感染性疾病及其免疫檢測

1、,第二十一章 感染性疾病及其免疫檢測,,掌握：先天性感染、TORCH、性傳播性疾病概念；C-反應(yīng)蛋白、IL-6的常用檢測方法及意義；乙肝五項常用檢測方法；HIV初篩試驗和確證試驗結(jié)果解釋和報告流程。熟悉：降鈣素檢測方法及意義；了解：細(xì)菌檢測；真菌及寄生蟲監(jiān)測。,,第一節(jié) 概 述第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病第三節(jié) 真菌感染性疾病第四節(jié) 病毒感染性疾病第五節(jié) TORCH感染第六節(jié) 寄生蟲感染第七節(jié) 其他病原體感染,,第一節(jié)

2、 概 述,感染性疾?。╥nfection diseases）指病原體破壞機(jī)體正常功能后產(chǎn)生的各種感染癥狀，包括傳染病和非傳染性疾病。免疫學(xué)標(biāo)志物 特異性標(biāo)志物 非特異性標(biāo)志物,,,第一節(jié) 概 述,1.先天性感染：胎兒在母體內(nèi)受到的感染，又稱宮內(nèi)感染。2.TORCH：弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等引起宮內(nèi)感染時，可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、畸形、發(fā)育異常，或智力低下、試聽障礙等，俗稱TOR

3、CH綜合征，這些病原體成高致畸性病原體。,,掌握,第一節(jié) 概 述,3.性傳播性疾?。和ㄟ^親密接觸傳播的傳染病，包括淋病、梅毒、尖銳濕疣、艾滋病等。4.輸血前感染篩查：輸血前篩查項目有乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒螺旋體病毒、HIV病毒。,,掌握,第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病一、非特異性標(biāo)志物,（一）降鈣素原（PCT）檢測方法：ELISA、化學(xué)發(fā)光免疫試驗 免疫滲濾/層析試驗臨床意義：全身性細(xì)菌感染或膿毒癥、嚴(yán)重真菌和

4、寄生蟲感染。,,熟悉,（二）C-反應(yīng)蛋白（CRP),CRP是炎癥標(biāo)志物，也直接參與炎癥過程檢測方法：ELISA、速率散射免疫比濁。臨床意義：CRP<10mg/L心血管疾病風(fēng)險評估； CRP＞10mg/L細(xì)菌感染、嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、心肌梗死、惡性腫瘤、結(jié)締組織病。細(xì)菌感染急性期CRP；病毒感染時CRP變化不大,,掌握,（三）IL-6,檢測方法：ELISA、CLIA和流式細(xì)胞術(shù)臨床意義：用于感染性疾病的輔助診斷 在腫瘤、

5、自身免疫性疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、燒傷時，IL-6可顯著升高.,,掌握,免疫學(xué)檢查 抗鏈球菌溶血素“O” 抗透明質(zhì)酸酶（ADH） 抗DNA酶B抗體（DNA-B） A族/B族鏈球菌抗原 肺炎鏈球菌抗原,生物學(xué)性狀 化膿性疾病的常見細(xì)菌 A群鏈球菌有較強(qiáng)侵襲力 可產(chǎn)生多種酶和外毒素,（一）鏈球菌,二、鏈球菌感染,,了解,2.臨床意義,抗O凝集效價≥1:80， 抗H凝集效價≥1:160,副傷寒沙門菌 抗H凝集效

6、價≥1:80 雙份血清效價增長4倍,三、沙門菌感染,傷寒沙門菌,,,,1.檢測項目及方法血清凝集試驗——抗O和抗HELISA——脂多糖和抗Vi,了解,抗-TB：ELISA、免疫滲濾/層析試驗結(jié)核感染T細(xì)胞：ELIPOT優(yōu)點：靈敏度和特異性更高缺點：操作復(fù)雜，成本高,不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染,,四、結(jié)核分枝桿菌感染,1.檢驗項目及檢測方法,了解,五、幽門螺旋桿菌感染,檢測項目：抗-Hp、Hp抗原、H

7、p尿素酶檢測方法：抗體檢測：ELISA、免疫印跡試驗、免疫滲濾/層析試驗抗原檢測： ELISA、免疫滲濾/層析試驗,,了解,六、嗜肺軍團(tuán)菌感染,檢測項目：LP抗原（纖支鏡刷檢物、尿液） 抗LP抗體（血清標(biāo)本、纖支鏡刷檢物）臨床意義：IgM和IgA作為近期感染的指標(biāo)，抗原檢測具有診斷意義,,了解,第三節(jié) 真菌感染性疾病的免疫檢測,真菌（fungus）的種類繁多，但能引起人類疾病的真菌僅有100多種。真菌感染除可引

