氟苯尼考混懸乳劑注射液毒理學(xué)及在豬體內(nèi)殘留的初步研究.pdf

1、氟苯尼考又名氟甲砜霉素，是美國(guó)先靈-葆雅公司于1988年研發(fā)的一類動(dòng)物專用的氯霉素類抗生素。氟苯尼考抗菌譜廣、吸收良好、在體內(nèi)分布廣泛、無殘留或殘留量很低、無潛在性致再生障礙性貧血作用等，自1990年首次在日本上市用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)以來，被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)魚類及牛、豬、雞等畜禽細(xì)菌性疾病的防治。1999年，我國(guó)批準(zhǔn)該藥為國(guó)家二類新獸藥，用于豬、牛、禽類等多種動(dòng)物細(xì)菌性疾病的防治。目前常用的劑型有預(yù)混劑、注射劑、可溶性粉等。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于氟苯尼

2、考混懸乳劑注射液的毒理學(xué)文獻(xiàn)報(bào)道很少，同時(shí)也無氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內(nèi)殘留的研究報(bào)道。本課題通過對(duì)氟苯尼考混懸乳劑注射液毒理學(xué)及在豬體內(nèi)殘留的初步研究，為臨床用藥提供理論依據(jù)，同時(shí)為估算氟苯尼考混懸乳劑注射液在豬體內(nèi)的休藥期提供參考。
　　 1氟苯尼考混懸乳劑注射液的毒理學(xué)研究
　　 本試驗(yàn)就氟苯尼考混懸乳劑注射液對(duì)昆明種小鼠的急性毒性、蓄積毒性、亞慢性毒性、致突變毒性和對(duì)SD大鼠的致畸毒性進(jìn)行了研究。采用改良寇氏法

3、進(jìn)行了對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)，求得半數(shù)致死劑量（LD50）和劑量-死亡率曲線。采用蓄積系數(shù)劑量遞增法進(jìn)行了對(duì)小鼠的蓄積毒性試驗(yàn)，并進(jìn)行了耐受性試驗(yàn)；設(shè)高（1/5 LD50）、中（1/10 LD50）、低（1/20 LD50）三個(gè)劑量組，另設(shè)有機(jī)溶劑和生理鹽水對(duì)照組，連續(xù)28 d對(duì)小鼠腹腔注射20％氟苯尼考混懸乳劑注射液，進(jìn)行了亞慢性毒性試驗(yàn)。結(jié)果：氟苯尼考混懸乳劑注射液小鼠口服的LD50大于5000 mg·kg-1，按照外源化學(xué)物相對(duì)毒性

4、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)屬于實(shí)際無毒藥物。其腹腔注射LD50為3140 mg·kg-1，LD50的95％可信限為2930～3370 mg·kg-1。蓄積毒性試驗(yàn)中無小鼠死亡，蓄積系數(shù)K>5，表明氟苯尼考在小鼠體內(nèi)有弱蓄積。耐受性試驗(yàn)表明，試驗(yàn)組小鼠對(duì)氟苯尼考乳劑注射液產(chǎn)生了一定程度的耐受性。亞慢性毒性試驗(yàn)中，試驗(yàn)前1周高劑量組小鼠有輕微中毒癥狀：豎尾、搔鼻、輕度興奮和驚跳，增重緩慢，其它試驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠生長(zhǎng)活動(dòng)基本正常，試驗(yàn)期內(nèi)無小鼠死亡。血常規(guī)和血

5、生化指標(biāo)檢查結(jié)果表明，在此試驗(yàn)條件下，氟苯尼考混懸乳劑注射液對(duì)小鼠血常規(guī)指標(biāo)和肝腎功能有一定的影響。此外，病理學(xué)組織檢查結(jié)果表明，高劑量組小鼠肝臟和腎臟有炎癥反應(yīng)，其它各組臟器無明顯病理變化。小鼠精子畸形和骨髓微核試驗(yàn)結(jié)果均呈陰性，表明氟苯尼考混懸乳劑注射液對(duì)小鼠無致突變毒性。大鼠致畸試驗(yàn)結(jié)果表明，在此試驗(yàn)條件下，氟苯尼考混懸乳劑注射液對(duì)SD大鼠有一定的胚胎毒性。氟苯尼考混懸乳劑注射液的毒理學(xué)研究結(jié)果初步表明，該藥臨床應(yīng)用毒性小，安全范

6、圍廣。
　　 2氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內(nèi)殘留的初步研究
　　 建立了高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)豬體內(nèi)氟苯尼考及代謝標(biāo)識(shí)物氟苯尼考胺的殘留。以20 mg·kg-1單次劑量于豬股四頭肌肌肉注射20％氟苯尼考混懸乳劑注射液。于給藥后的第1、2、3、5，9、14、20、25天剖殺采樣。豬前腔靜脈放血致死，快速取其肝臟、腎臟、肺臟、肌肉、皮膚+脂肪等組織。樣品組織經(jīng)勻漿、提取、濃縮、凈化、有機(jī)濾膜過濾后，樣品上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果

7、顯示：氟苯尼考和氟苯尼考胺在10～1000μg·kg-1組織濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.99，最低檢測(cè)限為10μg·kg-1。將氟苯尼考和氟苯尼考胺以高、中、低（500、100、20μg·kg-1）3個(gè)濃度水平分別添加到空白組織中進(jìn)行添加回收率和精密度試驗(yàn)，測(cè)得肌肉、肝臟、腎臟、肺臟、脂肪+皮膚組織中氟苯尼考和氟苯尼考胺回收率均大于75％，日內(nèi)變異和日間變異RSD％均小于10％。殘留消除研究結(jié)果顯示：氟苯尼考及氟苯尼

8、考胺在動(dòng)物組織中分布較廣，其中肝臟含量最高，其次為腎臟和肺臟，皮脂中藥物含量也較高，肌肉中最低。豬單劑量肌肉注射氟苯尼考混懸乳劑注射液后的前5天，各組織內(nèi)氟苯尼考及氟苯尼考胺消除較快，停藥后的6～14天，消除速率趨于平緩，停藥后的第25天各組織中均檢測(cè)不到氟苯尼考及氟苯尼考胺。殘留消除曲線表明，氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內(nèi)的殘留消除很快，殘留量低。根據(jù)歐盟、中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及試驗(yàn)結(jié)果，以單劑量20 mg·kg-1給豬肌肉注射20％氟苯尼考混