如何選配最適用的葉綠素熒光成像儀器

1、如何選配最適用的葉綠素熒光成像儀器,李川易科泰生態(tài)技術(shù)公司EcoLab生態(tài)實驗室,葉綠素熒光儀發(fā)展現(xiàn)狀,連續(xù)激發(fā)式熒光儀 Direct Fluorometer，PEA脈沖調(diào)制式熒光儀 Pulse Amplitude Modulated Fluorometer，PAM雙調(diào)制式熒光儀 Double-Modulation Fluorometer，F(xiàn)L3500,,,葉綠素熒光儀的局限性,僅能通過光纖測量一個點的

2、總值,只能獲得數(shù)據(jù)和動力學曲線圖,一般只能測量葉片,在進行光合相關(guān)突變體篩選時工作量極大,葉綠素熒光成像技術(shù)的發(fā)展,,Ladislav Nedbal（2000）等于上世紀90年代末期發(fā)明了與PAM技術(shù)相結(jié)合的葉綠素熒光成像技術(shù)，研制成功了第一臺FluorCam調(diào)制式熒光成像儀。從此正式開啟了葉綠素熒光研究的二維時代。,Baker，2008，引用次數(shù)1200,,如何根據(jù)實驗設計選擇合適的葉綠素熒光成像儀器型號和配置？如何分辨葉綠素熒光

3、成像儀器的優(yōu)劣？,實驗設計中需要明確的問題,測量什么樣品室內(nèi)實驗還是野外實驗測量哪些參數(shù)軟件分析功能經(jīng)費,測量什么樣品,成像面積,光源板面積為了進行可靠的葉綠素熒光成像測量，關(guān)鍵在于整個成像區(qū)域中保證均勻同質(zhì)的光照。（Kalaji，2014）,儀器的成像面積是怎么確定的？,CCD傳感器與鏡頭分辨率對焦,分辨率與靈敏度的競爭關(guān)系,分辨率越高越好嗎,,,Fan，2015,Mao，2015,光源的選擇,光質(zhì)：一般為紅光、藍光或白

4、光，特殊情況下可能需要綠光、青光、棕色光等光源光強：2000 μmol?m–2?s–1的飽和脈沖可能足夠進行Fm的測量，但是對于在較高的光照下測量Fm’則可能太低了（Murchie，2013）。Earl 和Ennahli（2004）在研究玉米時甚至發(fā)現(xiàn) 7500 μmol?m–2?s–1以上的飽和脈沖才能測得最大的Fm’。,,室內(nèi)實驗還是野外實驗,,,測量哪些參數(shù),葉綠素熒光參數(shù)Fv/Fm：測量參數(shù)包括F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v，F(xiàn)v/ Fm

5、等Kautsky誘導效應：F0，F(xiàn)p，F(xiàn)v，F(xiàn)t_Lss，QY，Rfd等熒光參數(shù)熒光淬滅分析：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)p，F(xiàn)s，F(xiàn)v，F(xiàn)v/ Fm，QY，ΦII，NPQ，qP，Rfd，qN，qL等光響應曲線：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v/ Fm，QY_Ln，ETR等熒光參數(shù),熒光成像可以測量OJIP嗎,OJIP測量對檢測器的要求：100 000次/秒目前商用儀器中僅有兩種可以進行OJIP熒光成像,Jedmowski，2015,熒光成像如何測量F0’,

6、使用公式計算 Oxborough and Baker，1997使用遠紅光源板直接測量,其他成像功能,PAR吸收率成像GFP、YFP等熒光蛋白成像MCF多光譜熒光成像顯微多光譜成像與光譜分析,PAR吸收率成像植物光合有效輻射吸收率（PAR absorptivity）：通過紅色光源與紅外光源照射植物樣品，測量植物樣品對每種光源的反射率，根據(jù)公式計算得出

7、光合有效輻射吸收率。其計算公式為：,Ulstrup，2007,GFP、YFP等熒光蛋白成像,MCF多光譜熒光成像,Chaerle，2006,作物病害早期無損檢測與葉綠素熒光成像技術(shù)結(jié)合共同研究,Pérez-Bueno，2015,FKM多光譜熒光動態(tài)顯微成像技術(shù),FluorCam熒光成像技術(shù)生物熒光顯微成像技術(shù)多光譜熒光測量技術(shù)光譜分析技術(shù),,,Berman-Frank，2001,Ferimazova ，2013,,鎘

8、、銅、鋅、鉻等重金屬脅迫可以嚴重影響植物的光合能力，F(xiàn)luorCam葉綠素熒光成像技術(shù)能夠研究重金屬對植物葉片或其他器官宏觀上的傷害，而FKM技術(shù)可以直觀地研究單個植物細胞里重金屬積累對葉綠體的影響及不同細胞之間的差異。（Küpper，2007）,忍冬葉片橫切——柵欄組織和海綿組織,,擬南芥表面成像——細胞內(nèi)的葉綠體分布,,表皮細胞成像——氣孔與葉綠體,,玉米表皮細胞熒光成像,,葉綠素熒光的光譜分析,,軟件基礎(chǔ)功能,光源