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文檔簡介
1、兔子白細胞介素1β(IL1β)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2ngL80ngL使用目的:本試劑盒用于測定兔子血清、唾液及相關液體樣本中白細胞介素1β(IL1β)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔子白細胞介素1β(IL1β)水平。用純化的兔子白細胞介素1β(IL1β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素1β(IL1β),再與HRP標記的白細胞介素1β(IL1
2、β)抗體結合,形成抗體抗原酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素1β(IL1β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔子白細胞介素1β(IL1β)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶6ml1瓶12孔8條6ml1瓶6ml1瓶6ml1瓶789終止液6ml1瓶0.5ml1瓶1.5ml
3、1瓶1份2酶標試劑標準品(160ngL)標準品稀釋液3酶標包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說明書11封板膜12密封袋2張1個標本要求1標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于20℃保存,但應避免反復凍融2不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
4、80ngL40ngL20ngL10ngL5ngL5號標準品4號標準品3號標準品2號標準品1號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代
5、入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡1530分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量
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