多糖的提取工藝

1、多糖的提取工藝摘要：目的利用響應表面實驗設計優(yōu)化茯苓皮中茯苓多糖的提取方法和工藝條件。方法利用單因素實驗優(yōu)化茯苓皮中茯苓多糖的提取方法，在單因素實驗的基礎上利用響應表面實驗設計考察堿法提取過程中堿濃度、提取時間、料液比對多糖提取量的影響。結(jié)果茯苓皮中多糖的最佳提取方法為堿法提取其提取條件可用回歸方程Y=7.89＋15.249X1－35.4X12＋8.375X2－0.885X22＋7.333X1X2描述。結(jié)論最佳提取方法為堿法，最佳提取工

2、藝條件為：NaOH濃度0.84molL時間8.89h料液比1∶150。關鍵詞：茯苓皮；茯苓多糖；提??；響應表面實驗設計茯苓皮為多孔菌科真菌茯苓Poniacocos(Schw)Wolf菌核的外皮，茯苓皮在臨床上用量很少，絕大部分被當作廢料棄去。茯苓皮中含有一定量的茯苓多糖，茯苓多糖具有保肝降谷丙轉(zhuǎn)氨酶、增強免疫、鎮(zhèn)靜、降血糖及抗腫瘤等作用，被廣泛應用于中成藥、保健食品、美容藥膳具有較好的開發(fā)前景［1~5］。潘琦、段啟等［4，5］曾分別進行

3、過水提、堿提單因素實驗研究和有機溶劑提取工藝的研究，本研究在水提、堿提和超聲波提取單因素實驗研究的基礎上利用響應表面實驗設計優(yōu)化最佳提取工藝條件，為茯苓皮的開發(fā)利用奠定基礎。1器材1.1主要儀器UV752型可見紫外分光光度計；JJ系列電子天平；賽多利斯BS系列電子天平；HH?S型電熱恒溫水浴鍋；HS10260D超聲波提取器；XYJ802離心沉淀機。1.2茯苓皮云南思茅地區(qū)加工茯苓白塊所切削的茯苓皮干品，粉碎備用。1.3主要試劑濃硫酸、氫

4、氧化鈉、苯酚、無水葡萄糖均為國產(chǎn)分析純。苯酚溶液：稱取苯酚6g，加水至100ml即得。葡萄糖標準液：精密稱取105℃下干燥恒重的葡萄糖100.3mg加蒸餾水溶解并定容至100ml。2方法與結(jié)果2.1茯苓多糖測定采用硫酸苯酚法按文獻［6］中的方法測定。2.2水提法稱取一定量茯苓皮在料液比一定的條件下，考察提取次數(shù)、提取時間和提取溫度與茯苓多糖提取量的關系。2.3超聲波提取法稱取一定量茯苓皮在料液比一定的條件下考察超聲提取時間和提取溫度與多

5、糖提取量的關系。2.4堿法提取多糖稱取一定量茯苓皮在料液比一定的條件下，室溫提取30min，考察堿濃度與多糖提取量的關系。2.5水提法2.5.1提取次數(shù)的考察稱取一定量茯苓皮，在料液比1∶40，提取溫度95℃，提取30min次的條件下，考察提取次數(shù)與茯苓多糖提取量的關系。（結(jié)果見圖1）由圖1可知，茯苓皮提取的多糖量隨累積提取次數(shù)的增加而增加，但從第2次開始提取的多糖量并迅速減小，綜合考慮提取過程中的能耗、水耗等因素，宜采用一次提取。2.

