害蟲生防真菌對梯度劑量UV-B和UV-A輻射的離體與活體反應(yīng).pdf

1、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和綠僵菌(Metarhizium spp.)等絲孢類生防真菌已被開發(fā)成為多種制劑廣泛用于農(nóng)林害蟲防治。紫外輻射是影響生防真菌孢子制劑貯存和田間應(yīng)用效果的關(guān)鍵因素之一，而菌劑生產(chǎn)所用菌種對紫外輻射的耐受能力直接關(guān)系到其制劑的田間生態(tài)適應(yīng)性。本研究基于新建立的生防真菌對紫外輻射耐受力的定量評價技術(shù)體系，比較測定了不同地理和寄主來源的若干菌株的分生孢子對紫外線UV-B和UV-A的耐受力，篩選獲

2、得了較耐紫外輻射的菌株，并選取2個高毒力菌株評價了UV-B輻射對其殺蚜毒力的影響。主要內(nèi)容和結(jié)果分述如下：
　　 60株生防真菌耐UV-B紫外輻射能力的定量評價基于本實(shí)驗(yàn)室新建立的生防真菌耐紫外輻射能力的定量評價技術(shù)體系，測定了不同寄主或地理來源的60株白僵菌和綠僵菌對UV-B輻射的耐受力。供試菌株在25±1℃和12L:12D條件下培養(yǎng)7天后收集孢子，所用培養(yǎng)基為1/4薩氏培養(yǎng)基(SDAY)斜面。將各菌株的分生孢子粉分別懸浮于綠

3、僵菌萌發(fā)液(0.25％蛋白胨，0.25％酵母粉加0.2％海藻糖)或白僵菌萌發(fā)液(2％蔗糖加0.5％蛋白胨)中，適量涂于凹載玻片上，在Bio-Sun++紫外輻射箱中進(jìn)行平均加權(quán)波長為312 nm的UV-B不同劑量(0～1.2 J/cm2)的輻射處理。然后，將玻片在25±1℃和12L:12D條件下保濕培養(yǎng)24小時，用棉藍(lán)固定后在400×下鏡檢觀察孢子萌發(fā)率。結(jié)果顯示，各菌株的孢子萌發(fā)率(Is)與UV-B輻射劑量(D)間的關(guān)系很好地?cái)M合邏輯斯

4、蒂衰變模型Is=1/[1+exp(a+bD)](r2≥0.97)。根據(jù)擬合的模型計(jì)算出UV-B對各菌株的半致死劑量LD50，變化范圍從0.05 J/cm2到0.65 J/cm2不等，菌株間差異顯著。所測菌株中Maac5734(一株金龜子綠僵菌蝗變種)最耐UV-B輻射，但其LD50(0.65 J/cm2)僅相當(dāng)于杭州夏季晴天陽光中日累積UV-B輻射量的1/4左右。
　　 24株綠僵菌耐UV-A紫外輻射能力的定量評價測定方法同上，但

5、紫外輻射的波長和劑量不同，平均加權(quán)波長為365 nm，輻射劑量范圍為1-18 J/cm2。觀察孢子萌發(fā)率，結(jié)果顯示，各菌株的孢子存活指數(shù)(Is)與UV-A輻射劑量(D)間的關(guān)系擬合邏輯斯蒂衰變模型Is=1/[1+exp(a+bD)](r2≥0.999)。根據(jù)擬合的模型計(jì)算出UV-A對各菌株的半致死劑量LD50，變化范圍為2.78～10.46 J/cm2，菌株間差異顯著。最耐UV-A輻射的菌株是Mfm3606(一株黃綠僵菌小孢變種)，其L

6、D50(10.46 J cm-2)僅為陽光中日累積UV-A輻射量的一半。
　　 不同強(qiáng)度紫外輻射對Bb2860和Ma759分生孢子殺蚜毒力的影響選取對桃蚜(Myzus persicae)具有較強(qiáng)毒力的球孢白僵菌Bb2860和金龜子綠僵菌Ma759為供試菌株。每個菌株對平皿甘藍(lán)葉片上桃蚜的接種均以108個孢子/ml的懸液在標(biāo)準(zhǔn)噴塔中噴霧接種，設(shè)不噴菌作為空白對照。噴霧接種后，各菌株的接菌處理分別接受預(yù)期可導(dǎo)致分生孢子失活10％、5

7、0％和90％的3個UV-B輻射劑量的處理，并設(shè)接菌但不輻射的處理作為對照。每處理3次重復(fù)，每重復(fù)(平皿葉片)30～40頭無翅成蚜。輻射處理后，所有蚜蟲在25℃和12L:12D條件下飼養(yǎng)8天，逐同觀察記錄死亡率，蚜尸保濕培養(yǎng)2～3天后鏡檢。結(jié)果顯示，Bb2860接種后經(jīng)UV-B高劑量(0.86 J/cm2)、中劑量(0.45 J/cm2)、低劑量(0.03 J/cm2)的輻射處理，蚜蟲校正死亡率分別為13.3％，58.9％和82.3％，平

8、均致死期分別為3.69、3.84和3.94天。Ma759在高劑量(0.65 J/cm2)、中劑量(0.30 J/cm2)、低劑量(0.13 J/cm2)的UV-B輻射下，蚜蟲校正死亡率分別為18.1％，54.0％和88.7％，平均致死期分別為5.50、4.44和4.46天。由此說明，UV-B輻射顯著降低Bb2860和Ma759對蚜蟲的感染率，其輻射劑量引起的孢子失活比例與蚜蟲死亡率的下降幅度基本吻合，但不影響各菌株對蚜蟲的感染致死時間。