版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、硬脂酰輔酶A去飽和酶(stearoyl-CoA desaturates,SCD)是合成單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)的限速酶,是調(diào)節(jié)肝臟脂肪生成和脂類氧化的關(guān)鍵控制點。經(jīng)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,2014年全球100多個羅非魚養(yǎng)殖地區(qū)的年產(chǎn)量總和達(dá)5446800t,其中中國羅非魚產(chǎn)量在2014年增長至I450000t。由于羅非魚對低溫環(huán)境耐受力較差以及養(yǎng)殖過程中的不當(dāng)投喂,使
2、羅非魚產(chǎn)業(yè)受到重大的經(jīng)濟(jì)損失。吉富羅非魚是我國南方各省主要的淡水經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖魚類,研究吉富羅非魚的SCD基因?qū)τ谔岣呖沟蜏啬芰疤岣呱唐肤~的營養(yǎng)價值具有重要意義。本實驗是國內(nèi)首次從吉富羅非魚體內(nèi)克隆得到SCD基因的cDNA序列,同時對基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)時序特征進(jìn)行分析。并結(jié)合飼料中的脂肪酸組成和水溫對吉富羅非魚生長、生理、脂肪酸組成與SCD表達(dá)的影響,從營養(yǎng)、環(huán)境及分子水平較為深入研究了SCD的表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。為羅非魚的脂肪酸調(diào)控以及培育高品質(zhì)、
3、高營養(yǎng)價值的羅非魚提供了一定的理論依據(jù)。
1.吉富羅非魚SCD基因的克隆與序列分析
本研究利用實時熒光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速擴(kuò)增法(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技術(shù)克隆獲得了吉富羅非魚的SCD基因的cDNA全長序列。結(jié)果顯示,SCD基因的cDNA總長為1333bp,由173bp5'非編碼區(qū)、152bp3'非編碼區(qū)以及編碼
4、335個氨基酸的1008bp開放閱讀框組成。與GenBank中,尼羅羅非魚、莫桑比克羅非魚相似度較高,基因序列同源性分別達(dá)99%和98%,氨基酸序列同源性分別為99%和97%;與其他魚類SCD基因序列相似度達(dá)83%以上,氨基酸序列同源性達(dá)79%以上。與其他魚類的SCD基因相似度很高,說明該基因在物種間高度保守。
2.吉富羅非魚SCD基因組織及時空表達(dá)規(guī)律
本研究通過RT-PCR檢測了SCD基因在吉富羅非魚受精卵及胚胎
5、發(fā)育階段(受精后1h、12h、24h、48h、72h、96h)、仔稚魚階段(出膜后1d、5d、10d、15d、20d、25d、30d)及成魚組織(血、肝臟、脾臟、腎臟、心臟、前腸、后腸、性腺、腦、皮膚、肌肉、鰓)中的表達(dá)。在胚胎發(fā)育的早期階段1h和12h時,SCD基因的表達(dá)量較高,24h時出現(xiàn)明顯下降的趨勢,48h時有所升高,隨后逐漸下降,96h最低。在受精卵及胚胎的早期階段(1-15d)時,SCD表達(dá)量較低,并呈現(xiàn)逐步上升的趨勢。20
6、d時SCD的表達(dá)量顯著升高,隨后呈先下降后升高的趨勢。表明了羅非魚在發(fā)育各個階段所需的脂肪酸營養(yǎng)不同,從而導(dǎo)致脂肪酸代謝酶的表達(dá)水平也有所不同,為吉富羅非魚繁殖階段及魚苗培育階段的脂肪酸營養(yǎng)的提供了理論依據(jù)。分別對雄魚和雌魚組織的SCD表達(dá)量進(jìn)行檢測,結(jié)果表明該基因在吉富羅非魚雄性和雌性的各組織表達(dá)量的高低有所不同,在肝臟中表達(dá)量均達(dá)到最高,其次在雄魚的精巢中表達(dá)量較高,而雌魚的肌肉中的表達(dá)量僅次于肝臟。在雌魚和雄魚的脾臟中表達(dá)量均為最
