氯嘧磺隆對(duì)兩種土壤中細(xì)菌和氨氧化細(xì)菌amoA基因多樣性的影響.pdf

1、分析氯嘧磺隆對(duì)兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中細(xì)菌多樣性和氨氧化細(xì)菌amoA基因多樣性的影響，為評(píng)價(jià)氯嘧磺隆對(duì)土壤微生物的影響提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。采用直接法從土壤中提取總DNA，用細(xì)菌通用引物擴(kuò)增16S rDNA V3區(qū)，綜合可培養(yǎng)的方法和DGGE技術(shù)分析土壤樣品中的微生物群落結(jié)構(gòu);用特異引物以總DNA為模板擴(kuò)增氨氧化細(xì)菌amoA基因，構(gòu)建amoA基因文庫(kù)，通過(guò)RFLP技術(shù)分析土壤樣品中的氨氧化細(xì)菌群落特征。
　　 采用平板計(jì)數(shù)

2、方法，研究了氯嘧磺隆對(duì)兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中可培養(yǎng)微生物數(shù)量的影響，發(fā)現(xiàn)氯嘧磺隆的處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過(guò)量用量，E）時(shí)，7d后兩種供試土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中好氧細(xì)菌的數(shù)量有最大的抑制作用，而且濃度越高抑制越明顯;氯嘧磺隆的處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過(guò)量用量，E），14d后對(duì)供試土壤

3、（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中好氧細(xì)菌的數(shù)量有顯著的抑制作用，而且高濃度比低濃度的抑制明顯。但隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制作用開(kāi)始減弱，并于28 d后處理與對(duì)照水平接近。
　　 采用PCR-DGGE方法，研究了氯嘧磺隆對(duì)兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中細(xì)菌多樣性的影響。發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的整個(gè)處理周期中氯嘧磺隆處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過(guò)量用量，E）時(shí)，供試紅壤的細(xì)菌多樣性顯

4、著降低，而對(duì)供試黃棕壤中細(xì)菌多樣性影響較小。同時(shí)，7d、14d氨嘧磺隆的兩種處理濃度對(duì)供試的兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的細(xì)菌群落有一定的影響，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)氯嘧磺隆的兩種處理濃度對(duì)供試黃棕壤中細(xì)菌群落影響減小，這與平板計(jì)數(shù)結(jié)果一致。
　　 采用PCR-RFLP方法，構(gòu)建26個(gè)amoA基因文庫(kù)，共挑取1014個(gè)陽(yáng)性克隆子。分析發(fā)現(xiàn)氯嘧磺隆的加入對(duì)供試土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的氨氧化細(xì)菌amoA基因多樣性產(chǎn)生了

5、一定的影響。供試的兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中氯嘧磺隆處理濃度為11μg·kg-1 soil(正常用量,N)110μg·kg-1soil（過(guò)量用量，E）時(shí)的最優(yōu)勢(shì)OTU變化較大，且與對(duì)照的最優(yōu)勢(shì)OUT相比變化明顯。兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的處理與各自的對(duì)照amoA基因均勻度指數(shù)、香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)變化較小。黃棕壤處理amoA基因豐富度指數(shù)在早期比對(duì)照低，并與42 d恢復(fù)到對(duì)照水平;整個(gè)培養(yǎng)周期中紅壤處理amoA基