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文檔簡介
1、實驗項目一：總RNA的提?。ū刈觯┮弧嶒瀸W時：6學時二、實驗目的通過本實驗學習總RNA的提取和分析方法。三、實驗內容利用勻漿裂解細胞，采用TRilzol試劑盒抽提RNA去除蛋白質和DNA。四、實驗要求學會提取基因組RNA的方法和操作過程提取RNA時，要特別注意防止RNase的污染，所用玻璃器皿均應用0.1％的二乙基焦碳酸鹽(diethylpyrocarbonate，DEPC)處理。塑料器材均使用一次性用品，并高壓滅菌處理，必要時，也可
2、用0.1%DEPC處理。五、實驗所需儀器設備與試劑儀器：移液器及吸頭，電泳儀臺式高速離心機恒溫水浴鍋微量移液槍等試劑：TRIzol試劑、氯仿、異丙醇、75%乙醇（DEPCH2O配制）、DEPCH2O六、實驗原理TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。最大特點是可同時分離一個樣品的RNADNA蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化，細14.去上清夜，加入2030uLDEPC水，55℃10min，以完全溶解RNA。15.70度保存提取
3、的總RNA。八、注意事項1RNA酶是一類生物活性非常穩(wěn)定的酶類，除了細胞內源RNA酶外，外界環(huán)境中均存在RNA酶，所以操作時應戴手套。2RNA提取用品準備：1）普通的玻璃器皿：180℃烘干8小時（玻璃），研缽，小勺，試劑瓶若干個。2）一次性使用的塑料制品：槍頭、EP管等先用DEPC水處理然后高壓滅菌，烘干。3）用烘烤過的藥勺稱取試劑。4）用DEPC水配制試劑：0.1%DEPC水：37℃至少處理12小時，高壓滅菌15min。實驗結果:成功
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