疫苗生產(chǎn)流程_第1頁(yè)
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1、人用狂犬病疫苗(地鼠腎細(xì)胞)生產(chǎn)流程,,生產(chǎn)流程,細(xì)胞制備 病毒接種 病毒收獲 病毒滅活 合并、濃縮、純化 檢定 分裝.及凍干,1. 細(xì)胞制備,選用12-14日齡地鼠,無(wú)菌取腎,剪碎,經(jīng)胰蛋白酶消化、分散細(xì)胞,接種培養(yǎng)瓶,用適宜的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)液為含適量滅活小牛血清和乳蛋白水解物的MEM,199或其他適宜培養(yǎng)液,2. 病毒接種,接種狂犬病病毒,置適宜溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后,棄去培養(yǎng)液,用PBS沖洗去除小牛血清,加入適

2、量維持液,置33一35℃繼續(xù)培養(yǎng)。,3. 病毒收獲,經(jīng)培養(yǎng)適宜時(shí)間,收獲病毒液,根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,可多次收獲病毒液。,5. 病毒滅活,病毒收獲液按1:4000的比例加入甲醛,置適宜溫度下一定時(shí)間內(nèi)滅活病毒。,6.合并、濃縮、純化,同批細(xì)胞生產(chǎn)的多次病毒收獲液可在嚴(yán)格無(wú)菌操作的條件下合并為一批,經(jīng)超濾或其他適宜方法適當(dāng)濃縮。經(jīng)濃縮并檢定合格的病毒液以柱色譜或其他適宜的方法純化,純化后加入適量人血自蛋白作為穩(wěn)定劑及一定量硫柳汞作為防腐劑,

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