楸樹優(yōu)良類型—圓基長果楸組織培養(yǎng)技術的研究.pdf

1、楸樹(Catalpabungei)為紫葳科梓樹屬的落葉喬木，原產(chǎn)于中國。楸樹是我國傳統(tǒng)栽培的珍貴用材樹種和著名園林觀賞樹種，古人譽以“木王”之美稱。楸木物理性能好，化學性能穩(wěn)定，廣泛應用于高級家具、器具以及造船、軍工等特殊用材。同時楸樹樹體高大，根系深，應用于農(nóng)田防護林網(wǎng)，可以大幅提高區(qū)域的防護功能。作為綠化樹種，楸樹可用于居住區(qū)的綠化，提高植被覆蓋率。同時又具有滯塵、吸收有害氣體等多方面功能，尤其對二氧化硫、氯氣等有毒氣體有較強的抗性

2、，可明顯改善市區(qū)的生態(tài)環(huán)境。
　　 本實驗以圓基長果楸莖段為外植體誘導叢生芽，研究以叢生芽途徑再生植株的快速繁殖方法。主要圍繞外植體選擇和滅菌、叢生芽誘導、叢生芽增殖、試管苗生根、試管苗出瓶煉苗移栽等幾方面進行，集中研究不同滅菌方法的選擇以及在叢生芽誘導、叢生芽增殖、試管苗生根等各個階段中優(yōu)化原始培養(yǎng)基的不同外源添加物及其用量的選擇、瓊脂濃度、以及抗氧化劑的選擇等多方面相關問題。試驗中的培養(yǎng)基方案采用正交設計，其中穿插單因素比較

3、的一般設計方法。數(shù)據(jù)采用SPSS軟件分析和單因素比較的數(shù)據(jù)直觀分析。本文意圖通過上述試驗，全面研究圓基長果楸組織培養(yǎng)各階段的外源主要影響因素和優(yōu)化培養(yǎng)基配方，篩選出最優(yōu)技術參數(shù)組合，建立圓基長果楸最優(yōu)再生體系，為楸樹優(yōu)良種質資源的保存和優(yōu)良類型的推廣奠定基礎，同時也為圓基長果楸標準化、產(chǎn)業(yè)化、規(guī)?；缣峁┘夹g支持，解決目前市場上楸樹優(yōu)良品種種苗短缺的問題。
　　 研究結果表明：
　　 1．圓基長果楸外植體最佳的滅菌方法

4、是：圓基長果楸莖段→洗衣粉上清液浸泡30分鐘并用軟刷刷去表面污垢→自來水沖洗30min→1.25g·L-1多菌靈浸30分鐘-超靜臺上70％酒精浸8S-無菌水沖洗2次→0.1％升汞浸10min→無菌水沖洗10次→高壓滅菌過的100mg·L-1PVP浸泡5分鐘→接種在MS+6BA0.8mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+30mg·L-1青霉素+30mg·L-1鏈霉素+1g·L-1活性炭的培養(yǎng)基上，成功率為16.67％。同時發(fā)現(xiàn)在三月份到

5、四月份之間選擇晴天午后的優(yōu)樹半木質化萌芽條，截取長約0.5～1cm莖段作為外植體較為適宜，易萌動，污染輕，褐化少。在進行初代培養(yǎng)的實驗中還發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中添加0.5mg·L-1的山農(nóng)一號，可以明顯降低污染率且不會抑制腋芽的萌發(fā)。
　　 2．影響圓基長果楸腋芽萌發(fā)的外源添加物主要有：青霉素和活性炭。最適宜培養(yǎng)基外源添加物是青霉素30mg·L-1＋活性炭1.0g·L-1+PVP100mg·L-1。
　　 3．影響圓基長果楸叢生芽

6、增殖的最佳外源添加物是多效唑，最適添加量為0.2mg·L-1。同時發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中適當添加一些抗氧化劑如Vc，可以有效減弱褐化，而不添加瓊脂的處理，增殖效果會更好。
　　 4．在生根階段外源添加物中除了活性炭可以顯著抑制新生根的生長及伸長之外，其他外源添加物對新生根的生長，伸長，增加均無顯著影響，而且同時發(fā)現(xiàn)在5g·L-1活性炭存在的條件下，添加0.8mg·L-1的IBA獲得了較高的生根率，根也較長.說明活性炭與IBA皆發(fā)揮了作用

7、。液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)的生根率差異不是太大，以液體培養(yǎng)基的處理組試管苗生根數(shù)最多，為22.43根且根長也較長。
　　 5．在試管生根苗移栽時附加1/2MS的母液，會顯著提高移栽成活率。并且初步探索圓基長果楸的瓶外生根技術是：在5月中旬至六月之間，將圓基長果楸試管苗從培養(yǎng)基中取出，剪取高為2.5～3.0cm的幼嫩無根組培苗，保留2～3片葉子。150mg·L-1濃度的2，4一D，處理24h，最后再用0.3％高錳酸鉀浸30min，扦插于