bluing reagent-081128

1、共5頁(yè)第1頁(yè)靛藍(lán)染色液靛藍(lán)染色液分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)7602037使用須知使用須知用途用途本試劑主要用于體外診斷（IVD）。Ventana醫(yī)療系統(tǒng)（Ventana）靛藍(lán)試劑是一種碳酸鋰緩沖溶液。該試劑用于在Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)上用于藍(lán)化蘇木精染色的切片。要合理解釋任何染色結(jié)果的臨床意義必須同時(shí)結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察和適當(dāng)?shù)膶?duì)照。由資深的病理學(xué)家參考病人的臨床病史以及其它實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。注意注意：美國(guó)聯(lián)邦法律規(guī)定本器材僅限由醫(yī)生或遵醫(yī)囑銷(xiāo)

2、售。摘要和說(shuō)明摘要和說(shuō)明靛藍(lán)試劑利用升高洗滌緩沖液的pH值和鋰離子的聯(lián)合作用進(jìn)一步藍(lán)化蘇木精染色的切片。1靛藍(lán)試劑在蘇木精后使用，用以增強(qiáng)蘇木精的藍(lán)色染色。原理和操作原理和操作蘇木精復(fù)染后，在切片上應(yīng)用靛藍(lán)試劑并均勻混合。試劑可增強(qiáng)蘇木精染色效果，孵育結(jié)束時(shí)，Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)將通過(guò)清洗切片，及時(shí)終止反應(yīng)并去除未結(jié)合的試劑。若需更多信息，請(qǐng)參閱Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)的“操作者手冊(cè)”。材料和方法材料和方法提供的試劑提供的試

3、劑一個(gè)靛藍(lán)試劑分配器，含有25ml的即用型稀釋劑。內(nèi)含0.1M碳酸鋰溶于0.5M碳酸鈉溶液中。重建，混合，稀釋?zhuān)味ㄖ亟?，混合，稀釋?zhuān)味ú恍柚亟ā⒒旌?、稀釋或滴定。本試劑針?duì)結(jié)合Ventana檢測(cè)試劑盒、抗體與輔助試劑一同在Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)上的使用進(jìn)行了優(yōu)化。所需的材料和試劑（未提供）所需的材料和試劑（未提供）以下列出了可能在染色中用到、但本試劑盒中未提供的試劑和材料：1.Ventana陰性對(duì)照試劑或兔陰性對(duì)照2.一抗3.

4、抗體稀釋劑4.顯微鏡載片，帶正電荷5.陽(yáng)性和陰性組織對(duì)照6.能將溫度保持在70C5C的干燥爐7.條碼標(biāo)簽（適用于陰性對(duì)照和一抗）8.10%中性緩沖福爾馬林9.染色缸或染槽10.定時(shí)器11.二甲苯12.乙醇或梯度酒精13.去離子水或蒸餾水14.BiocareMedical的DecloakingChamber（ES和NexESIHC自動(dòng)切片染色機(jī)）15.ES、NexESIHC、BenchMark和BenchMarkXT自動(dòng)切片染色機(jī)16.i

5、VIEWTMDABAECVRed(ALKPHOS)EnhancedVReddetectionkits17.VentanaEndogenousBiotinBlockingKit18.VentanaAmplificationKit19.Detectionkitspecificsoftware(ESautomatedslidestaineronly)20.VentanaAPKWashSolution(ESNexESIHCautomatedsl

6、idestainers)21.VentanaLiquidCoverslipTMsolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)22.VentanaEZPrepTMsolution(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)23.VentanaReactionBuffer(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)2

7、4.VentanaLCS(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)25.VentanaCellConditioning1(CC1)CellConditioning2(CC2)(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)26.VentanaProteaseIIIIII27.VentanaHematoxylinCounterstain28.封固劑29.

