淇河鯽MSTN基因與相關(guān)形態(tài)學(xué)的研究.pdf

1、肌肉生長抑制素(myostatin，MSTN)是動(dòng)物肌肉發(fā)育和生長過程中的負(fù)調(diào)控因子，可影響?zhàn)B殖動(dòng)物的產(chǎn)肉量，近年來頗受動(dòng)物遺傳育種研究者的重視。淇河鯽(CarassiusauratusinQiheriver)是在長期的生態(tài)適應(yīng)過程中形成的變異地方性種群之一，為河南特色優(yōu)質(zhì)魚類。本實(shí)驗(yàn)以淇河鯽肌肉總RNA為模板，利用RT-PCR和RACE的方法，獲得了淇河鯽肌肉生長抑制素MSTN基因全長cDNA序列;采用實(shí)時(shí)定量PCR分析MSTN基因在

2、淇河鯽肌肉、腦、心臟、肝臟、腎臟、肝臟、腸道和脾臟8個(gè)組織的表達(dá)情況;通過石蠟切片的制作和觀察對(duì)淇河鯽、錦鯉、草魚和鰱魚4種鯉科魚背部肌肉組織進(jìn)行比較分析。
　　1、淇河鯽MSSTN基因cDNA全長的克隆。
　　從淇河鯽背部肌肉中克隆得到的3個(gè)重疊片段，測(cè)序后拼接得到2094bp(NO.KC851952)全長cDNA序列，其中包含了5'端非翻譯區(qū)的86個(gè)核苷酸、3'端非翻譯區(qū)的880個(gè)核苷酸和開放性閱讀框的1128個(gè)核苷酸，

3、共翻譯編碼375個(gè)氨基酸，其中前22個(gè)氨基酸為淇河鯽MSTN的信號(hào)肽。淇河鯽MSTN具有MSTN的共同特征，有蛋白酶水解位點(diǎn)RIRR在C端生物活性區(qū)含9個(gè)保守的半光氨酸殘基。核苷酸和氨基酸同源性分析發(fā)現(xiàn)淇河鯽MSTN與鯉形目的魚類同源性較高，與鱸形目魚類的同源性較低，與哺乳動(dòng)物和鳥類的同源性最低;系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示，不同物種的MSTN序列同源性基本反應(yīng)了它們的親緣關(guān)系。
　　2、淇河鯽MSTN基因組織特異性表達(dá)
　　實(shí)時(shí)定量P

4、CR分析表明，淇河鯽MSTN基因在腦中表達(dá)量最高，在肌肉和肝臟中也有較高表達(dá)，在腸道中表達(dá)量最低。淇河鯽MSTN不僅在肌肉生長發(fā)育有調(diào)控作用，可能還存在其他功能。
　　3、四種鯉科魚背部肌肉組織學(xué)比較
　　四種相同生長環(huán)境和時(shí)期的鯉科魚的形態(tài)指標(biāo)數(shù)據(jù)表明，鰱魚的體重最重，而其他3種鯉科魚體重并無明顯差異;草魚和鰱魚的體長較淇河鯽和錦鯉的長些，而淇河鯽與鯉之間、草魚和鰱之間差異不大;淇河鯽體高最高，這也與淇河鯽“背高體厚”的特