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1、干旱脅迫對小麥幼苗生理生化指標的影響干旱脅迫對小麥幼苗生理生化指標的影響楊萬坤11412023811應用生物教育A班摘要:摘要:用小麥幼苗為實驗材料,研究干旱脅迫對小麥幼苗生理生化指標的影響。試驗結果表明:在干旱脅迫(5天)下小麥幼苗中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、過氧化氫(H2O2)、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、ASA的含量都較正常情況下小麥幼苗的含量高。關鍵字:關鍵字:干旱脅迫、小麥幼苗、Pro、MDA、H
2、2O2、PPO、POD、GSH、ASA引言:引言:小麥是我國北方地區(qū)的主要糧食作物,但是近幾年北方地區(qū)旱情日益嚴重,小麥產量安全問題日益突出。干旱也屬于逆境,水分在植物的生命活動中占主導地位,大多數植物遭受干旱逆境后各個生理過程都會受到不同程度的影響。干旱是我國農業(yè)可持續(xù)發(fā)展面臨的主要問題之一干旱脅迫對植物的影響是一個復雜的生理生化過程涉及到許多生物大分子和小分子【1】。干旱脅迫對植物的影響主要體現在酶活性、膜系統、細胞失水等,導致細胞
3、代謝紊亂,甚至是細胞死亡。本次試驗測定正常生長的小麥幼苗和干旱脅迫處理小麥幼苗中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、過氧化氫、抗氧化酶(PPO、POD)、谷胱甘肽(GSH)、ASA的含量變化來研究干旱脅迫對小麥的影響,從而找到合適的方法來解決干旱脅迫問題,解決小麥生產安全問題提供理論依據。1材料與方法材料與方法1.11.1材料及處理材料及處理將小麥種子用0.1%HgCl2消毒10min后,用蒸餾水漂洗干凈,用蒸餾水于26℃下吸漲12h,
4、然后播于墊有6層濕潤濾紙的帶蓋白磁盤(24cm16cm)中→于26℃下暗萌發(fā)60h,計算發(fā)芽率(注意與前面結果比較),選取長勢一致的小麥幼苗做干旱5天干旱處理。5天后用相同的方法分別對實驗組和對照組的小麥進行脯氨酸、MDA、過氧化氫、抗氧化酶(PPO、POD)、GSH、ASA的含量的測定。1.21.2測定方法測定方法1.211.21玉米種子發(fā)芽率的測定玉米種子發(fā)芽率的測定各取50粒吸脹的玉米種子→沿胚的中心線切成兩半(嚴格區(qū)分兩個半粒)
5、,進行下列實驗:其中50個半粒進行TTC染色(30℃水浴20min),另50個半粒進行曙紅染色(室溫染色10min)洗凈后觀察。根據兩種方法的染色情況,分別計算發(fā)芽率。1.221.22小麥幼苗脯氨酸含量的測定小麥幼苗脯氨酸含量的測定分別取0.1g實驗組和對照組的胚芽鞘→加入3ml3%磺基水楊酸(SSA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml3%SSA洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。測定:上清液各2ml→分別加入2ml冰乙酸
6、和2ml茚三酮試劑→煮沸15min→冷卻后→5000rpm離心10min(若沒沉淀可省略次步驟)→分別測定A520PPOactivies=用總VVtWA???01.0410(U.g1FW)計算出PPO和POD的值1.261.26小麥幼苗小麥幼苗GSHGSH的測定的測定分別取0.1g實驗組和對照組的胚芽鞘→加入3ml5%三氯乙酸(TCA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml5%TCA洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。測定:上
7、清液各1ml(空白用5%TCA代替)→分別加入2ml0.1MPBS(pH=7.7)→1ml2mMDTNB→25℃5min→測定A412將測得的A412值帶入公式GSHcontent=用總顯VVVWLA?????412(umol.g1FW)將GSH的值計算出來1.271.27小麥幼苗小麥幼苗ASAASA的測定的測定?ASA的提取:分別取0.2g實驗組和對照組的胚芽鞘→加入3ml5%三氯乙酸(TCA)和少許石英砂→充分研磨→用2ml5%TC
8、A洗研缽→5000rpm離心10min→量上清液體積。?測定:上清液各0.8ml(空白用5%TCA代替)→分別加入0.8ml0.15MNaH2PO4(pH=7.4)和蒸餾水→搖勻→分別加入0.8ml5%TCA、44%磷酸和4%聯吡啶→搖勻→加入3%FeCl30.8ml→37℃15min→測定A525?ASAcontent=用總顯VVVWLA?????525(umol.g1FW)2、結果與分析、結果與分析發(fā)芽率的測定:發(fā)芽率的測定:TTC
9、染色法:44個具有活力。曙紅染色法:44個具有活力。分別計算兩種方法的發(fā)芽率:TTC法4450100%=88%;曙紅染色法4450100%=88%。用兩種方法測得的種子發(fā)芽率是一樣的,都為88%說明這一批種子的生命活力較高。脯氨酸含量測定:脯氨酸含量測定:組別A520V總V顯V用Procontent干旱組1.8424.8ml6ml2ml0.08187mol.g1FW?對照組0.0185.3ml6ml2ml0.00088mol.g1FW?
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