乳酸菌發(fā)酵清瘟敗毒散提取液的制備及其在斷奶仔豬上的應(yīng)用.pdf

1、本研究旨在以兩種乳酸菌（植物乳桿菌和屎腸球菌）對清瘟敗毒散提取液進(jìn)行發(fā)酵，探索其對乳酸菌生長的影響，并對發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化，以及用發(fā)酵罐擴(kuò)大試驗驗證，然后將發(fā)酵制劑應(yīng)用于斷奶仔豬，觀察其對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響。具體試驗內(nèi)容如下:
　　(1)清瘟敗毒散提取液對乳酸菌生長的影響及發(fā)酵工藝優(yōu)化。首先在培養(yǎng)液中添加0、20％、40％、60％、80％、100％（體積百分比）的清瘟敗毒散提取液，對乳酸菌進(jìn)行培養(yǎng)，研究其對乳酸菌生長的影響。結(jié)果

2、顯示，隨藥物濃度增加乳酸菌活菌量先升后降，表明清瘟敗毒散提取液對乳酸菌生長有一定的促進(jìn)作用，其適宜添加量為40％。其次，通過L9(34)三因素三水平正交試驗對培養(yǎng)基中紅糖、豆粕、酵母浸粉的添加量進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果顯示酵母浸粉對乳酸菌生長的影響最大，豆粕次之，紅糖最小;最優(yōu)培養(yǎng)基為:每升培養(yǎng)液中，紅糖20g、顯粕5g，酵母浸粉4g，乙酸鈉3g、磷酸氫二鉀2g、硫酸鎂0.1g、硫酸錳0.02g、葉溫801mL、pH70，乳酸菌活菌量達(dá)到76×1

3、08CFU/mL，是優(yōu)化前的138倍。然后對初始pH、接種量、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時間等發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，確定了最佳發(fā)酵條件為:初始pH7.0、接種量25％、發(fā)酵溫度34℃、發(fā)酵時間36h。培養(yǎng)基和發(fā)酵條件優(yōu)化后，活菌含量為1.22×109CFU/mL，活菌含量是優(yōu)化前的2.18倍。
　　(2)發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)和優(yōu)化試驗。二角瓶優(yōu)化發(fā)酵工藝通過用發(fā)酵罐擴(kuò)大試驗，結(jié)果顯示乳酸菌含量升高，是三角瓶培養(yǎng)的1.32倍，說明發(fā)酵罐為乳酸菌提供了更適

4、宜的生長條件，更利于乳酸菌的生長;添加一定量的CaCO3能促進(jìn)乳酸菌的生長，最適添加量為15％;一定范圍內(nèi)提高發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速可以促進(jìn)乳酸菌的生長，適宜轉(zhuǎn)速為70rpm。
　　(3)發(fā)酵清瘟敗毒散提取液在斷奶仔豬上的應(yīng)用。采用單因素試驗設(shè)計，飲水給藥，選擇360頭體重接近的28(±3)d三元雜交斷奶仔豬，隨機(jī)分為6個處理，設(shè)對照組、乳酸菌口服液組(200倍稀釋)、末發(fā)酵清瘟敗毒散提取液組（200倍稀釋）、3個發(fā)酵清瘟敗毒散提取液組（A組

5、400倍稀釋、B組200倍稀釋、C組100倍稀釋），每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)20頭豬。試驗期28d，計算采食量、口增重、料重比、腹瀉菌和淘汰率。結(jié)果顯示，發(fā)酵清瘟敗毒散提取液各組與對照組相比，均能顯著提高平均口采食量、口增重，降低料重比、腹瀉率和淘汰率;B組、C組效果明顯好于未發(fā)酵組和乳酸菌口服液組。其中，B組與對照組、乳酸菌口服液組、未發(fā)酵組相比，平均口采食量分別提高了13.2％(P＜0.05)、11.9％(P＜0.05)、2.5％

6、(P＜0.05)，平均口增重分別提高了294％(P＜005)、249％(P＜0.05)、7.1％(P＜005)，料重比分別降低了126％(P＜0.05)、104％(P＜0.05)、4.6％(P＜005)，腹瀉率分別降低了72.8％(P＜0.05)、653％(P＜0.05)、40.6％(P＜0.05);B組與對照組、乳酸菌口服液組相比，淘汰率分別降低了83.5％(P＜005)、80.2％(P＜005)。研究表明，清瘟敗毒散提取液發(fā)酵后，用