8、蓋玻片30.光學(xué)顯微鏡（2080X）適用于特定檢測(cè)。儲(chǔ)存和處理儲(chǔ)存和處理儲(chǔ)存于28C。不可冰凍。對(duì)于不屬于包裝插頁(yè)中列出的儲(chǔ)存條件，使用者必須加以檢驗(yàn)。為確保正確的試劑傳送和穩(wěn)定性，每次運(yùn)行后必須更換蓋子，且必須立即將分配器垂直放置在冰箱里。每個(gè)試劑分配器都標(biāo)有有效期。如儲(chǔ)存適當(dāng)，本試劑可穩(wěn)定至標(biāo)簽上標(biāo)示的日期。一旦試劑過(guò)期，規(guī)定的儲(chǔ)存方法將不再適用。顯示本品不穩(wěn)定的跡象是試劑出現(xiàn)沉淀。在第一次出現(xiàn)試劑不穩(wěn)定跡象時(shí)，請(qǐng)立即聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐腣

9、entana辦事處。標(biāo)本的收集和準(zhǔn)備標(biāo)本的收集和準(zhǔn)備當(dāng)和Ventana一抗、檢測(cè)試劑盒、輔助試劑和自動(dòng)切片染色機(jī)（見(jiàn)所需的材料和試劑（未提供）一節(jié)）一同使用時(shí)，本品適用于經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定、石蠟包埋組織樣本的檢共5頁(yè)第3頁(yè)BenchMark或BenchMarkXT全自動(dòng)切片染色機(jī)自動(dòng)切片染色機(jī)1.使用載玻片條碼標(biāo)簽，該標(biāo)簽與待執(zhí)行的試驗(yàn)方案相對(duì)應(yīng)。2.將一抗、相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤(pán)上，并將其放置到自動(dòng)切片染色

10、機(jī)上。檢查液體瓶和廢物缸。3.將載玻片放到自動(dòng)切片染色機(jī)上。針對(duì)所有分析儀針對(duì)所有分析儀1.開(kāi)始進(jìn)行染色。2.染色結(jié)束后，將載玻片從自動(dòng)切片染色機(jī)上拿下來(lái)。3.對(duì)于iVIEWDAB和VentanaRed試劑盒，用溫和的洗滌劑或酒精進(jìn)行清洗，以去除蓋玻片上的溶液；在脫水和透明后，常規(guī)封片。4.對(duì)于AEC顯色，不要脫水和透明。用水溶性封固劑封片。應(yīng)在染色后的23天內(nèi)閱片，染色片于室溫（1525C）下可保存至少2年。質(zhì)控程序質(zhì)控程序陽(yáng)性組織對(duì)

11、照陽(yáng)性組織對(duì)照每次染色流程必須包含陽(yáng)性對(duì)照。陽(yáng)性對(duì)照的目的是為了確定試劑和儀器功能的可靠性。用于對(duì)照的組織可同時(shí)包含呈陽(yáng)性和陰性染色的細(xì)胞或組織成分，以便同時(shí)提供陽(yáng)性和陰性對(duì)照。用于對(duì)照的組織應(yīng)為新鮮的尸檢、活檢或外科手術(shù)切除標(biāo)本，并采用與試驗(yàn)切片相同的方法盡快制備或固定。對(duì)照組織的目的是為了監(jiān)控程序的所有步驟，包括從標(biāo)本制備到染色的各個(gè)環(huán)節(jié)。使用與試驗(yàn)樣本不同固定或處理方式的組織切片可對(duì)除固定和組織處理以外的所有試劑和方法步驟進(jìn)行質(zhì)控

