小鼠鞘氨醇激酶spk酶聯(lián)免疫分析

1、小鼠鞘氨醇激酶(SPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T3ngL80ngL使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鞘氨醇激酶(SPK)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠鞘氨醇激酶(SPK)水平。用純化的小鼠鞘氨醇激酶(SPK)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入鞘氨醇激酶(SPK)，再與HRP標記的鞘氨醇激酶(SPK)抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標抗體復(fù)

2、合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鞘氨醇激酶(SPK)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠鞘氨醇激酶(SPK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶6ml1瓶12孔8條6ml1瓶6ml1瓶6ml1瓶789終止液6ml1瓶0.5ml1瓶1.5ml1瓶1份2酶標試劑標準品（160ngL）標準品稀

3、釋液3酶標包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說明書11封板膜12密封袋2張1個標本要求1標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80ngL40ngL20ngL10ngL5ngL

4、5號標準品4號標準品3號標準品2號標準品1號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，即為樣

5、品的實際濃度。注意事項1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡1530分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請