國家自然科學基金申報攻略

1、國家自然科學基金申報攻略,復旦大學分子醫(yī)學教育部重點實驗室復旦大學出生缺陷研究中心復旦大學兒童發(fā)育與疾病轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究中心馬端2011.2,本人主持和合作的國家自然科學基金,2003. 新型組織因子/VIIa抑制物抗凝和抗炎作用研究（TFPI-1）2007. TFPI-1參與MsC細胞凋亡及其腎炎治療作用的實驗研究2007. TFPI-2影響斑馬魚中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的機制研究2009. 圓錐動脈干異常所致先天性心臟病的致病基

2、因分析與確證（重點）2009. TFPI-2在穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊中的作用及其機制研究2009. TFPI-2基因在子癇前期發(fā)病機制中的作用2010. TFPI-2降低鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤血管生成的信號通路研究 2010. 應用條件基因敲除小鼠研究TFPI-1對血管內(nèi)皮細胞功能的影響,研究方向 出生缺陷的病因、發(fā)病機制、早期診斷與干預 疾病的遺傳學與表觀遺傳學 生物技術(shù)新藥研制,講座內(nèi)容,2010年基金申請及批準情況2011

3、年申請政策的重要變動申請的基本要求申請的體會及建議,2010年總體情況,申請量繼續(xù)增長 醫(yī)學部首次受理項目申請，占全委26% 接收后“不予受理”項目：3.6% 各類項目資助強度和資助率均有增長,2011年重大變動,面上項目：平均資助強度60萬元/項，資助期限由3年延長為4年。重點項目：平均資助強度300萬元/項，資助期限由4年延長為5年。青年科學基金項目：平均資助強度將達到約25萬元/項，資助期限仍為3年。女性申請人的年齡

4、限制推遲至未滿40周歲；男性申請人的年齡限制維持未滿35周歲不變?？茖W儀器基礎(chǔ)研究研究?？铐椖浚嘿Y助強度原則上不超過300萬元/項，資助期限由3年延長為4年。重大國際（地區(qū)）合作研究項目：預計平均資助強度將達到約300萬元/項左右，資助期限由3年延長為5年。,特殊說明,為防范學術(shù)不端行為，避免重復資助，自然科學基金委自2011年起將通過計算機軟件對申請書內(nèi)容進行比對，特提醒申請人注意：不得將內(nèi)容相同或相近的項目，向同一科學部或不同

5、科學部申請不同類型項目的資助；受聘于一個以上依托單位的申請人，不得將內(nèi)容相同或相近的項目，通過不同依托單位提出申請；不得將內(nèi)容相同或相近的項目，以不同申請人的名義提出申請。,申請人條件,,具有承擔基礎(chǔ)研究課題或其他從事基礎(chǔ)研究的經(jīng)歷具有高級專業(yè)技術(shù)職稱具有博士學位，有2名與其研究領(lǐng)域相同、具有高級專業(yè)技術(shù)職稱的科學技術(shù)人員推薦。正在攻讀研究生學位的人員不得作為申請人申請各類項目。在職攻讀博士研究生學位的人員：可申請面上項目、

6、青年科學基金項目、地區(qū)科學基金項目及部分聯(lián)合基金項目。條件：通過受聘單位申請，導師同意函，說明申請項目與其學位論文的關(guān)系，承擔項目后的工作時間和條件保證等。在職攻讀碩士研究生學位人員：不得申請青年科學基金項目。博士后人員：面上項目、青年科學基金項目、地區(qū)科學基金項目，不得申請其他類型項目。,限項申請規(guī)定,,限項申請：申請人（不含參與者）同年只能申請1項同類型項目。 申請和承擔項目總數(shù)限為3項：面上項目、重點項目、重大項目、重大研究