12、?？墒褂藐?yáng)性染色較弱的組織來(lái)優(yōu)化質(zhì)控和檢測(cè)輕微的試劑降解。陽(yáng)性對(duì)照只能用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)步驟和試驗(yàn)試劑的正確性，而不能用來(lái)輔助評(píng)價(jià)病人樣本的診斷結(jié)果。如果陽(yáng)性對(duì)照出現(xiàn)陰性結(jié)果，則實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的結(jié)果無(wú)效。陰性組織對(duì)照陰性組織對(duì)照可將用于陽(yáng)性對(duì)照的同一組織用于陰性對(duì)照。由于在大多數(shù)組織中細(xì)胞類(lèi)型多樣，故可同時(shí)提供內(nèi)部陰性對(duì)照位點(diǎn)，但使用者應(yīng)對(duì)此進(jìn)行檢驗(yàn)。如果陰性對(duì)照中出現(xiàn)特異性染色，那么病人樣本的結(jié)果應(yīng)被視為無(wú)效。疑難解答疑難解答當(dāng)對(duì)照試驗(yàn)有任何問(wèn)題

13、，請(qǐng)立即向您當(dāng)?shù)氐腣entana辦事處報(bào)告。如果對(duì)照試驗(yàn)缺乏特異性，那么病人結(jié)果將視為無(wú)效。詳情請(qǐng)參見(jiàn)本說(shuō)明書(shū)的“疑難解答”一節(jié)。在明確和解決問(wèn)題后重復(fù)檢測(cè)病人樣本。陰性試劑對(duì)照陰性試劑對(duì)照對(duì)于免疫組化而言，為正確評(píng)判結(jié)果，每次試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)立陰性試劑對(duì)照。陰性試劑用于取代一抗來(lái)評(píng)估非特異性染色。通常情況下，陰性對(duì)照試劑采用小鼠或兔正常血清。使用Ventana抗體稀釋劑將其稀釋至與一抗同樣的濃度。稀釋劑本身也可作為陰性試劑對(duì)照。陰性試劑對(duì)照

14、的孵育時(shí)間應(yīng)與一抗的孵育時(shí)間相同。當(dāng)在一組連續(xù)切片上使用多個(gè)抗體時(shí)，應(yīng)用一個(gè)陰性試劑對(duì)照即可。檢測(cè)方案正確性檢驗(yàn)檢測(cè)方案正確性檢驗(yàn)每當(dāng)初次制定檢測(cè)方案，都應(yīng)首先進(jìn)行陽(yáng)性或陰性對(duì)照檢驗(yàn)，用以驗(yàn)證方法的特異性（參照本產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中的“質(zhì)控程序”一節(jié)，以及美國(guó)病理家學(xué)院實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可體系、解剖病理檢查表和NCCLS批準(zhǔn)指南中的質(zhì)控建議）。在更換抗體批次或更改檢測(cè)參數(shù)時(shí)均應(yīng)重復(fù)此類(lèi)質(zhì)控程序。結(jié)果解釋結(jié)果解釋Ventana自動(dòng)染色程序會(huì)產(chǎn)生顯色反應(yīng)產(chǎn)物

15、。有關(guān)預(yù)期的顯色反應(yīng)信息請(qǐng)參見(jiàn)相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒包裝插頁(yè)。有經(jīng)驗(yàn)的病理學(xué)家必須在解釋結(jié)果之前對(duì)陽(yáng)性和陰性對(duì)照進(jìn)行評(píng)估。陽(yáng)性對(duì)照組織陽(yáng)性對(duì)照組織為明確試劑有效性，應(yīng)首先觀察陽(yáng)性對(duì)照組織。如靶細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)產(chǎn)物，則表示存在陽(yáng)性反應(yīng)。有關(guān)預(yù)期顯色反應(yīng)的詳情請(qǐng)參見(jiàn)檢測(cè)試劑盒的包裝插頁(yè)。復(fù)染的強(qiáng)度取決于所選的孵育時(shí)間。對(duì)于IHC復(fù)染，視孵育時(shí)間長(zhǎng)短和所用的蘇木精效能的不同，細(xì)胞核呈灰白色至深藍(lán)色。復(fù)染過(guò)多或不充分都可能影響結(jié)果的正確判斷。