8、起表面感染外，部分真菌可以導(dǎo)致人類深部組織感染，甚至全身感染，嚴(yán)重者可致死亡。,,了解,,,檢驗項目：真菌D-葡聚糖（G試驗）半乳甘露聚糖（GM試驗）檢測方法： ELISA、CLIA臨床意義,,一、深部真菌感染,了解,檢驗項目：肺孢子菌抗原和抗肺孢子菌臨床意義：支氣管灌洗術(shù)和纖支鏡刷檢物直接鏡檢可發(fā)現(xiàn)肺孢子菌，結(jié)合抗原檢測可診斷肺孢子菌感染?？贵w檢測主要用于流行病學(xué)調(diào)查。,二、類真菌感染,,了解,,第四節(jié) 病毒感染性疾病,,

9、一、肝炎病毒感染,（一）甲型肝炎病毒(HAV)感染傳播途徑:污染食物和水傳播疾病特點：急性；孕婦HAV不傳胎兒。實驗室診斷：1.特異抗體檢測：ELISA；化學(xué)發(fā)光技術(shù) IgM早；IgG晚（甚至維持終生）2.抗原檢測3.病毒分離4.分子診斷技術(shù),了解,,（二）乙型肝炎病毒感染,傳播途徑:密切接觸；母嬰；血液；性檢測項目：HBsAg—HBsAb ;HBeAg– HBeAb; HBcAb ;

10、 兩對半---五項,掌握,,（二）乙型肝炎病毒感染,乙型肝炎病毒的診斷標(biāo)志物,乙型肝炎表面抗原HBsAg乙型肝炎表面抗體-抗-HBs乙型肝炎e抗原（HBeAg）乙型肝炎e抗體（抗-HBe ）乙型肝炎核心抗原HBcAg乙肝核心抗體-IgM乙肝核心抗體-IgG,,乙肝病毒前S1抗原抗乙肝病毒前S1抗體乙肝病毒前S2抗原抗乙肝病毒前S2抗體,1.常用檢測項目及檢測方法*HBsAg、抗-HBs、HBeAg、PreS1抗原

11、 ----雙抗夾心法ELISA、CLIA。*抗-HBe、抗-HBc--競爭法ELISA、CLIA。*抗-HBcIgM--捕獲法ELISA、CLIA。,,熟悉,2.臨床意義--HBsAg HBV感染后首先出現(xiàn)標(biāo)志物：HBsAg。（1）HBsAg是乙肝早期診斷和普查指標(biāo)。（2）HBsAg陰性不能完全排除乙型肝炎。（3）如僅表現(xiàn)為HBsAg陽性者，傳染性較弱（4）HBsAg轉(zhuǎn)陰且出現(xiàn)抗HBs是最終治療目標(biāo),熟

12、悉,2.臨床意義--抗HBs,是一種保護(hù)性抗體。是機(jī)體感染恢復(fù)期、既往感染、接種乙肝疫苗的標(biāo)志。接種疫苗后抗HBs濃度大于10mIU/ml才有保護(hù)作用。急性感染后期，HBsAg轉(zhuǎn)陰后出現(xiàn)抗HBs。,掌握,2.臨床意義--HBeAg,,是病毒復(fù)制的標(biāo)志（1）一般見于HBsAg陽性者。（2）治療過程中，定量檢測HBsAg、 HBeAg濃度降低，反映患者病情好轉(zhuǎn)，治療有效。,熟悉,2.臨床意義--HBeAb,,無保護(hù)作用 多出現(xiàn)于急

13、性肝炎恢復(fù)期、慢性乙肝、肝硬化或無癥狀的HBsAg攜帶者等病人中。治療近期目標(biāo):HBeAg消失HBeAb出現(xiàn)。,熟悉,2.臨床意義--HBcAb,,是乙肝病毒存在的直接標(biāo)志。 無保護(hù)作用。IgM--早期HBV感染的特異性血清學(xué)標(biāo)志 IgG--既往感染標(biāo)志。,熟悉,,檢驗項目:抗HCV和HCV核心抗原檢測方法：ELISA、CLIA、RIA、 免疫印跡試驗 2.臨床意義 抗HCV不是中和抗體，無保護(hù)

