stat3對(duì)cps感染細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響-檢驗(yàn)專業(yè)畢業(yè)論文ppt

1、STAT3對(duì)Cps感染細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,,,本科畢業(yè)論文開題報(bào)告,,目錄,,,2,2,4,5,5,,4,,5,,可行性和創(chuàng)新性分析,,選題背景及研究意義,,,一、研究背景,1.衣原體（Chlamydiae）為革蘭氏陰性病原體，是一類能通過細(xì)菌濾器、在細(xì)胞內(nèi)寄生、具有獨(dú)特發(fā)育周期的原核細(xì)胞型微生物；2.衣原體的持續(xù)性感染是引起宿主慢性炎癥反應(yīng)和組織纖維化重要原因；3. 衣原體持續(xù)性感染的重要機(jī)制之一是抑制宿主細(xì)胞凋亡。,,選

2、題背景及研究意義,,,衣原體抗細(xì)胞凋亡與細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路關(guān)系的研究,1.肺炎嗜衣原體（Cpn）持續(xù)性感染的上皮細(xì)胞中凋亡抑制 蛋白（IAP）通過細(xì)胞核因子NF-KB途徑發(fā)揮抗凋亡作用； 2.沙眼衣原體（Ct）可通過激活STAT1 信號(hào)通路誘導(dǎo)STAT信號(hào)通路及其負(fù)調(diào)控因子細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制子（SOCS1） 蛋白表達(dá)并抑制宿主細(xì)胞產(chǎn)生NO，抑制細(xì)胞凋亡，造成持續(xù)性感染。,,選題背景及研究意義,

3、,,二、研究意義,,本研究基于衣原體感染能引起宿主持續(xù)性感染，而抗宿主細(xì)胞凋亡是持續(xù)性感染的重要機(jī)制之一，但衣原體具有多種抗凋亡機(jī)制，研究STAT3對(duì)鸚鵡熱嗜衣原體（Cps）感染細(xì)胞的相關(guān)凋亡機(jī)制研究，為進(jìn)一步揭示衣原體的致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。,,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,,一、研究內(nèi)容,,1.建立Cps感染細(xì)胞模型； 2.流式細(xì)胞術(shù)和Hoechst33258熒光染色檢測(cè)各組細(xì)胞 3.Western blot法檢測(cè)

4、相關(guān)蛋白表達(dá)情況。,凋亡情況；,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,STAT3信號(hào)通路,,,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,,活化的STAT3,,Bax/Bcl-2家族,Cleaved-caspase3,Cleaved-caspase9,STAT3磷酸化,,細(xì)胞受到刺激,,,Caspase9,,,Caspase3,Caspase7,Cleaved-caspase7,抑制PARP活化,,,某些化學(xué)片段C表達(dá)改變,,,抑制細(xì)胞凋亡,,選題背景及研究意義,,,二、方

5、案路線,Hela229細(xì)胞鋪板,CpsHela229細(xì)胞感染模型建立,加入AG490阻斷、ST進(jìn)行誘導(dǎo),Hela,ST,AG490,Cps,Cps+AG490,Cps+ST,Cps+ST+AG490,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,WB法檢測(cè)相關(guān)凋亡蛋白,實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,Hoechst33258熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞核形態(tài),,課題研究的重點(diǎn)和難點(diǎn),,,一、研究重點(diǎn),Western blot法檢測(cè)Cps感染細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平變化。,二、

6、研究難點(diǎn),1.Western blot檢測(cè)條件的優(yōu)化； 2.Cps細(xì)胞感染模型的構(gòu)建； 3.Hoechst33258熒光染色測(cè)凋亡中，染色時(shí)間及工作 溶液濃度的控制。,,研究進(jìn)度安排,,,進(jìn)度安排,1.已知有多條信號(hào)途徑參與衣原體抑制宿主細(xì)胞凋亡，并且已經(jīng)證實(shí)STAT3信號(hào)通路可抑制某些腫瘤細(xì)胞凋亡，但STAT3信號(hào)通路與衣原體的抗凋亡作用關(guān)系未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)在綜合分析文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上提出這一假設(shè)，具有較強(qiáng)的