d，大多數(shù)豬場(chǎng)采用自配的稀釋液，其保存時(shí)間短。目前國(guó)內(nèi)使用的豬精液常溫保存稀釋液大多從國(guó)外購(gòu)買，進(jìn)口商品價(jià)格比較貴，增加了養(yǎng)殖成本，所以開發(fā)出保存時(shí)間長(zhǎng)、保存效果良好、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的稀釋劑對(duì)人工授精技術(shù)和降低人工授精成本具有重要的意義。本課題對(duì)豬精液常溫保存稀釋液的配方物質(zhì)、產(chǎn)品使用和臨床同類產(chǎn)品的驗(yàn)證試

2、驗(yàn)進(jìn)行了深入研究。試驗(yàn)從配方用物質(zhì)著手，比較了幾種添加物對(duì)精液保存效果的影響，利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出精液稀釋劑的基礎(chǔ)配方，并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行考察，制定出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，與市場(chǎng)上同類產(chǎn)品進(jìn)行精液保存試驗(yàn)和臨床繁殖試驗(yàn)驗(yàn)證。
　　 課題研究中配方的篩選采用6因素4水平的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，組方中精液與稀釋劑的比例設(shè)定為1:2，通過(guò)精子活力的測(cè)定，確定各成分的比例；配方篩選后，設(shè)定不同的精液與稀釋液配比，分別在0h、24h、48h、72h、96h、1

3、20h測(cè)定精子的活力，得出最佳稀釋比；利用穩(wěn)定性加速試驗(yàn)，在高、中、低溫度(4℃，40℃，60℃)和濕度(60％，45％,28％)條件下考察精液稀釋劑的穩(wěn)定性；精液稀釋劑中加入不同的抗微生物藥物(青霉素+鏈霉素，恩諾沙星，硫酸粘桿菌素，恩諾沙星+二性霉素B)，設(shè)定精液和精液稀釋劑的稀釋比分別為1:1、1:2、1:4、1:8，在17℃條件下分別在0h、24h、48h、72h、96h、120h檢查其保存活力，選擇合適的抗生素；在相同條件下和

4、進(jìn)口BTS、ZorPVa精液稀釋劑進(jìn)行精液稀釋保存試驗(yàn)，以精子活力和保存時(shí)間為指標(biāo)，比較其保存效果；設(shè)立與國(guó)外同類產(chǎn)品的對(duì)照試驗(yàn)，測(cè)定所試精液稀釋劑的人工授精的受胎率(％)與窩產(chǎn)活仔數(shù)。
　　 通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出精液稀釋劑的配方中葡萄糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉、EDTA、氯化鉀的比例為0.8：0.13:0.027:0.027:0.016；通過(guò)不同的稀釋比進(jìn)行稀釋保存試驗(yàn)得出，在相同時(shí)間內(nèi)精液與精液稀釋液比例為1:1～2時(shí)精子活力

5、較強(qiáng)；分別設(shè)定高，中、低3個(gè)溫度和濕度對(duì)稀釋粉的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，研究結(jié)果表明：精液稀釋劑適合低溫陰涼處保存，最好是在4℃冰箱內(nèi)，濕度在28％以下；通過(guò)不同抗生素的添加試驗(yàn)，得出稀釋劑中加入恩諾沙星和二性霉素B效價(jià)較高，并且精子活力維持時(shí)間較長(zhǎng)；研制精液稀釋劑保存時(shí)間在5d以上有效活力在0.7級(jí)以上，比BTS保存效果好，和ZorPVa保存效果相當(dāng)；以進(jìn)口ZorPVa精液稀釋粉為對(duì)照品，進(jìn)行臨床繁殖驗(yàn)證試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明：試驗(yàn)品和對(duì)照品的受