海南微藻種質(zhì)資源收集、鑒定及高含油量微藻的篩選.pdf

1、隨著礦物能源消耗和全球氣候問題的日益嚴重,研究、開發(fā)和利用可再生能源是人類社會、經(jīng)濟發(fā)展的大勢所趨。生物質(zhì)能作為可再生能源的重要組成部分,越來越受到世界各國的重視。微藻是一種具有光合作用效率高、環(huán)境適應能力強、油脂含量高、生物量大、生長周期短、易培養(yǎng)等眾多優(yōu)點的新型生物質(zhì)能源。海南省全年暖熱,雨量充沛,水域資源豐富,海域廣闊,藻類資源極為豐富,具有很大的潛在價值。本研究旨在通過試驗,收集得到一些海南特有的藻類資源,以豐富我國的藻類資源,

2、建立一套篩選有較大研究價值、經(jīng)濟價值微藻的有效方法,并篩選高生物量、含油量藻株,建立能源微藻核心種質(zhì)資源。為藻類的開發(fā)利用、生物質(zhì)能源的深入研究奠定基礎。
　　 采用水滴法、稀釋法、平板法等3種微藻的分離方法,對11個采樣點的樣品進行藻株的分離、純化,得到87株微藻,其中海水藻34株,淡水藻53株。并對分離得到的部分微藻進行細胞形態(tài)學鑒定,初步鑒定了盤星藻(Pediastrum biraditum)、二形柵藻(Scenedesm

3、us dimorphus)、小空星藻(Coelastrum microporum)等10余個不同的藻種。對編號DWZ-8的藻株進行了較深入的研究,發(fā)現(xiàn)DWZ-8以似親孢子生殖方式繁殖,葉綠體分裂方式屬于獨特的劈裂式分裂,僅有一個1.4-2.1μm的蛋白核,類囊體呈管狀,方向多樣,有平行與切面的也有垂直與切面的。采用分子生物學的方法對其進行鑒定發(fā)現(xiàn)DWZ-8核編碼的18S rDNA長2500個堿基對,含有兩個GI內(nèi)含子,其葉綠體編碼的16

4、S rDNA長1488 bp,無內(nèi)含子;與親緣關系較近的藻種進行比較,差異均較大。綜合分析DWZ-8各方面的鑒定指標均與海南橡膠藻(Heveochlorella hainangensis)最為接近,筆者初步認為DWZ-8為橡膠藻屬的一個新種(Heveochlorella species)。
　　 本試驗通過對與微藻材料Hhw中中性脂尼羅紅染色的熒光強度測定相關的各項指標進行梯度試驗。得到尼羅紅熒光分光光度法測脂的最優(yōu)條件為:EX

5、485nm、微藻細胞密度OD690=0.858、DMSO的加入量250μl/ml、染色2min、NR=I.2μg/ml。采用該優(yōu)化條件對其他微藻進行染色測定其中性脂含量均可行。
　　 通過試驗比較得到了一種適合實驗室使用的從微藻中快速提取粗脂肪的方法,即改良的酸水解法。同時建立了利用尼羅紅染色顯微觀察與直接提取法相結合的篩選高含油量微藻的平臺,并篩選得到一些含油量較高的藻株。
　　 對2個藻株的脂肪酸成分進行分析發(fā)現(xiàn),橡