放線菌的選擇分離培養(yǎng)ppt課件

1、一 教學要求,放線菌有多種代謝產(chǎn)物，如抗生素，維生素、氨基酸、蛋白質、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等，很多產(chǎn)物在農(nóng)業(yè)、醫(yī)療、食品及國防等領域產(chǎn)生了巨大的效益。 本實驗的目的在于學習從土壤等環(huán)境中分離放線菌,實驗一 放線菌的選擇分離與計數(shù),1,二 實驗原理,土壤中含有豐富的放線菌，但主要是鏈霉菌，鏈霉菌以外的其他放線菌，如小單孢菌、游動放線菌、諾卡氏菌等，它們是生物活性物質重要的產(chǎn)生菌。但往往由于樣品中稀有放線

2、菌的數(shù)量太少，常規(guī)的分離方法很難得到。對樣品進行風干、干熱處理、培養(yǎng)基添加重鉻酸鉀的方法減少細菌和真菌的數(shù)量；用干熱和苯酚處理減少鏈霉菌數(shù)量的方法，可以分離得到更多種類的放線菌。,2,三 材料與器材,菜園土或林地土，自然風干，備用。0.1％ 重鉻酸鉀溶液，1％ 苯酚，高氏1號培養(yǎng)基。水浴鍋等。,3,取樣及預處理,1、來源：土壤中放線菌最豐富，品種齊全?？梢院Y選新的放線菌。 從堆肥或過熱的材料中如干草或蔗渣中可分離到大量的嗜熱

3、放線菌，從淡水和海洋環(huán)境中分離到嗜堿性的和嗜酸性的菌種。2、取樣及預處理 （1）土樣：取5cm以下的土樣，放于滅菌過的牛皮紙袋中，一般不放于不透氣的瓶子或塑料袋中。氣生孢子能耐干燥，耐濕熱能力高于營養(yǎng)體，室溫保存20天，放線菌的數(shù)量和組成變化不大，細菌大部分死亡 （2）水樣與水低泥樣用采泥器和采水器采集，放與滅菌瓶，不密封,四 操作步驟,4,,（1）取體積為300ml的高氏一號培養(yǎng)基，加入0.1%的重鉻酸鉀15mL，使之終

4、濃度為50ppm，搖勻，倒平板，待用。（2）取土樣5g，攤平于大號培養(yǎng)皿上，在恒溫干燥箱中120℃干熱處理1h。（3）土樣熱處理后，加入裝有45mL無菌水和少量玻璃珠的三角瓶中，加入0.5mL的笨酚，室溫下振蕩30分鐘，靜止5分鐘，取上清液用無菌水稀釋10倍。同時另取土樣5g，不加熱和笨酚處理，余步驟同上，作為對照。（4）用移液管分別吸取原液和10倍稀釋液各0.1ml標志稀釋倍數(shù)的平板上，涂抹均勻，倒置，28℃培養(yǎng)。（5）培養(yǎng)1