酵母菌的計數(shù)

1、完成實驗,酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？,提出問題,,作出假設,,設計實驗,分析結(jié)果，得出結(jié)論,,,變量如何控制？,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化,該探究活動中涉及4個科學方法：（1）數(shù)學模型法；（2）抽樣檢測法；（3）顯微觀察法；（4）微生物培養(yǎng)法。,酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具——血球計數(shù)板,,實物圖,,正面圖,,側(cè)面圖,,計數(shù)室,,,滴液處,酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具——血球計數(shù)板,,,放大后的計數(shù)池,每塊計

2、數(shù)板由H形凹槽分為2個同樣的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大方格，其中中央的即為計數(shù)室，每個計數(shù)室的體積為0.1mm3 。,,,,,16個小格,25個小格,,25X16 = 400小格,,16X25 = 400小格,每個計數(shù)室（大方格）共有400小格，總?cè)莘e為0.1mm3,,,,,,抽樣檢測：5×16=80個小格,抽樣檢測：4×25=100個小格,酵母菌的計數(shù)（2）計算： 每毫升培養(yǎng)液中的酵母

3、菌細胞數(shù)是多少？,例1:酵母菌的計數(shù)通常用血球計數(shù)板進行，血球計數(shù)板每個大方格容積為0.1mm3 ，由400個小方格組成?，F(xiàn)對某一樣液進行檢測，如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應先        后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有      

4、    個。,例2 :在用血球計數(shù)板（2mm×2mm方格）對某一稀釋50倍樣品進行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌       個。,2x107,2×108,稀釋,例3  檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升

5、藍藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻   個／mL。,5n×105,酵母菌的計數(shù)（3）計數(shù)的操作稀釋：將酵母菌

6、培養(yǎng)液進行適當?shù)南♂專蝗艟翰粷?，可不必稀釋。鏡檢計數(shù)室：在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢, 若有污物，則需清洗后才能進行計數(shù)。加樣品：在清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌細口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴（將計數(shù)室充滿即可），讓菌液沿縫隙自行滲入計數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。,酵母菌的計數(shù)（3）計數(shù)的操作顯微計數(shù)：靜止5分鐘后，先用低倍鏡（16×10）找 到計數(shù)室

7、所在的位置。然后根據(jù)血球計數(shù) 板規(guī)格，每個計數(shù)室選取5個（或4個）中 方格中的菌體進行計數(shù)。每個小方格內(nèi)約 有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線 上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。如 要從兩個計數(shù)室中計得的值來計算樣品的 含菌量。,酵母菌的計數(shù)（4）血球計數(shù)板的清洗：

8、使用完畢后，將血球計數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢，觀察每個小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復洗滌至干凈為止。,酵母菌的計數(shù)（5）注意事項：進行計數(shù)前，應先將試管搖勻，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻，以減少計數(shù)誤差。顯微鏡計數(shù)時，對于壓在小方格界線上的酵母菌，應取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。若一個小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多，難以數(shù)清時，則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。

9、本實驗無對照實驗，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。血球計數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù)（6）討論：計數(shù)前還應有哪些步驟？需注意些什么？,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化,酵母菌培養(yǎng)：培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng),配制質(zhì)量分數(shù)為5％的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分裝到5個燒杯中（200mL/燒杯）,用高壓蒸汽滅菌鍋將培養(yǎng)液和

10、取樣、計數(shù)時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。,接種時要在酒精燈附近，用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每個燒杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌數(shù)過多。）,將燒杯置于28℃的恒溫箱中培養(yǎng),無菌操作,結(jié)果分析（1）數(shù)據(jù)記錄 以湯麥式血球計數(shù)板的數(shù)據(jù)記錄為例。下表為某一次的數(shù)據(jù)記錄表，其中，A表示五個中方格的總菌數(shù)；B表示菌液稀釋倍數(shù)：,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化,結(jié)果分析（1）數(shù)據(jù)記