被動(dòng)吸煙所致小鼠肺癌中Ang-3基因表達(dá)及其意義的初步探討.pdf

1、研究目的:通過小鼠全基因組表達(dá)芯片篩選被動(dòng)吸煙所致小鼠肺癌相關(guān)基因，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)篩選的高表達(dá)基因進(jìn)行驗(yàn)證與確證，再利用western blot檢測(cè)小鼠肺癌組織中Ang-3蛋白的表達(dá)量，初步尋找新的與肺癌相關(guān)的基因，為全面揭開肺癌發(fā)病機(jī)制、進(jìn)一步診斷和治療肺癌提供依據(jù)。
　　研究方法:
　　1.通過基因表達(dá)芯片篩選被動(dòng)吸煙致小鼠肺癌中異常表達(dá)的基因;
　　2.熒光實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證部分基因芯片結(jié)果;

2、　　3.應(yīng)用western blot分析方法檢測(cè)小鼠肺組織中Ang-3基因的蛋白表達(dá)量變化。
　　結(jié)果與結(jié)論:
　　1.通過小鼠全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)，得到上調(diào)基因621條（其中包括未知功能基因293條），主要包括癌基因、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及通路、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞粘附、免疫及炎性反應(yīng)、細(xì)胞分化等功能基因。
　　2.根據(jù)基因芯片的篩查結(jié)果，挑選在腫瘤組高表達(dá)的基因，并在NCBI上查尋相關(guān)資料，通過分析，從中挑選出5個(gè)目前未發(fā)現(xiàn)有

3、癌基因或抑癌基因功能的基因，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析它們?cè)谛∈蟛煌谓M織中mRNA的差異表達(dá)，結(jié)果顯示4個(gè)基因Ang-3、Arg-2、H2-Ea和H2-D1在肺癌組織中表達(dá)明顯高于正常肺組織(p＜0.05);Ifi203基因在肺癌組織和對(duì)照正常肺組織中的mRNA表達(dá)量無明顯變化(p＞0.05)。最后，重點(diǎn)選擇Ang-3基因進(jìn)一步做Western blot分析。
　　3.Western blot分析結(jié)果顯示基因Ang-3蛋白表達(dá)量