浙江大學2003—2007考研生物化學真題(含詳細解析)

1、浙江大學浙江大學2003—2007考研生物化學真題（含解析）考研生物化學真題（含解析）2003、真題解析、真題解析1、簡述、簡述SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳得基本原理，你使用該技術分離和檢測過何種物質？主聚丙烯酰胺凝膠電泳得基本原理，你使用該技術分離和檢測過何種物質？主要操作步驟有哪些？要操作步驟有哪些？該題是實驗操作中的?？碱}SDS－PAGE：當SDS與蛋白質結合后，蛋白質分子即帶有大量的負電荷，從而掩蓋了天然蛋白質分子間的電荷差別。與此

2、同時蛋白質在SDS的作用下結構變得松散，形狀趨向一致，所以各種SDS蛋白質復合物在電泳時產生的泳動率差異，只反映了分子量的差異，即純利用分子篩效應，按蛋白質分子量大小進行分離，分子量越大移動越慢。?應用應用SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳還可以用于未知蛋白分子量的測定，在同一凝膠上對一系列已知分子量的標準蛋白及未知蛋白進行電泳，測定各個的標準蛋白的電泳距離（或遷移率），并對各自分子量的對數（logMr）作圖，即得到標準曲線。測定未知蛋白質的電

3、泳距離（或遷移率），通過標準曲線就可以求出未知蛋白的分子量。SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳經常應用于提純過程中純度的檢測，純化的蛋白質通常在SDS電泳上應只有一條帶，但如果蛋白質是由不同的亞基組成的，它在電泳中可能會形成分別對應于各個亞基的幾條帶。SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳具有較高的靈敏度，一般只需要不到微克量級的蛋白質，而且通過電泳還可以同時得到關于分子量的情況，這些信息對于了解未知蛋白及設計提純過程都是非常重要的。SDS－聚丙烯酰胺凝膠

4、電泳可用于單鏈ＤＮＡ、寡核苷酸片斷以及蛋白質亞基，膜蛋白、肽類等物質的分析，還可以用于研究大分子的折疊結構等方面。?基本操作基本操作SDSPAGE的基本操作和聚丙烯酰胺凝膠電泳相近，其支持介質都是聚丙烯酰胺凝膠，因此在制膠、加樣和電泳儀器都都相同或相近，區(qū)別的是SDSPAGE需要有標準蛋白溶液及供試品溶液的制備，樣品預先需要用SDS處理。一般采用取標準蛋白，加水制成每1ml中含2～5mg的溶液，與水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸鈉

5、0.04g，溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中過夜。供試品照上述方法配制。此外，在電泳結束以后，需要對相對遷移率和分子量進行計算將電泳脫色后的區(qū)帶用卡尺或用掃描定位法測量染料移動的距離、染色前膠條長度、蛋白移動距離和脫色后的膠條長度。2、質粒是基因工程中最常用得載體，為獲得某種質粒、質粒是基因工程中最常用得載體，為獲得某種質粒(如pUC18)DNA，請你設計一個簡，請你設計一個簡單得實驗過程單得實驗過程(步驟步驟)。大腸桿菌質粒DN

6、A的提?。▔A裂解法）此方法適用于小量質粒DNA的提取提取的質粒DNA可直接用于酶切PCR擴增。人們清楚地了解遺傳信息的構成和傳遞的途徑.在以后的近50年里分子遺傳學分子免疫學細胞生物學等新學科如雨后春筍般出現一個又一個生命的奧秘從分子角度得到了更清晰的闡明DNA重組技術更是為利用生物工程手段的研究和應用開辟了廣闊的前景.在人類最終全面揭開生命奧秘的進程中化學已經并將更進一步地為之提供理論指導和技術支持.該題太小，以后不大會再出該題太小，

7、以后不大會再出5、何謂變性？哪些因素可以引起蛋白質的變性？何謂別構、何謂變性？哪些因素可以引起蛋白質的變性？何謂別構(變構變構)？舉一例說明之。？舉一例說明之。蛋白質受到某些物理或化學因素作用時，引起生物活性的喪失，溶解度的降低以及其它性質的改變，這種現象稱為蛋白質的變性作用。變性作用的實質是由于維持蛋白質高級結構的次級鍵遭到破壞而造成天然構象的解體，但未涉及共價鍵的斷裂。有些變性是可逆的，有些變性是不可逆的。引起蛋白質的變性的因素有：

8、熱、紫外線照射、高壓和表面張力等物理因素，及有機溶劑、脲、胍、酸、堿等化學因素。別構效應（allostericeffect）某種不直接涉及蛋白質活性的物質，結合于蛋白質活性部位以外的其他部位（別構部位），引起蛋白質分子的構象變化，而導致蛋白質活性改變的現象?？煞譃橥傩彤惔傩獌深?。以氧與血紅蛋白的結合為例。該題出現多次，應引起重視。6、試述三羧酸循環(huán)是如何溝通糖類、脂類、以及蛋白質三大有機物的代謝的？、試述三羧酸循環(huán)是如何溝通糖類

9、、脂類、以及蛋白質三大有機物的代謝的？一方面，TCA是糖、脂肪、氨基酸等徹底氧化分解的共同末端途徑，另一方面，循環(huán)中生成的草酰乙酸、α酮戊二酸、檸檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是合成糖、氨基酸、脂肪酸、卟啉等的原料，因而TCA將各種有機物的代謝聯(lián)系起來。TCA是聯(lián)系體內三大物質代謝的中心環(huán)節(jié)，為合成其它物質提供C架。重要，會是大題中的一個知識點2004、真題解析、真題解析1、名詞解釋、名詞解釋1)埃德曼降解：埃德曼降解是一種蛋白質或肽

10、的氨基末端分析法也是一種氨基酸序列測定法。其原理是在弱堿性條件下使N末端游離的α氨基與苯異硫氰酸酯(PITC)偶聯(lián)反應，然后用酸處理，經環(huán)化斷裂、轉化從多肽鏈上僅使氨基末端殘基以氨基酸的苯基乙內酰硫脲衍生物(PTH氨基酸)的形態(tài)從肽鏈上斷裂下來，然后進行分析。2)抗體：抗體是機體在抗原物質刺激下，由B細胞分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發(fā)生特異性結合反應的免疫球蛋白，是一種可溶性的血清糖蛋白。其具有高度特異性和龐大的多樣性兩個特點。