放線菌的選擇分離培養(yǎng)ppt課件_第1頁(yè)
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1、一 教學(xué)要求,放線菌有多種代謝產(chǎn)物,如抗生素,維生素、氨基酸、蛋白質(zhì)、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等,很多產(chǎn)物在農(nóng)業(yè)、醫(yī)療、食品及國(guó)防等領(lǐng)域產(chǎn)生了巨大的效益。 本實(shí)驗(yàn)的目的在于學(xué)習(xí)從土壤等環(huán)境中分離放線菌,實(shí)驗(yàn)一 放線菌的選擇分離與計(jì)數(shù),1,二 實(shí)驗(yàn)原理,土壤中含有豐富的放線菌,但主要是鏈霉菌,鏈霉菌以外的其他放線菌,如小單孢菌、游動(dòng)放線菌、諾卡氏菌等,它們是生物活性物質(zhì)重要的產(chǎn)生菌。但往往由于樣品中稀有放線

2、菌的數(shù)量太少,常規(guī)的分離方法很難得到。對(duì)樣品進(jìn)行風(fēng)干、干熱處理、培養(yǎng)基添加重鉻酸鉀的方法減少細(xì)菌和真菌的數(shù)量;用干熱和苯酚處理減少鏈霉菌數(shù)量的方法,可以分離得到更多種類的放線菌。,2,三 材料與器材,菜園土或林地土,自然風(fēng)干,備用。0.1% 重鉻酸鉀溶液,1% 苯酚,高氏1號(hào)培養(yǎng)基。水浴鍋等。,3,取樣及預(yù)處理,1、來(lái)源:土壤中放線菌最豐富,品種齊全。可以篩選新的放線菌。 從堆肥或過(guò)熱的材料中如干草或蔗渣中可分離到大量的嗜熱

3、放線菌,從淡水和海洋環(huán)境中分離到嗜堿性的和嗜酸性的菌種。2、取樣及預(yù)處理 (1)土樣:取5cm以下的土樣,放于滅菌過(guò)的牛皮紙袋中,一般不放于不透氣的瓶子或塑料袋中。氣生孢子能耐干燥,耐濕熱能力高于營(yíng)養(yǎng)體,室溫保存20天,放線菌的數(shù)量和組成變化不大,細(xì)菌大部分死亡 (2)水樣與水低泥樣用采泥器和采水器采集,放與滅菌瓶,不密封,四 操作步驟,4,,(1)取體積為300ml的高氏一號(hào)培養(yǎng)基,加入0.1%的重鉻酸鉀15mL,使之終

4、濃度為50ppm,搖勻,倒平板,待用。(2)取土樣5g,攤平于大號(hào)培養(yǎng)皿上,在恒溫干燥箱中120℃干熱處理1h。(3)土樣熱處理后,加入裝有45mL無(wú)菌水和少量玻璃珠的三角瓶中,加入0.5mL的笨酚,室溫下振蕩30分鐘,靜止5分鐘,取上清液用無(wú)菌水稀釋10倍。同時(shí)另取土樣5g,不加熱和笨酚處理,余步驟同上,作為對(duì)照。(4)用移液管分別吸取原液和10倍稀釋液各0.1ml標(biāo)志稀釋倍數(shù)的平板上,涂抹均勻,倒置,28℃培養(yǎng)。(5)培養(yǎng)1

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