14、性 抗HCV是HCV感染的標(biāo)志性物質(zhì) HCVIgM陽性可作為HCV活動性復(fù)制的血清學(xué)標(biāo)志 HCV-IgM與慢性丙肝患者的急性發(fā)作有關(guān)。,（三）丙型肝炎病毒感染,,了解,,（四）丁型肝炎病毒感染,生物學(xué)性狀HDV是一種缺陷病毒丁肝的臨床表現(xiàn)一定程度上取決于同時伴隨的HBV感染狀態(tài)HDV是一種單股負(fù)鏈RNA病毒,檢驗項目,HDV Ag、抗-HDVELISA免疫滲濾/層析,,,了解,,（五）戊型肝炎病毒感染,戊型肝炎病毒是

15、一單股正鏈無包膜的RNA病毒,引起經(jīng)胃腸傳播的肝臟疾病,檢驗項目,抗-HEV-IgG 抗-HEV-IgM HEV Ag,,,檢測方法：ELISA,,了解,九、人類免疫缺陷病毒感染,人類免疫缺陷病毒（HIV）感染可引起獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）?？贵w檢測是HIV感染的金標(biāo)準(zhǔn)。RNA和抗原檢測可發(fā)現(xiàn)窗口期感染者。CD4+T和CD8+T檢測可用于感染者免疫狀況評價，輔助臨床進(jìn)行疾病分期。,,掌握,檢驗項目：抗-HIV、抗-H

16、IV抗體確認(rèn)試驗、HIV抗原抗體聯(lián)合檢測、抗-HIV IgG親和力、HIV p24抗原初篩實驗：ELISA、CLIA、膠體金免疫層析法、膠體金免疫滲濾試驗、明膠顆粒凝集實驗、膠乳凝集實驗確證實驗：免疫印跡、免疫熒光實驗,1.常用檢測項目及方法,,掌握,2.臨床意義(1)初篩實驗：HIV(-)不能排除窗口期感染，可檢測HIVRNV或p24抗原。**初篩結(jié)果處理流程：HIV(-)正常報告；HIV(+)用原有試劑和另外一種不同原理(或

17、廠家)的試劑,或另外兩種不同原理或廠家的試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗,兩種試劑均呈陰性反應(yīng)則報告(-);如均為陽性或一陰一陽需確證試驗.,掌握,2.臨床意義(2)確認(rèn)試驗處理流程：使用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)行檢測.陰性反應(yīng)報告HIV(-)；陽性反應(yīng)報告HIV(+);HIV(+) 建議4周后隨訪檢測，可檢測核酸或p24抗原；仍不能確定者，隨訪到8周。必要時檢測核酸或P24抗原.疑難樣品送國家實驗室進(jìn)一步分析.,掌握,,,流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形等,

18、,先天性感染弓形體、風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等。,！,,第五節(jié) TORCH感染,生物學(xué)特性弓形蟲（toxoplasma ，TOX）寄生于各種有核細(xì)胞內(nèi)，引起弓形蟲病。 孕婦初次感染TOX可通過胎盤傳染給胎兒 ，可出現(xiàn)死胎、流產(chǎn)、死產(chǎn)、腦積水等。,二、弓形蟲感染,,（1）檢驗項目及檢測方法 TOX抗原、抗-TOX和抗-TOX IgG親和力 ELISA、CLIA、免疫滲濾/層析試驗?。?）臨床意義血清TOX抗原陽

19、性反應(yīng)提示弓形蟲感染TOX感染后7-8天出現(xiàn)抗-TOX IgM；抗-TOX IgG用于既往感染診斷,二、弓形蟲感染,,,生物學(xué)特性 風(fēng)疹是由風(fēng)疹病毒（rubella virus，RUV）引起出疹性呼吸道感染病。 病后可獲得終身免疫力 孕早期感染可導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)、死胎或出生后耳聾、失明、智力障礙等先天性風(fēng)疹綜合征 屬RNA病毒 僅有一個血清型,三、風(fēng)疹病毒感染,,抗-RV IgM和抗-RV IgG,ELISA、CLIA,,檢驗項目

20、,免疫滲濾/層析試驗,檢測方法,,抗-RV IgM出現(xiàn)早，消失快，近期感染的指標(biāo)抗-RV IgG單獨(dú)陽性反應(yīng)提示既往感染，與抗-RV IgM同時陽性反應(yīng)，恢復(fù)期血清抗體效價增高4倍以上，提示近期感染新生兒出生時如有特異高效價IgM抗體，提示宮內(nèi)RV感染,2.臨床意義,,,生物學(xué)性狀 由人巨細(xì)胞病毒(HCMV)引起的一種全身性感染綜合征 巨細(xì)胞包涵體病屬皰疹病毒科 核心為雙股線形DNA,,四、巨細(xì)胞病毒感染,,免疫學(xué)診斷,檢驗項

