固體基質(zhì)室溫磷光標(biāo)記物的合成及其分析應(yīng)用初探.pdf

1、本論文研究了SiO2納米微球、樹(shù)枝狀大分子、水溶性富勒烯等材料作為固體基質(zhì)室溫磷光標(biāo)記物，并利用固體基質(zhì)室溫磷光分析法對(duì)這三種材料在痕量生命活性物質(zhì)和環(huán)境毒性離子的檢測(cè)及其應(yīng)用前景進(jìn)行了初步的研究。全文共分為四章。 第一章綜述了固體基質(zhì)室溫磷光分析法及其影響因素和研究進(jìn)展。首先，介紹了各種固體基質(zhì)、重原子微擾劑、氧氣和濕度等實(shí)驗(yàn)條件對(duì)固體基質(zhì)室溫磷光分析法靈敏度的影響。其次，提出了提高測(cè)量靈敏度的更為直接有效的措施，即開(kāi)發(fā)新的固

2、體基質(zhì)室溫磷光標(biāo)記物，并對(duì)其研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述。在文獻(xiàn)綜述的基礎(chǔ)上，提出了本論文的研究目的和研究設(shè)想。 第二章開(kāi)展了桑色素二氧化硅單發(fā)光納米微球-鈀磷光探針的合成及表征，探討了與DNA的相互作用及其固體基質(zhì)室溫磷光增強(qiáng)法測(cè)定DNA的研究。以硅酸鈉為前驅(qū)體，摻雜桑色素(Morin)，溶膠-凝膠法合成包含Morin的SiO2納米微球(Morin·SiO2)，并用透射電子顯微鏡對(duì)SiO2·nH2O、Morin·SiO2的粒徑進(jìn)行了表征

3、。以HS-CH2COOH表面修飾Morin·SiO2可使其具有水溶性，基于六次甲基四胺-HCl緩沖液存在下，Pd2+能與Morin·SiO2中的Morin形成絡(luò)合物Pd2+-Morin·SiO2，該絡(luò)合物在聚酰胺膜固體基質(zhì)上可發(fā)射磷光，DNA能使pd2+-Morin·SiO2絡(luò)合物的室溫磷光強(qiáng)度急劇增強(qiáng)，據(jù)此建立了桑色素二氧化硅單發(fā)光納米微球-鈀磷光探針固體基質(zhì)室溫磷光增強(qiáng)法測(cè)定DNA的新方法。DNA的含量在4.0-1000.0fgsp

4、ot-1內(nèi)與△Ip成線性關(guān)系，檢出限為0.61fg/斑，方法的重現(xiàn)性好，常見(jiàn)的陽(yáng)離子(Mg2+、K+、Ca2+)等干擾較小，蛋白質(zhì)、RNA等不干擾，該方法已成功應(yīng)用于花蜜中DNA的測(cè)定。 第三章開(kāi)展了1.5代樹(shù)枝狀分子的合成及其增敏熒光素標(biāo)記凝集素-親和吸附固體基質(zhì)室溫磷光法測(cè)定糖的研究。在外重原子微擾劑Pb(Ac)2存在下，熒光素(HFin)在硝酸纖維素膜上能發(fā)射強(qiáng)而穩(wěn)定的室溫磷光信號(hào)，1.5代聚酰胺型樹(shù)枝狀大分子(1.5-g

5、enerationpolyamidoaminedendrimer，D-1.5)能增敏HFin而發(fā)射更強(qiáng)的室溫磷光，由D-1.5-HFin標(biāo)記的伴刀豆凝集素ConcanavalinA，不僅仍能在硝酸纖維素膜上與N-乙酰氨基葡萄糖(G)發(fā)生定量的特異性親和吸附反應(yīng)，且親和吸附反應(yīng)產(chǎn)物(D-1.5-HFin-ConA-G)能發(fā)射強(qiáng)而穩(wěn)定的室溫磷光信號(hào)，其△Ip與糖的含量成線性關(guān)系。分別用夾心法和直接法對(duì)糖的含量進(jìn)行了測(cè)定，夾心法測(cè)定的線性范圍

6、為0.040-60.00pgspot-1，直接法測(cè)定的線性范圍為0.40-40.00pgspot-1，說(shuō)明夾心法靈敏度更高、線性范圍更寬。本方法靈敏、準(zhǔn)確、精密度好，已成功用于人血漿中糖的測(cè)定和對(duì)人體的疾病監(jiān)測(cè)與預(yù)報(bào)。 第四章開(kāi)展了水溶性多壁碳納米管(MWNTs)的合成及對(duì)硝基苯基熒光酮-多壁碳納米管-Tween-80膠束化合物固體基質(zhì)室溫磷光法測(cè)定痕量鉛的研究。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，用H2SO4、HNO3和H2O2等修飾MWNTs的結(jié)

7、構(gòu)而生成水溶性的多壁碳納米管(MWNTs-A，B)，在離子微擾劑Ag+的作用下，MWNTs-B在濾紙固體基質(zhì)上均可發(fā)射穩(wěn)定的室溫磷光。將Tween-80、對(duì)硝基苯基熒光酮(R)與MWNTs-B作用，獲得R-MWNTs-B-Tween-80膠束化合物雙發(fā)光分子，從而增大MWNTs-B的磷光信號(hào)。在70℃、15min條件下，R-MWNTs-B-Tween-80能在濾紙固體基質(zhì)上分別發(fā)射R、MWNTs-B的室溫磷光，Pb2+均可使R、MWNT