植物保護專業(yè)畢業(yè)論文番茄白粉_第1頁
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1、本科畢業(yè)論文論文題目番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究學(xué)院草業(yè)學(xué)院專業(yè)植物保護畢業(yè)屆別姓名指導(dǎo)教師職稱大學(xué)教務(wù)處制年六月番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究摘要:植物在病害或者環(huán)境脅迫條件下會產(chǎn)生酶促性的保衛(wèi)性生化反應(yīng),酶活性測定表明:未接種番茄幼苗中各品種PAL活性無明顯變化,接種白粉菌后抗病品種和感病品種的PAL活性均有升高;未接種番茄幼苗2并于病害特征明顯后(高感品種發(fā)病率達到50%時)

2、,調(diào)查統(tǒng)計各品種發(fā)病率和病情指數(shù)。1.2.2酶液提取及活性測定1.2.2.1POD和PPO活性檢測方法實驗所需化學(xué)試劑:0.05moll磷酸緩沖液(PH為5.5);0.05mo11愈創(chuàng)木酚溶液2%的雙氧水溶液;0.lmol1的兒茶酚溶液;20%三氯乙酸溶液。實驗儀器用:精密數(shù)顯恒溫水浴鍋;精密酸度計;分光光度計。實驗步驟:(1)粗酶液的制備,煎取5g葉片,剪碎后放入早置于冰浴中預(yù)冷過的研缽中,加入適量的磷酸緩沖液后研磨成勻漿,將勻漿完全

3、轉(zhuǎn)入離心管中后在3000rmin轉(zhuǎn)速下離心l0min,上清液轉(zhuǎn)入25m1容量瓶中,定容后在低溫下保存?zhèn)溆谩?2)POD活性的測定,取3支試管,依次加入2.9m10.05mo11的磷酸緩沖液;1.0m12%的H2O2;1m10.05mo11的愈創(chuàng)木酚溶液,將其中一支試管在沸水中煮5min為對照。作兩組重復(fù)實驗,檢測體系在加入酶液后立即于37℃水浴中保溫1Smin,然后迅速轉(zhuǎn)入冰浴中,立即加入2.0m120%三氯乙酸溶液終止反應(yīng),然后將反應(yīng)

4、混合溶液在5000rmin轉(zhuǎn)速下離心10min,適當(dāng)稀釋后在分光光度計上470nm波長下檢測吸光值。(3)PPO活性檢測與POD基本相似,只是反應(yīng)體系為3.9m1磷酸緩沖液1ml兒茶酚和0.1ml酶液,水浴中的反應(yīng)時間為10min,在525nm波長下檢測吸光值。酶活力計算:以每分鐘在該波長下變化0.01為1個酶活力單位,計算公式如下:酶活力(U)=△AD0.01wt單位為:Ugfw1.2.2.2PAL活性測定取供試番茄葉片1g加PVP0

5、.1g5mM巰基乙醇硼酸緩沖液4mL和少量石英砂于研缽中研磨成勻漿4℃下8000rmin離心15min取上清液0.1mL加底物0.02M苯丙氨酸硼酸緩沖液(pH8.8)3mL蒸餾水2.9mL30℃保溫30min對照以蒸餾水代底物290nm比色以每min在290nm處吸收變化0.01所需酶量為一單位(相當(dāng)于每毫升反應(yīng)液中形成1μg肉桂酸)。2結(jié)果與分析2.1供試品種間PAL(苯丙氨酸解氨酶)活性與白粉病抗性的關(guān)系2.1.1PAL活性的在品

6、種間的動態(tài)變化PAL活性測定結(jié)果表明(圖1)未接種番茄幼苗中各品種PAL活性無明顯變化,接種白粉菌后抗病品種和感病品種的PAL活性均有升高并且均出現(xiàn)兩個峰值,第一個峰值出現(xiàn)在0.5d~1d,此峰幅度均小,最高為134.70Ug?hFW(高抗品種TOMO629D,0.5d),比其對照平均值升高24.3%;第二峰均在第7d,此峰幅度較大,高抗品種TOMO629D酶活性最高(186.40Ug?hFW),比其對照均值升高72.1%。接種第10d

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