藥用植物馬藍(lán)和枳的遺傳多樣性分析研究.pdf

1、馬藍(lán)(Strobilanthescusia(Nees)Ktze.)是爵床科多年生植物,福建省內(nèi)福州、莆田、三明等地有分布,具有清熱解毒、抗菌消炎、涼血的功能,用于治療流感、流腦及肝炎等效果顯著。
　　 枳(Poncirustrifoliate(Linn.))是蕓香科枳屬的落葉灌木或小喬木,福建省內(nèi)福州、莆田等地有分布,它的果實(shí)綠衣枳實(shí)具有活血化瘀、鎮(zhèn)痛作用,還可以做柑橘類(lèi)的砧木,也是一種極好的觀賞植物。
　　 藥用植物馬

2、藍(lán)和枳都是福建省道地藥材,但藥用資源受到歷史的破壞和栽培上的不規(guī)范等原因,很多群體尤其是野生種群正逐漸消失,因此很有必要對(duì)福建省的馬藍(lán)和枳的種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析,并對(duì)研究的種源進(jìn)行鑒別。研究成果如下:
　　 1.采用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,對(duì)影響PCR反應(yīng)的各個(gè)成分和擴(kuò)增程序進(jìn)行了優(yōu)化,建立了馬藍(lán)的ISSR技術(shù)體系。采用單因素、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)建立了枳的ISSR和SRAP技術(shù)體系。
　　 2.利用建立的馬藍(lán)ISSR體系篩選

3、得到17條多態(tài)性高、條帶清晰、重復(fù)性好的。ISSR引物。物種水平上的多態(tài)性較高,17條引物共擴(kuò)增出139個(gè)位點(diǎn),105個(gè)多態(tài)性位點(diǎn),比率為75.54％。其中莆田新縣多態(tài)性位點(diǎn)百分率最高為44.60％,福州嶺頭多態(tài)性位點(diǎn)百分率最低為13.67％。
　　 以建立的枳ISSR和SRAP體系為基礎(chǔ),篩選得到枳的ISSR引物18個(gè),SRAP引物23對(duì),其中18個(gè)ISSR引物擴(kuò)增出174個(gè)位點(diǎn),多態(tài)性位點(diǎn)157個(gè),多態(tài)性比例60.92％;2

4、3對(duì)SRAP引物共擴(kuò)增出237個(gè)位點(diǎn),多態(tài)性位點(diǎn)157個(gè),占66.24％。PPB最高的均為福州后嶺,PPB最低有所差異,ISSR是福州大坪,SRAP是莆田大洋。
　　 3.利用POPGENE1.32軟件分別對(duì)馬藍(lán)和枳進(jìn)行了基于ISSR的遺傳多樣性分析。馬藍(lán)5個(gè)種群之間的遺傳多樣性Ht=0.2095,種內(nèi)遺傳多樣性Hs=0.0818,基因分化系數(shù)為Gst=0.6097,即種群間遺傳變異占種群遺傳變異的60.97％,39.03％的遺

5、傳變異在種內(nèi)進(jìn)行。種群間基因流為Nm=0.3201。說(shuō)明只有有限的基因流,遺傳漂變或地理微環(huán)境引起較大變異。
　　 枳4個(gè)種群之間的遺傳多樣性Ht=0.1837,種內(nèi)遺傳多樣性Hs=0.1224,基因分化系數(shù)為Gst=0.3336,即種群間遺傳變異占種群遺傳變異的33.36％,66.64％的遺傳變異在種內(nèi)進(jìn)行。種群間的遺傳分化系數(shù)計(jì)算的基因流Nm=0.9990。不同居群間存在著較小的遺傳分化,地理微環(huán)境對(duì)遺傳多樣性的影響較大,遺

6、傳變異在不同的居群內(nèi)更加豐富。
　　 4.利用SPSS13.0對(duì)馬藍(lán)和枳的種源進(jìn)行了聚類(lèi)分析。馬藍(lán)在遺傳相似系數(shù)為0.6960處,分為5類(lèi),第一類(lèi)為莆田書(shū)峰、莆田大洋、莆田象溪、泉州永春2、莆田龍華、福州黃楮林、福州旗山、莆田新縣、泉州永春1;第二類(lèi)為貴州獨(dú)山;第三類(lèi)為三明上豐、三明濟(jì)陽(yáng)、福州赤壁;第四類(lèi)為福州青云山;第五類(lèi)為福州嶺頭。
　　 枳的聚類(lèi)有所差異,ISSR在遺傳相似系數(shù)為0.6940處,分為3類(lèi),第一類(lèi)為福

7、州劉洋、三明荷林、三明十里鋪、福州坂東、福州后嶺、福州下祝、莆田洋坪、莆田車(chē)口、福州金沙、福州雄江。第二類(lèi)為南平建陽(yáng)、三明愈坊、莆田、福州洋頭、莆田大洋、福州田垱、福州湖頭。第三類(lèi)聚類(lèi)為福州大坪。與ISSR相比較,SRAP聚類(lèi)圖有所差異,在遺傳相似系數(shù)為0.7490處,分為四類(lèi)。但第一大類(lèi)基本相同,差異不大?？赡苁怯捎趦煞N分子標(biāo)記的原理不同,而引起聚類(lèi)結(jié)果有所差異。
　　 5.分別建立了馬藍(lán)和枳種質(zhì)資源的數(shù)字指紋識(shí)別碼。用U82