凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的表征及抗菌活性研究.pdf

1、本論文首先研究了姜精油超臨界CO2萃取技術(shù)提取工藝的優(yōu)化，通過單因素、響應(yīng)面優(yōu)化方法得到了最佳的姜精油提取工藝。然后用活化的凹凸棒石作為載體，結(jié)合出一種新型凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物;并對該復(fù)合物的表征開展了研究;最后，通過體內(nèi)、體外抗菌實驗證實了該復(fù)合物對大腸桿菌的抑制作用，并在分子水平研究了其抑菌抗炎作用機(jī)理。
　　(1)姜精油的提取。應(yīng)用超臨界CO2萃取技術(shù)提取姜精油，采取單因素和響應(yīng)面優(yōu)化方法，以6-姜酚得率作為姜精油提取的

2、考察指標(biāo)，在本實驗室前期研究基礎(chǔ)上，又考察了CO2流量、姜粉過篩目數(shù)和夾帶劑（無水乙醇）添加量三個因素對萃取效果的影響。所得最優(yōu)姜精油提取條件為:CO2流量為25L/h，姜粉過篩目數(shù)為80目，夾帶劑添加量為無水乙醇92.46mL，得到的6-姜酚的最優(yōu)得率為3.21％。
　　(2)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的表征。通過傅里葉紅外光譜儀(FTIR)、X射線衍射儀(XRD)、同步熱分析儀(TG-DSC)、Zeta電位儀、比表面積及孔徑分析

3、儀(BET)、場發(fā)射透射電子顯微鏡(TEM)對凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物進(jìn)行了表征。FTIR結(jié)果顯示凹凸棒石已負(fù)載了姜精油。XRD和BET結(jié)果顯示姜精油以物理吸附的方式附著于凹凸棒石表面。TG-DSC分析進(jìn)一步證明了凹凸棒石負(fù)載姜精油，并估算該復(fù)合物中姜精油含量為13.97％。復(fù)合物的Zeta電位絕對值較單一的凹凸棒石明顯降低。TEM觀察結(jié)果表明姜精油進(jìn)入了凹凸棒石顆粒的微觀孔道，與其成功結(jié)合。
　　(3)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物體

4、外抑菌活性的研究。該復(fù)合物對大腸桿菌的最低抑菌濃度(MIC)為25mg·mL-1，與單一的姜精油相比表現(xiàn)出更好的抗菌活性。該復(fù)合物對延緩期和對數(shù)期生長的大腸桿菌均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制效果。革蘭氏染色實驗和吸附性實驗結(jié)果表明，該復(fù)合物很好的結(jié)合了凹凸棒石吸附細(xì)菌的性能和姜精油的抗菌活性，具有良好的靶向抗菌活性。同時姜精油以凹凸棒石作為載體，所得復(fù)合物的抗菌穩(wěn)定性明顯增強(qiáng)，其耐熱性、耐候性明顯提高。
　　(4)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物體內(nèi)

5、抗菌活性的研究。成功建立了小鼠體內(nèi)感染大腸桿菌致腹瀉動物模型。通過測定小鼠體重、飲水量、攝食量、腹瀉率、臨床癥狀評分以及小腸病理組織學(xué)觀察，結(jié)果表明，腹瀉動物灌胃凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物后，體重、飲水量和攝食量明顯恢復(fù);腹瀉等臨床癥狀明顯緩解;受損的腸道組織明顯改善。說明該復(fù)合物對大腸桿菌所致腸道感染癥狀具有改善作用;且相對于單一的姜精油和凹凸棒石，復(fù)合物具有改善效果佳、起效時間短的特點。
　　(5)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物抗大腸

6、桿菌感染作用的分子機(jī)理研究。分析小鼠腸道感染大腸桿菌后以及經(jīng)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物干預(yù)后，小腸組織中相關(guān)炎性因子的基因表達(dá)。大腸桿菌感染小鼠小腸組織中炎癥因子Toll樣受體2(TLR-2)、白細(xì)胞介素8(IL-8)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)表達(dá)量明顯上升，該復(fù)合物干預(yù)后上述炎性因子基因表達(dá)量明顯降低;顯示該復(fù)合物可能通過下調(diào)炎癥因子(TLR-2，IL-6，IL-8，TNF-α)的基因表達(dá)，從而抑制大腸桿菌