7、計劃項目、聯(lián)合基金項目、青年科學基金項目、地區(qū)科學基金項目、國家杰出青年科學基金項目（申請時不限項）、國際（地區(qū)）合作研究項目、科學儀器基礎(chǔ)研究?？铐椖?、優(yōu)秀國家重點實驗室研究專項項目，以及資助期限超過1年的委主任基金項目、科學部主任基金項目等。作為負責人限獲得1次資助的項目：青年科學基金項目、國家杰出青年基金。非高級專業(yè)技術(shù)職稱人員的限項規(guī)定：作為申請人申請和作為負責人正在承擔的項目數(shù)合計限為1項；在保證有足夠時間和精力參與項目研

8、究工作的前提下，作為主要參與者申請或者承擔各類型項目數(shù)量不限。處于評審階段（自然科學基金委做出資助與否決定之前）的申請，計入本限項申請規(guī)定范圍之內(nèi)。申請人即使受聘于多個依托單位，通過不同依托單位申請和承擔項目，其申請和承擔項目數(shù)量仍然適用于本限項申請規(guī)定。,面上項目申報要求,充分了解國內(nèi)外相關(guān)研究領(lǐng)域發(fā)展現(xiàn)狀與動態(tài)能領(lǐng)導一個研究組開展創(chuàng)新研究工作依托單位應當具備必要的實驗研究條件申請的項目有重要的科學意義和研究價值，理論依據(jù)充

9、分，學術(shù)思想新穎，研究目標明確，研究內(nèi)容具體，研究方案可行。面上項目合作研究單位不得超過2個。,醫(yī)學科學二處,生殖系統(tǒng)和圍生醫(yī)學/新生兒(HO4)：主要資助人類生殖系統(tǒng)功能異常、各種相關(guān)的非腫瘤性疾病的研究和胎兒發(fā)育異常、新生兒疾病以及輔助生殖、產(chǎn)前診斷、避孕與節(jié)育相關(guān)研究等。2010年度受理項目申請789項，基本覆蓋了上述研究領(lǐng)域，主要集中在新生兒相關(guān)疾?。?3%）、妊娠及妊娠相關(guān)性疾?。?2%）；其次是胎兒發(fā)育與產(chǎn)前診斷（7%）及

10、子宮內(nèi)膜異位癥（7%）。研究的主要科學問題是疾病的發(fā)病機制以及治療的新靶點新技術(shù)，在胚胎表觀遺傳學研究、輔助生殖安全性研究方面已備受關(guān)注，申請項目占該領(lǐng)域申請總數(shù)的26%。申請數(shù)較少或無的領(lǐng)域有女性性功能障礙、乳腺發(fā)育異常與疾病、生殖器官移植、生殖系統(tǒng)遺傳性疾病、先天性發(fā)育缺陷、男性生殖系統(tǒng)炎癥。本科學處繼續(xù)鼓勵有良好前期積累、探討與提高人口質(zhì)量及影響婦女、胎兒、新生兒及生殖健康相關(guān)的創(chuàng)新性的基礎(chǔ)研究。,醫(yī)學科學五處,主要資助腫瘤學

11、（H16）基礎(chǔ)研究本科學處資助有關(guān)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸和各類腫瘤（白血病除外）的病因、發(fā)病機理、診斷、治療的基礎(chǔ)研究。資助范圍包括：腫瘤研究的各個層面。病因、腫瘤發(fā)生、腫瘤遺傳、腫瘤免疫、腫瘤預防、腫瘤復發(fā)與轉(zhuǎn)移、腫瘤干細胞、腫瘤診斷、腫瘤化學藥物治療、腫瘤物理治療、腫瘤生物治療、腫瘤綜合治療、腫瘤康復(包括社會心理康復)、腫瘤研究體系新技術(shù)，以及各系統(tǒng)器官腫瘤。 本科學處重點支持學術(shù)思想具有創(chuàng)新、已形成穩(wěn)定的研究方向、具備堅實

