病原生物學(xué)教研室

1、病原生物學(xué)教研室Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University,醫(yī)學(xué)微生物學(xué)Medical Microbiology,,,第二十一章 腸道病毒 (enterovirus),Enterovirus是小RNA病毒科 的一個屬。它們在人類消化道細(xì)胞繁殖，然后通過血液侵犯其他器官，引起各種臨床綜合病癥。 人類腸道病毒有： 1、脊髓灰質(zhì)炎病毒，3個

2、血清型 2、Coxsackie 病毒，A組23個血清型，B組6個血清型 3、ECHO 病毒，31個血清型 4、新型腸道病毒，68、69、70、71,腸道病毒的共同特性：①病毒體呈球形，27nm,為20面體對稱結(jié)構(gòu),無包膜。②基因組為單股正鏈RNA。③在宿主細(xì)胞漿內(nèi)增殖，迅速引起細(xì)胞病變。④耐乙醚，耐酸,56℃30min可使病毒滅，對紫外線、干燥敏感。⑤主要經(jīng)糞口途徑傳播，臨床表現(xiàn)多樣。,脊髓

3、灰質(zhì)炎病毒 (poliovirus),脊髓灰質(zhì)炎病毒是脊髓灰質(zhì)炎病原體，引起小兒麻痹癥。1840年德國的Heiner描述了脊髓灰質(zhì)炎。1909年Landsteiner和Popper首次感染猴子獲得成功，1949年Enders等用組織培養(yǎng)法分離脊髓灰質(zhì)炎病毒，確定有三個血清型。1953年第六次國際微生物大會上病毒委員會推薦正式命名為脊髓灰質(zhì)炎病毒。1955年Salk滅活疫苗

4、（IPV），1961年Sabin減毒活疫苗（OPV）,一、生物學(xué)特性,（一）形態(tài)結(jié)構(gòu)（圖） 1、病毒體呈球形，無包膜。27～30nm，20面體立體對稱。 2、外殼由32～42個殼微粒（VP1、VP2、VP3、VP4）組成，VP1、VP2、VP3位于病毒衣殼表面（中和抗原），VP4位于衣殼的內(nèi)部。 3、基因組為單股正鏈RNA，其5`端的Vpg與RNA合成與基因組裝配有關(guān)； 3`端帶有polyA尾，加強(qiáng)其感染性。

5、,病毒RNA為感染性核酸 Polyprotein 結(jié)構(gòu)蛋白 功能蛋白 （ VP1-VP4） （酶及其它） 降解真核細(xì)胞核糖體帽

6、 結(jié)合蛋白，封閉細(xì)胞 mRNA的翻譯,,,,,（二）培養(yǎng)特性腸道病毒在靈長類上皮樣細(xì)胞中生長最好。常用的有猴腎、人胚腎、人胚肺、人羊膜和HeLa細(xì)胞等。病毒在胞漿內(nèi)復(fù)制，迅速（24小時）引起細(xì)胞病變，致使細(xì)胞變圓、壞死、脫落。,（三）抗原組成與血清型 脊髓灰質(zhì)炎病毒有三個血清型（I、II、III）。用補(bǔ)體結(jié)合試驗查出病毒有兩種抗原，一種稱為D（致密）抗原，存在于成熟的

7、、有感染性的病毒顆粒中，是該病毒的中和抗原,具型的特異性。另一種稱為C（無核心）抗原,存在于經(jīng)過56℃滅活或未成熟的空心病毒顆粒，與三型病毒的抗血清均呈補(bǔ)體結(jié)合陽性反應(yīng)。,（四）抵抗力 病毒對理化因素的抵抗力較強(qiáng)，在胃腸道能耐受胃酸、蛋白酶和膽汁的作用，在室溫下可存活數(shù)日，但50℃可迅速破壞病毒。,二、致病性與免疫性,人是脊髓灰質(zhì)炎病毒的唯一天然宿主。這是因為在人細(xì)胞膜表面有一種受體（免疫球蛋白超家族的細(xì)胞粘附分子），與

8、病毒衣殼上的結(jié)構(gòu)蛋白VP1具有特異的親和力，使病毒得以吸附到細(xì)胞上。,（一）傳染源與傳播途徑 傳染源：患者或無癥狀帶毒者，感染后病毒在咽喉部持續(xù)存在1～3周，通過糞便排毒1～18周 糞-口途徑是主要的傳播方式 流行季節(jié)主要在夏、秋季，一般呈散發(fā)流行或地區(qū)性暴發(fā)流行。,（二）發(fā)病過程,Polio,,咽、腸道淋巴組織中初步增殖,糞口,,,機(jī)體免疫力較強(qiáng)，可表現(xiàn)為輕癥或隱性感染,第一次病毒血癥,,至單核吞噬細(xì)胞系

