人痢疾內(nèi)阿米巴抗原酶聯(lián)免疫分析

1、人痢疾內(nèi)阿米巴抗原酶聯(lián)免疫分析人痢疾內(nèi)阿米巴抗原酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人痢疾內(nèi)阿米巴抗原含量。實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人痢疾內(nèi)阿米巴抗原水平。用純化的人痢疾內(nèi)阿米巴抗原抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入痢疾內(nèi)阿米巴抗原，再與HRP標(biāo)記的痢疾內(nèi)阿米巴抗原抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體

2、復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的痢疾內(nèi)阿米巴抗原呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人痢疾內(nèi)阿米巴抗原濃度。試劑盒組成：試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)品0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存

3、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求：樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固1020分鐘，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存

4、過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合1020分鐘后，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)

5、分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.27.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品