12、研究基礎(chǔ)。鼓勵申請人從前期研究和臨床實踐中發(fā)現(xiàn)并凝練科學問題，進行深入系統(tǒng)的機制探討，開展旨在提高臨床診療水平及向臨床實踐轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)研究；鼓勵對腫瘤學研究領(lǐng)域新技術(shù)新方法的探討；鼓勵申請人利用我國臨床資源的優(yōu)勢開展與臨床有機結(jié)合的基礎(chǔ)研究；鼓勵申請人開展基于已有臨床數(shù)據(jù)和臨床標本而開展圍繞具體科學目標進行的相關(guān)研究。,青年基金申報要求,青年科學基金項目申請、評審和管理機制與面上項目基本相同，重點評價申請人本人的創(chuàng)新潛力。申請人應當按照

13、青年科學基金項目申請書撰寫提綱撰寫申請書。青年科學基金項目的合作研究單位不得超過2個，資助期限為3年。 板塊：人才基金 強調(diào)：是否受過良好且嚴格的科研訓練 判斷：項目申請人是否具備良好的培養(yǎng)潛力 成員：不必(刻意)將資深專家作為研究成員 基礎(chǔ)：實事求是，不必過于在意工作積累 獨立：作為獨立PI(?)，充分和認真思考,存在的主要問題,一般性的跟蹤研究，缺乏創(chuàng)新無明顯科學意義和應用前景 立論依據(jù)不夠充分 研究結(jié)果的預期性

14、較差 對國內(nèi)外研究現(xiàn)狀了解和分析不充分，分析有偏差，未能抓住關(guān)鍵問題 重復研究，不完全了解前人的工作 未認真閱讀《項目指南》 研究內(nèi)容甚至項目名稱都和前一兩年資助項目雷同 工作無持續(xù)性,做好“功課”,項目申請指南 同行評議意見 歷年相關(guān)領(lǐng)域已資助項目情況 國內(nèi)外同行研究工作(歷史、最新進展等) 基金委資助領(lǐng)域、優(yōu)先資助內(nèi)容 與國家其他研究計劃的關(guān)系,標書撰寫原則,新穎性：不重復他人研究成果。重要性：學術(shù)界共識或有特

15、殊理由?？尚行裕貉芯炕A(chǔ)，實驗條件，人員，時間。問題導向：精練，概括；提出假說。目標集中：可信，連貫。深度合適：點狀深入，不要面上鋪開。邏輯清晰：注意區(qū)別平行關(guān)系和因果關(guān)系。,標書撰寫技巧,題目不可過大、過長、語法錯誤和邏輯錯誤。必要時使用英文縮寫高度概括，針對性強舉例應用條件基因敲除小鼠研究TFPI-1對血管內(nèi)皮細胞功能的影響,摘要,充分利用400字的空間簡單背景介紹，存在問題。研究基礎(chǔ)研究內(nèi)容目標或可能達

16、到的目的，意義。關(guān)鍵詞準確注意：充分展示，不可夸大！,舉例（400字）,內(nèi)容摘要：組織因子途徑抑制物-1（TFPI-1）屬絲氨酸蛋白酶抑制物家族成員，主要功能是抗凝血，也有一定的抗炎、抗平滑肌細胞增殖和誘導腎小球細胞凋亡等功能。TFPI-1基因敲除小鼠胚胎期即因卵黃囊或腦出血死亡，使得對它的生理功能研究缺乏了有效的工具。鑒于TFPI-1在動脈粥樣硬化、血栓性疾病、惡性腫瘤、嚴重感染和彌漫性血管內(nèi)凝血中變化明顯，因此有必要進一步明確T

17、FPI-1在血管內(nèi)皮細胞中的功能。目前我們已經(jīng)成功制備了TFPI-1 LoxP小鼠，并獲得了血管內(nèi)皮細胞Tek Cre小鼠。本課題擬完成：1.制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1基因條件敲除小鼠；2.應用病理學方法觀察該小鼠血管內(nèi)皮及血管的形態(tài)學變化；3.靜脈注射不同劑量的脂多糖和乳腺癌細胞，觀察小鼠炎癥發(fā)生和腫瘤轉(zhuǎn)移情況。通過上述研究，力圖闡明TFPI-1在血管內(nèi)皮細胞中的生理功能，明確它對炎癥和惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，為這兩類疾病的防治提供理論