9、統(tǒng)增殖，大量病毒再次入血,,第二次病毒血癥,,神經(jīng)系統(tǒng)感染,,病毒數(shù)量和毒力與機(jī)體免疫力的強(qiáng)弱顯著影響其結(jié)局,（三）臨床表現(xiàn) 絕大多數(shù)人（90～95%）呈隱型感染 ① 輕型：病癥似流感 ② 非麻痹型（無菌性腦膜炎型） ③ 麻痹型：暫時性肌肉麻痹、永久性肢體麻痹、延髓麻痹 上述臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度取決于多種因素，如毒株的毒力、感染病毒的相對數(shù)量、機(jī)體免疫功能狀態(tài)等。,（四）免疫性 1、感染后對同型病毒產(chǎn)

10、生持久牢固免疫力，對異型病毒有交叉免疫作用。 2、保護(hù)性免疫以體液免疫為主。SIgA，血液中的IgM、IgA、IgG抗體 3、六個月內(nèi)嬰兒有母體抗體的保護(hù)而較少感染。,三、微生物學(xué)檢查,（一）病毒分離與鑒定 可以從患者鼻咽部、血、腦脊液及糞便中分離病毒（二）血清學(xué)試驗 用發(fā)病早期和恢復(fù)期雙份血清進(jìn)行中各試驗，若血清抗體有4倍或以上增長，則有診斷意義。（三）快速診斷 核酸雜交、PCR、ELISA、

11、IFA等。,四、防治原則,（一）主動免疫 Sabin疫苗是減毒活疫苗，口服 接種對象：2個月～7歲兒童 用法：2月齡開始連服三次OPV，每次間隔一個月，4歲時加強(qiáng)一次的免疫程序可保持持久免疫力。 Salk疫苗為滅活疫苗，肌肉注射 目前世界上大多數(shù)國家（包括我國）采用三價活疫苗免疫法,（二）被動免疫 人免疫球蛋白，免疫效果保持3～5周。,,1、脊髓灰質(zhì)炎病毒致病特點和免疫學(xué)特點？ 2

12、、脊髓灰質(zhì)炎Salk疫苗及Sabin疫苗的來源及優(yōu)缺點？,柯薩奇病毒 ?？刹《?新型腸道病毒,一、病毒型別與抗原性,（一）柯薩奇病毒(Coxsakievirus)柯薩奇病毒可以分為A、B兩組。A組有23型病毒，B組有6型病毒。（二）埃可病毒(ECHO virus)?？刹《咀钤缭诩顾杌屹|(zhì)炎流行期間從人的糞便中分離，目前共有31個血清型。 (三)新型腸道病毒新分離的腸道病毒不再歸屬于柯薩奇病毒或埃可病毒，從68號開始編

13、號命名，目前已編號到72型，第72型是甲型肝炎病毒。,二、臨 床 表 現(xiàn),柯薩奇病毒、?？刹《尽⑿滦湍c道病毒的流行病學(xué)特點和致病機(jī)理與脊髓灰質(zhì)炎病毒相似，但各自攻擊的靶器官不同?？滤_奇病毒、埃可病毒和新型腸道病毒感染組織更為廣泛，致病特點是病毒在腸道增殖卻很少引起腸道疾病。人體受感染后，約60%呈隱性感染。出現(xiàn)臨床癥狀時，由于侵犯的器官組織不同而表現(xiàn)各異。,（一）無菌性腦膜炎（二）麻痹（三）皰疹性咽峽炎（四）心肌炎和心包炎（五）

14、肌痛或肌無力（六）急性出血性結(jié)膜炎,腸道病毒血清型別繁多，不同型別病毒可以引起相同的病癥，而同樣型別的病毒在不同條件下也可引起不同的臨床病癥，因此確定任何一個型別作為某種病癥的病原是困難的。,三、防治原則,無特效的預(yù)防和治療方法,對有感染性的病人應(yīng)當(dāng)隔離。,第二節(jié) 輪 狀 病 毒 (Rotavirus),人類輪狀病毒歸類于呼腸孤病毒科 (Reoviridae) 輪狀病毒屬，是嬰幼兒腹瀉的主要病原體。,一、生物學(xué)性狀