21、目CMV IE+E+PP65抗原、抗-CMV和抗-CMV IgG親和力。檢測方法 抗原檢測：ELISA、免疫熒光試驗抗體檢測：ELISA、CLIA、免疫滲濾/層析試驗,,巨細(xì)胞病毒感染產(chǎn)后嬰兒,,,2.臨床意義外周血CMV抗原檢測——活動期感染早期診斷IgM抗體可持續(xù)4-8個月，新生兒IgM陽性反應(yīng)提示宮內(nèi)CMV感染。IgG抗體用于流行病學(xué)調(diào)查，雙份血清抗體效價增高4倍以上，提示近期感染,四、巨細(xì)胞病毒感染,,生物學(xué)性狀

22、 單純皰疹病毒（HSV）是一種DNA病毒 HSV-1型主要引起生殖器以外的部位 HSV-2型主要引起生殖器部位皮膚粘膜的感染先天感染有宮內(nèi)感染、產(chǎn)道感染、產(chǎn)后接觸感染,,五、單純皰疹病毒感染,,檢驗項目：HSV抗原、抗-HSV、抗-HSV-1、抗-HSV-2抗原檢測方法：免疫熒光法、ELISA法、免疫滲濾/層析試驗抗體檢測方法：ELISA法、CLIA、免疫滲濾/層析試驗,,2.臨床意義直接檢測組織或分泌物中的HS

23、V抗原可用于早期診斷感染后1-2周出現(xiàn)抗-HSV IgM陽性反應(yīng)；新生兒IgM陽性反應(yīng)提示宮內(nèi)HSV感染。急性期和恢復(fù)期雙份血清IgG效價增高4倍以上，提示HSV近期感染,五、單純皰疹病毒感染,,第六節(jié) 寄生蟲感染,,,檢驗項目：瘧原蟲抗原和抗瘧原蟲抗體抗原檢測：ELISA、RIA 抗體檢測：ELISA、熒光免疫試驗臨床意義：檢測瘧原蟲抗原，結(jié)合臨床癥狀可診斷瘧疾抗體主要用于瘧疾的流行病學(xué)調(diào)查和輔助診斷,一、瘧原蟲感染,

24、,血吸蟲病（大肚子病 ）,血吸蟲,二、血吸蟲感染,,檢驗項目：血吸蟲抗原、抗血吸蟲抗體 抗原檢測方法：ELISA   抗體檢測方法：ELISA、免疫印跡試驗 臨床意義：抗原檢測是血吸蟲感染診斷的重要依據(jù)；抗體檢測用于流行病學(xué)調(diào)查,二、血吸蟲感染,,三、絲蟲感染,絲蟲病由斑氏絲蟲和馬來絲蟲寄生于淋巴系統(tǒng)所引起的慢性寄生蟲病檢驗項目：血清中絲蟲抗原和抗絲蟲抗體抗原檢測：ELISA抗體檢測： ELISA、免疫印跡試驗臨

25、床意義：抗原用于感染的輔助診斷，抗體用于流行病學(xué)調(diào)查,,四、華支睪吸蟲感染,華支睪吸蟲病又稱肝吸蟲病，是由寄生在人的肝膽管內(nèi)所引起的以肝膽病變?yōu)橹鞯囊环N人畜共患寄生蟲病。感染的確診方法：糞便鏡檢華支睪吸蟲卵,,檢驗項目：肝吸蟲抗原和抗肝吸蟲抗體抗原檢測： ELISA、熒光免疫試驗抗體檢測： ELISA、熒光免疫試驗、免疫滲濾/層析試驗、間接血凝試驗臨床意義：抗原檢測用于肝吸蟲感染的輔助診斷，抗體檢測用于流行病學(xué)調(diào)查,四、華支睪

26、吸蟲感染,,豬囊尾蚴病，俗稱“囊蟲病” 豬帶絳蟲的幼蟲寄生人體各組織所致的疾病,豬囊尾蚴抗原抗豬囊尾蚴抗體ELISA間接血凝試驗,,生物學(xué)性狀,五、豬囊尾蚴感染,檢驗項目,檢測方法,,,,,舌肌內(nèi)的囊尾蚴,皮下的囊尾蚴,豬囊蟲病,,第七節(jié)其他病原體感染,,,一、梅毒螺旋體感染,梅毒螺旋體是性傳播疾病—梅毒的病原體。傳播途徑：性接觸直接傳播、接吻、手術(shù)、哺乳、輸血、接觸污染物等人體感染梅毒螺旋體后產(chǎn)生IgM、IgG 抗體,,