18、依據(jù)。關(guān)鍵詞： TFPI-1；條件基因敲除；血管內(nèi)皮細胞；生理功能,項目組成成員,不可過多或過少，一般6-8人比較合適。研究隊伍組成要合理，包括職稱、年齡、知識結(jié)構(gòu)等其它單位合作者不要超項項目分工和工作時間合理,經(jīng)費申請,單項合理：實事求是。協(xié)作費指外單位協(xié)作承擔自然科學基金項目部分研究試驗工作的費用。合作費指由兩個或兩個以上單位合作，共同承擔自然科學基金項目研究工作的費用。勞務費只能用于直接參加項目研究的研究生、博士后

19、人員的勞務費用。,各支出科目最高比例表,立項依據(jù)與研究內(nèi)容（4000-8000字）項目的立項依據(jù),關(guān)鍵科學問題是什么？問題的來源？目前有誰在研究？他們解決了什么問題？是如何進行研究的？還有哪些問題沒解決？他們的研究對你要開展的研究有什么啟發(fā)？為什么要進行本項研究？為什么要由你來研究？前期工作基礎(chǔ)如何？是否有科學假說？如何完成研究？對研究方案的簡介及依據(jù)。對新穎性、重要性和可行性的分析。準確評價自己的工作、同行的工作。研究的重要

20、性和意義。對本科學、分支領(lǐng)域、研究方向的發(fā)展有何貢獻？對科技、經(jīng)濟、社會發(fā)展有何重要意義及應用前景？注意參考文獻的時效性,研究目標,目標明確：2-3個,成功制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除的小鼠； 通過明確血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除的小鼠的血管形態(tài)學和功能學 變化，確定TFPI-1的部分生理功能； 確定TFPI-1在血管內(nèi)皮細胞參與炎癥反應和惡性腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用和地位。,研究內(nèi)容,做什么？圍繞研究目標進行

21、小題大做要有層次：如基因轉(zhuǎn)錄水平、蛋白質(zhì)表達水平、細胞水平、動物模型、人體。內(nèi)容要細化,制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠：將TFPI-1 LoxP小鼠和血管內(nèi)皮細胞Tie2-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠交配，獲得血管內(nèi)皮細胞TFPI-1基因條件敲除雜合子和純合子小鼠，應用Southern Blot和PCR方法進行基因型鑒定。血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠不同發(fā)育階段血管內(nèi)皮細胞表型和血管形成變化分析：取E12小鼠胚胎、

22、出生后當天小鼠、3.5周齡幼鼠和7周齡性發(fā)育成熟小鼠，處死后分別取主動脈、心臟、肺臟和大腦，分別對各部位血管進行病理學和電子顯微鏡檢測。應用TUNEL法原位檢測血管內(nèi)皮細胞的凋亡情況。血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠對細菌內(nèi)毒素的反應：選擇6-7周齡發(fā)育成熟小鼠，靜脈注射小、中和大劑量細菌脂多糖LPS，取血處死小鼠，檢測血液中關(guān)鍵炎癥因子NF-кB、TNF-α和IL-1β水平，病理學檢測肺臟和大腦的炎癥情況。乳腺癌細胞在血管

23、內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠血液中轉(zhuǎn)移能力的評價：選擇6-7周齡發(fā)育成熟小鼠，靜脈注射三種不同數(shù)量的MDA-MB-231乳腺癌細胞，飼養(yǎng)4-6周后處死，取肺臟進行病理學檢測，觀察乳腺癌轉(zhuǎn)移情況。,擬解決的關(guān)鍵問題,關(guān)鍵科學問題與關(guān)鍵的技術(shù)問題與研究目標和研究內(nèi)容相對應，精練，準確。,TFPI-1主要由血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生，它的抗凝機制已經(jīng)明確，其表達水平在動脈粥樣硬化、心腦血管疾病、炎癥和惡性腫瘤中也發(fā)生顯著變化。由于TFPI-1