15、,（一）形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒體呈圓球形，有雙層衣殼，每層衣殼呈二十面體對稱。內(nèi)衣殼的殼微粒沿著病毒體邊緣呈放射狀排列，形同車輪輻條呈車輪狀（如圖） 。具雙層衣殼的病毒體有傳染性。病毒體的核心為雙股RNA，由11個基因片段組成。,結(jié)構(gòu)蛋白（VP1、 VP2、 VP3、 VP4、 VP6、 VP7）： VP1- VP3位于核心， VP6 位于內(nèi)衣殼，VP4 與VP7位于外衣殼； VP7 是中和抗原、決定其血清型；VP4為病毒血凝素(吸附)，亦是中

16、和抗原。 非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP1～NSP5） 為病毒酶或調(diào)節(jié)蛋白，復(fù)制中起作用。,（二）分型 輪狀病毒據(jù)VP6的抗原性分為7個組（A～G）。A-C組能引起動物與人類腹瀉，D-G組只引起動物腹瀉。A組最為常見。 A組據(jù)VP4與VP7可分19個P 血清型 和14個G血清型,（三）病毒培養(yǎng)需選用特殊的細(xì)胞株培養(yǎng)（如恒河猴胚腎細(xì)胞MA104株和非洲綠猴腎傳代細(xì)胞CV-1株）（四）抵抗力

17、 對理化因子的作用有較強(qiáng)的抵抗力，在糞便中可存活數(shù)天/數(shù)周。 病毒經(jīng)乙醚、氯仿、酸、堿、反復(fù)凍融、超聲、37℃1小時或室溫（25℃）24小時等處理，仍具有感染性。95%的乙醇是最有效的病毒滅活劑，56℃加熱30分鐘也可滅活病毒,二、致病性與免疫性,（一）流行環(huán)節(jié) 傳染源是病人和無癥狀帶毒者 主要通過糞-口途徑傳播，呼吸道傳播 主要在冬季流行,（二）發(fā)病機(jī)制 1、病毒侵犯小腸細(xì)胞的絨毛，病毒在胞漿內(nèi)增殖，造

18、成腸微絨毛萎縮、變短、脫落，導(dǎo)致機(jī)體吸收功能障礙 2、腺窩細(xì)胞增生，分泌增多 3、對雙糖酶的破壞，致乳糖及其他雙糖吸收不良，引起滲透性腹瀉 4、NSP4具毒素樣作用，影響鈣離子通道而影響水的吸收,,（三）臨床表現(xiàn),1、A組輪狀病毒：是引起6個月~2歲嬰幼兒嚴(yán)重胃腸炎的主要病原體，潛伏期2～4天。病人最主要的癥狀是腹瀉，一般為自限性，也可危及生命。 2、B組輪狀

19、病毒：引起年長兒童和成人腹瀉，可暴發(fā)性流行 3、C組輪狀病毒：致病性類似A組（四）免疫性 分泌型IgA 、IgM、IgG抗體，對同型病毒感染有作用，對異型只有部分保護(hù)作用,三、微 生 物 學(xué) 診 斷,（一）檢測病毒或病毒抗原 腹瀉糞便液直接作電鏡或免疫電鏡檢查 ELISA雙抗體夾心法（檢測病毒抗 體）（二）分子生物學(xué)技術(shù) 聚丙烯酰胺凝膠電泳法和核酸雜交技術(shù),重視飲用水衛(wèi)

20、生，并注意防止醫(yī)源性傳播。目前尚無特異有效治療藥物，主要是補(bǔ)液，維持機(jī)體電解質(zhì)平衡。特異性減毒活疫苗正在研制之中,四、 防 治 原 則,,,第三節(jié) 其它(腸道腺病毒) （enteric adenovirus, EAD),腸道腺病毒（enteric adenovirus, EAD) 40、41、42三型是引起病毒性腹瀉的病原體。主要經(jīng)糞-口傳播，以夏秋季多見，主要侵犯5歲以下小兒，引起腹瀉，少有發(fā)熱或呼吸道癥狀

21、。,第三節(jié) 其它(杯 狀 病 毒)（calicivirus),,杯狀病毒（calicivirus)包括小圓形結(jié)構(gòu)化病毒（SRSV）和典型杯狀病毒。杯狀病毒的形態(tài)特點是球形，無包膜，其表面有杯狀凹陷，棱高低不平?；蚪M為單股正鏈RNA，只有一種衣殼蛋白。,SRSV是引起非細(xì)菌性胃腸炎暴發(fā)流行最重要的病原體，流行季節(jié)為冬季，任何年齡經(jīng)糞-口傳播（呼吸道）。其感染引起小腸絨毛輕度萎縮和粘膜上皮細(xì)胞破壞，致惡心、腹瀉等消化道癥狀，呈自限