27、1.檢驗項目及檢測方法,性病研究實驗室試驗 非特異性檢驗 不加熱血清反應(yīng)素試驗 快速血漿反應(yīng)素試驗 甲苯胺紅不加熱血清試驗 特異性檢驗 熒光密螺旋體抗體吸附實驗

28、 ELISA、CLIA 免疫滲濾/層析試驗 明膠顆粒凝集試驗,,,,反應(yīng)素,,抗-TP,,2.臨床意義,非特異性抗體——有臨床癥狀的早期患者特異性抗體——不能區(qū)分現(xiàn)癥

29、感染與既往感染非特異性抗體 特異性抗體=現(xiàn)癥感染 + +,,,二、支原體感染,對人致病的主要有肺炎支原體（MP）、人型支原體（MH）、生殖器支原體（MG）、溶脲脲原體（UU）支原體感染后外周血可出現(xiàn)IgM、IgG檢驗項目：MP抗原、抗-MP、MG抗原、抗-MG等檢測方法：ELISA、熒光免疫試驗、免疫滲濾/層析試驗,,三、衣原體感染,沙眼衣原體（CT）、肺炎衣原體（CPN）、鸚鵡熱衣原體（

30、CPS）1.檢驗項目：CT抗原和抗－CT等　檢測方法：ELISA、熒光免疫試驗、免疫滲濾/層析試驗2.臨床意義：急性期和恢復(fù)期抗體效價增高4倍以上，提示衣原體的近期感染。,,四、立克次體感染,立克次體——變形桿菌（共同抗原）檢驗項目：外斐試驗、立克次體抗原、抗立克次體抗體檢測方法：ELISA、熒光免疫試驗臨床意義：立克次體抗原——早期診斷 抗體檢測——流行病學(xué)調(diào)查,,思考題,1.TORCH是什么意思?分

31、別代表什么?2.乙型肝炎病毒的主要免疫診斷指標(biāo)？3.,,1.感染后出現(xiàn)最早,消失快,可作為感染早期指標(biāo)的Ig( )A.IgG B. IgM C. IgA D. IgD E.IgE2.在急性時相反應(yīng)蛋白中反映細(xì)菌性感染發(fā)生最特異的指標(biāo)( )A.α抗胰蛋白酶 B. PCT C. CRP D. 血漿 銅藍(lán)蛋白 E.補(bǔ)體成分3.抗病毒免疫機(jī)制( )A.體液免疫

32、 B.細(xì)胞免疫 C. 干擾素作用D.中合作用 E.以上都是4.下列那種情況下ASO不升高( )A.使用激素或免疫力低下 B.急性咽炎 C. 心包炎D.風(fēng)濕性心臟病 E.急性腎小球腎炎,B,B,E,A,,5.可用于結(jié)核分枝桿菌檢測的免疫學(xué)實驗有( )A.結(jié)核菌素試驗 B. 分支桿菌抗體檢測 C.外周血干擾素檢測 D. 結(jié)核桿菌抗原 E.以上都是6.乙型肝炎感染后最早出現(xiàn)的病毒標(biāo)志

33、物( )A.HBsAg B.HBeAg C.HBcAg D.HBsAb E. HBeAb7.乙肝定量檢測中，能夠反映患者治療好轉(zhuǎn)的指標(biāo)( )A.HBsAg/HBeAg濃度降低 B. HBsAg/HBeAg濃度升高 C.HBsAg/和HBeAb同時陽性 D. HBcAb(IgM)明顯升高E.出現(xiàn)pre-S1抗原8.HIV感染的確證實驗( )A.ELISA法 B.金標(biāo)法 C. 反向凝集實

34、驗D.中和實驗 E.免疫印記實驗,E,A,A,E,,9.下列病毒感染中需要實驗確證的是( ) A.HBV感染 B.HAV感染 C.HCV感染 D.HDV感染 E.HEV感染 10.先天性感染中TORCH各項檢測的共同特點是( )A.均為寄生蟲檢測 B.均為病毒檢測 C.均為母嬰傳播途徑 D.均為抗體檢測 E.均為血液傳播途徑11.肥達(dá)反應(yīng)凝集效價陽性的判斷標(biāo)準(zhǔn)是（ ） A.≥1:20