6、5.2提取時間的考察稱取一定量茯苓皮，在料液比1∶40，提取溫度95℃，提取一次的條件下考察不同提取時間與多糖提取量的關系。（結(jié)果見圖2）由圖2可知在10～20min之間，茯苓皮多糖的提取量隨提取時間的增加快速增加20min之后則變化緩和故提取時間以20～30min為宜。[next]2.5.3提取溫度的考察稱取一定量茯苓皮，在料液比1∶40，提取時間30min，浸提一次的條件下考察提取溫度與多糖提取量的關系。（結(jié)果圖3）由圖3可知茯苓皮

7、中多糖提取量在20～40℃之間隨提取溫度的增加而增加，溫度高于40℃后則呈下降趨勢，X22＋7.3333X1X2。通過方程預測得到最佳堿浸提工藝條件為：NaOH濃度X1：0.84molL時間X2：8.89h。此條件下茯苓皮中多糖提取量達54.99％。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，主要用于在減壓條件下連續(xù)蒸餾大量易揮發(fā)性溶劑。尤其對萃取液的濃縮和色譜分離時的接收液的蒸餾，可以分離和純化反應產(chǎn)物。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的基本原理就是減壓蒸餾，也就是在減壓情況下，當溶劑蒸

8、餾時，蒸餾燒瓶在連續(xù)轉(zhuǎn)動。結(jié)構(gòu):蒸餾燒瓶可是一個帶有標準磨口接口的梨形或圓底燒瓶，通過一高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連，回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連，用于接收被蒸發(fā)的有機溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一三通活塞，當體系與大氣相通時，可以將蒸餾燒瓶，接液燒瓶取下，轉(zhuǎn)移溶劑，當體系與減壓泵相通時，則體系應處于減壓狀態(tài)。使用時，應先減壓，再開動電動機轉(zhuǎn)動蒸餾燒瓶，結(jié)束時，應先停機，再通大氣，以防蒸餾燒瓶在轉(zhuǎn)動中脫落。作為蒸餾的熱源

9、，常配有相應的恒溫水槽。使用方法：1.高低調(diào)節(jié):手動升降轉(zhuǎn)動機柱上面手輪順轉(zhuǎn)為上升逆轉(zhuǎn)為下降.電動升降手觸上升鍵主機上升手觸下降鍵主機下降.2.冷凝器上有兩個外接頭是接冷卻水用的一頭接進水另一頭接出水一般接自來水冷凝水溫度越低效果越好.上端口裝抽真空接頭接真空泵皮管抽真空用的.3.開機前先將調(diào)速旋鈕左旋到最小按下電源開關指示燈亮然后慢慢往右旋至所需要的轉(zhuǎn)速一般大蒸發(fā)瓶用中低速粘度大的溶液用較低轉(zhuǎn)速.燒瓶是標準接口24號隨機附500ml1

10、000ml兩種燒瓶溶液量一般不超過50%為適宜.注意事項:1.玻璃零件接裝應輕拿輕放裝前應洗干凈擦干或烘干.2.各磨口密封面密封圈及接頭安裝前都需要涂一層真空脂.3.加熱槽通電前必須加水不允許無水干燒.4.RE52B必須使(19)擰入保險孔內(nèi)保險以免損壞燒瓶.5.如真空抽不上來需檢查(1)各接頭接口是否密封(2)密封圈密封面是否有效(3)主軸與密封圈之間真空脂是否涂好(4)真空泵及其皮管是否漏氣(5)玻璃件是否有裂縫碎裂損壞的現(xiàn)象（6）

11、結(jié)束時，應先停機，再通大氣，以防蒸餾燒瓶在轉(zhuǎn)動中脫落應該為：結(jié)束時應先停止轉(zhuǎn)動，抬高圓底燒瓶，以防蒸餾燒瓶在轉(zhuǎn)動中脫落；然后通大氣，再關抽空裝置，以防循環(huán)水倒吸！因為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀通過旋轉(zhuǎn)擴大了燒瓶的受熱面積，同時也因為旋轉(zhuǎn)暫時的粘在瓶壁內(nèi)溶劑的液面的擴大提高了蒸發(fā)速度，因此效率非常高旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，主要用于在減壓條件下連續(xù)蒸餾大量易揮發(fā)性溶劑。尤其對萃取液的濃縮和色譜分離時的接收液的蒸餾，可以分離和純化反應產(chǎn)物。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的基本原理就是減壓蒸