24、基因敲除小鼠全部在胚胎死亡，因此難以理解它在血管內(nèi)皮細胞功能維持，以及在上述疾病發(fā)生發(fā)展過程中的確切作用。本課題通過制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠，系統(tǒng)觀察血管內(nèi)皮細胞在缺乏TFPI-1時的形態(tài)學和功能學變化，并明確TFPI-1炎癥反應和惡性腫瘤血道轉(zhuǎn)移中的作用，以回答TFPI-1具有除抗凝作用以外，是否還有確切的其它生理功能這個關(guān)鍵科學問題。,擬采取的研究方案,怎么做？圍繞研究內(nèi)容進行設(shè)計，從多角度說明問題切忌羅列研

25、究方法而不作任何說明和解釋要具體，針對每個具體問題提出切實可行方案盡可能使用縐典的、公認的研究方法。如果使用新方法，解釋其比縐典方法的好處、可信度等 殺雞不需宰牛刀… 簡述具體的實驗方法，使評審者相信申請人確實掌握了該方法。,技術(shù)路線,可行性分析,讓審閱人相信你能夠完成研究計劃學術(shù)思想研究方案研究基礎(chǔ)研究條件研究人員設(shè)計的合理性和可完成性要客觀，不要夸大,特色與創(chuàng)新,是指前人未曾有過的新學術(shù)思想、理論、模型、

26、研究方法、手段和應用性結(jié)果切忌重復前面論述過的話針對可能的結(jié)果進行歸納數(shù)量不宜過多要注意研究條件的特色不能代表項目的研究特色，更不能代表新穎的學術(shù)思想,應用Cre-Lox P方法制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1基因條件敲除小鼠； 應用血管內(nèi)皮細胞TFPI-1基因條件敲除小鼠判斷TFPI-1對血管內(nèi)皮細胞 功能的影響； 應用血管內(nèi)皮細胞TFPI-1基因條件敲除小鼠判斷TFPI-1對炎癥反應和腫 瘤血道轉(zhuǎn)移的影響。,

27、年度研究計劃,包括擬組織的重要學術(shù)交流活動、國際合作與交流計劃等至少以半年為一階段，最好以季度為節(jié)點。一定要有預期結(jié)果,預期研究結(jié)果,成功制備血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除的小鼠；血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠的血管內(nèi)皮細胞可能出現(xiàn)凋亡，細胞之間的縫隙連接增寬，細胞表面可能出現(xiàn)纖維蛋白沉著，血管中膜增厚，血管腔狹窄。這些變化在胚胎期、幼鼠和成熟小鼠可能程度不同。血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠血管壁的炎癥

28、反應增強，表現(xiàn)為炎性細胞增多，炎性因子表達增加，嚴重時可能出現(xiàn)肺泡表面透明膜形成、血液滲出，甚至發(fā)生彌漫性血管內(nèi)凝血。癌細胞靜脈注射至血管內(nèi)皮細胞TFPI-1條件基因敲除小鼠血液中后，與對照組相比，肺部、骨髓、腦部形成轉(zhuǎn)移瘤的時間提前，腫瘤生長速度加快。國內(nèi)外發(fā)表高水平論文3-4篇，其中本學科高水平國際刊物論文2-3篇。培養(yǎng)研究生4-5名。,與目標和研究內(nèi)容對應文章和專利的數(shù)量和質(zhì)量,工作基礎(chǔ),與本項目相關(guān)的研究工作積累和已取得

29、的研究工作成績是課題申報不可或缺的內(nèi)容詳細闡明基礎(chǔ)應充分，適度內(nèi)容包括已發(fā)表的文章、圖片等。,工作條件,包括已具備的實驗條件，尚缺少的實驗條件和擬解決的途徑，包括利用國家實驗室、國家重點實驗室和部門重點實驗室等研究基地的計劃與落實情況主要寫本單位條件合作單位條件不要過分強調(diào),申請者簡歷,申請人和項目組主要參與者的學歷和研究工作簡歷，近期已發(fā)表與本項目有關(guān)的主要論著目錄和獲得學術(shù)獎勵情況，在本項目中承擔的任務。論著目錄要求詳細