7、低。證明了吉富羅非魚雌魚與雄魚的脂肪酸代謝機(jī)制具有一定差異,為進(jìn)一步研究羅非魚UFA的合成途徑及調(diào)控機(jī)理提供了一定理論基礎(chǔ)。
3.溫度對吉富羅非魚SCD基因表達(dá)的研究
本實驗對吉富羅非魚在22℃、28℃和34℃三種不同養(yǎng)殖溫度下對SCD基因及肌肉脂肪酸相關(guān)性進(jìn)行分析,同時對生長指標(biāo)、血常規(guī)及血液生理指標(biāo)進(jìn)行了測定。28℃終體重顯著高于22和34℃(P<0.05),F(xiàn)CR和PER均高于22和34℃。不同組間的肌肉脂肪酸
8、組成具有顯著性差異(P<0.05),SFA含量隨溫度的升高而降低而UFA含量呈相反的變化趨勢。22℃時羅非魚含較高的PUFA,尤其是n-3PUFA。SCD基因的表達(dá)及活性在低溫時顯著性升高(P<0.05),并且增加吉富羅非魚SCD的表達(dá)及活性可提升肌肉MUFA的合成。此外,降低水溫可降低機(jī)體TC和TG的含量,對于提高吉富羅非魚抗低溫能力具有一定幫助。
4.脂肪源對吉富羅非魚SCD基因表達(dá)的研究
日糧中添加不同脂肪源對
9、魚類的生長、生理等均具有一定影響,主要是由于飼料中脂肪酸組成不同,及不同魚類對脂肪酸利用不同引起的。本研究分別以椰子油(主要含SFA)、橄欖油(主要含MUFA)、魚油(脂肪酸比例均衡)及魚油+豆油(1∶1)(主要含PUFA)為脂肪源,進(jìn)行60d的養(yǎng)殖實驗。通過分析生長指標(biāo),發(fā)現(xiàn)飼料中添加脂肪酸比例較均衡的魚油組生長效果最好。添加不同脂肪源對血液和肝臟的生理指標(biāo)具有一定影響,添加SFA會引起血液與肝臟中TC、TG含量上升,而添加PUFA可
10、以有效地降低體脂的沉積。并且添加PUFA可以增強(qiáng)機(jī)體免疫力,提高抗氧化酶活性,降低氧化損傷。此外,飼料中不同脂肪酸組成對肌肉和肝臟脂肪酸的組成具有顯著性影響,魚體脂肪酸組成中的SFA及UFA分別于飼料脂肪酸組成的SFA及UFA呈正相關(guān)。并且飼料中高水平的PUFA會抑制SCD的表達(dá)與活性并降低體脂沉積而增加SFA會促進(jìn)SCD的表達(dá)與活性。因此,均衡日糧中的脂肪酸組成,適當(dāng)提高多不飽和脂肪酸含量有助于增加吉富羅非魚生長性能,降低血清脂肪沉積
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 鴨硬脂酰輔酶a去飽和酶1scd1酶聯(lián)免疫分析
- 奶山羊硬脂酰輔酶A去飽和酶單克隆抗體的制備與鑒定.pdf
- 鋅對大鼠肝臟硬脂酰輔酶A去飽和酶-1(SCD-1)的影響及其調(diào)控機(jī)理研究.pdf
- 飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長及脂肪代謝調(diào)節(jié)的研究.pdf
- 吉富羅非魚HL、LPL基因克隆及飼料膽堿和脂肪水平、投飼頻率和投喂水平對其在肝臟中表達(dá)的影響.pdf
- 秀麗線蟲中硬脂酰輔酶A去飽和化酶調(diào)節(jié)脂滴大小機(jī)制的研究.pdf
- 吉富羅非魚肝臟FAS、CAT基因的克隆及脂肪和膽堿、投飼率和投飼水平對其表達(dá)的影響.pdf
- 神經(jīng)酰胺參與硬脂酰輔酶A去飽和酶-1抑制腸癌細(xì)胞凋亡的過程.pdf
- 逆流運動及飼料脂肪對吉富羅非魚生長及體成分等的影響.pdf
- 水稻ω-6脂肪酸去飽和酶基因克隆與功能研究.pdf
- 表達(dá)ω-3脂肪酸去飽和酶基因的轉(zhuǎn)基因雞的研究.pdf
- 小麥硬脂酰基栽體蛋白脂肪酸去飽和酶基因(TaSSI1-1)的功能分析.pdf
- 油桐長鏈脂酰輔酶A合成酶基因的克隆與功能表達(dá)研究.pdf
- 鳳丹脂肪酸去飽和酶基因PoFAD2的克隆及其表達(dá)分析.pdf
- 吉富羅非魚對實用飼料中添加磷的營養(yǎng)響應(yīng).pdf
- 轉(zhuǎn)基因肉兔中脂肪酸去飽和酶的表達(dá)研究.pdf
- 銅對吉富羅非魚生理毒性及免疫相關(guān)基因表達(dá)影響的研究.pdf
- 體細(xì)胞克隆轉(zhuǎn)ω-3脂肪酸去飽和酶基因豬.pdf
- 復(fù)方中草藥對吉富羅非魚免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf
- 兩株海洋微藻△5脂肪酸去飽和酶的基因克隆.pdf
評論
0/150
提交評論