30、列出所有作者、論著題目、期刊名或出版社名、年、卷（期）、起止頁碼等；獎勵情況也須詳細列出全部受獎人員、獎勵名稱等級、授獎年等。申請者主持、參與與本項目有關(guān)研究工作及其結(jié)果反映了其研究基礎(chǔ)，相關(guān)研究結(jié)果、工作成績要詳盡地在申請書中反映；內(nèi)容真實,承擔科研項目情況,申請人和項目組主要參與者正在承擔的科研項目情況，包括自然科學基金的項目，要注明項目的名稱和編號、經(jīng)費來源、起止年月、與本項目的關(guān)系及負責的內(nèi)容等。,馬端。國家自然科學基金（2

31、003.1-2005.12，19萬）：新型組織因子/VIIa抑制物（TFI）抗凝和抗炎作用研究，編號30271229。馬端。國家863專題（2006.12-2008.12，100萬元）：長半衰期組織因子途徑抑制物的研制及治療感染性DIC的臨床前研究，2006AA02Z109。馬端。國家重大基礎(chǔ)科研計劃（2009-2013）：環(huán)境和遺傳因素導致男性不育與出生缺陷的分子機制。課題四－精子異常與常見出生缺陷。 2009CB941704,完

32、成自然科學基金項目情況,對申請人負責的前一個已結(jié)題科學基金項目（項目名稱及批準號）完成情況、后續(xù)研究進展及與本申請項目的關(guān)系加以詳細說明。另附該已結(jié)題項目研究工作總結(jié)摘要（限500字）和相關(guān)成果的詳細目錄）。,國家自然科學基金面上項目：新型組織因子/VIIa抑制物（TFI）抗凝和抗炎作用研究，編號30271229，已于2005年年底結(jié)題。與課題相關(guān)的論文已在SCI收錄國際刊物上發(fā)表2篇（IF分別為4.95和2.85）；發(fā)表于國內(nèi)核心刊物

33、3篇，其它國內(nèi)論文1篇（見申請者簡歷），授權(quán)中國發(fā)明專利2項，申請中國發(fā)明專利2項。課題簡介：組織因子途徑抑制物（TFPI）對彌散性血管內(nèi)凝血 (DIC) 有良好的療效,但它的半衰期短，進入血液后被迅速代謝。我們對TFPI的C末端進行同源模建，然后將它與受體LRP進行分子對接后，發(fā)現(xiàn)了兩者相互作用的4個關(guān)鍵氨基酸：K241、K254、K260和K261。應用丙氨酸對這四個氨基酸進行單點和四位點替代突變，獲得了TFPI-Mut1和TFP

34、I-Mut4的cDNA基因，并實現(xiàn)了大腸桿菌表達，純化后獲得的重組TFPI-Mut1和TFPI-Mut4純度均大于95%，比活性與野生型TFPI相近，分別為18390U/mg和18350U/mg，產(chǎn)率分別為32mg/L和34mg/L。與野生型TFPI相比，TFPI-Mut1和TFPI-Mut4在大鼠體內(nèi)的t1/2 α分別延長1.33倍和1.96倍，t1/2 β分別延長1.62倍和4.22倍，且抗凝活性不變。我們將TFPI-Mut4命名為

35、長效TFPI。藥效學研究顯示，LTFPI對兔DIC模型有明顯的療效，且優(yōu)于野生型TFPI。此外，我們對TFPI的同家族成員TFPI-2及其三個結(jié)構(gòu)域分別進行了表達和初步的結(jié)構(gòu)與功能研究，獲得了一批有價值的數(shù)據(jù)。,經(jīng)費申請說明,購置5萬元以上固定資產(chǎn)及設(shè)備等，須逐項說明與項目研究的直接相關(guān)性及必要性。一般不要購買5萬元以上的設(shè)備。,形式要求,從評審人的角度來組細你的申報書的撰寫 課題申請書是一篇文章 主題、層次、表述、銜接、呼應……