簡(jiǎn)介：西南大學(xué)碩士學(xué)位論文家蠶卵巢細(xì)胞系BMNSWU1的建立及其生物學(xué)特性的研究姓名蔡秀娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師魯成潘敏慧20070501兩南大學(xué)碩學(xué)位論文5經(jīng)考馬斯亮藍(lán)R250染色法顯示，在梭形BMNSWUI細(xì)胞中的微絲束是與細(xì)胞長(zhǎng)軸方向一致的纖維，有時(shí)在兩端彎曲成弧形?？v向的微絲束長(zhǎng)短不一，許多從細(xì)胞一端直達(dá)另一端，微絲束常出現(xiàn)分枝和合并，使得整個(gè)微絲系統(tǒng)連結(jié)成一個(gè)網(wǎng)格。圓形的BMNSWUI細(xì)胞中的微絲束以細(xì)胞核為中心，向細(xì)胞膜方向早輻射狀排列，微絲束也常出現(xiàn)分枝和合并結(jié)成一個(gè)網(wǎng)格。這些微絲束構(gòu)成細(xì)胞形狀的基本輪廓。綜上所述，經(jīng)兩年多的家蠶卵巢組織的原代培養(yǎng)，從不同分化類(lèi)型的繁殖群體中，篩選并建立了一個(gè)新的家蠶卵巢細(xì)胞系BMNSWUI。該細(xì)胞系以多邊形、圓形及短梭形細(xì)胞為主，繁殖力強(qiáng)，二倍率高，對(duì)BMNPV病毒敏感。為細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)的應(yīng)用研究等提供了一個(gè)較好的新細(xì)胞材料。更為家蠶功能基因組研究、外源基因的高效表達(dá)和推動(dòng)家蠶作為模式昆蟲(chóng)的地位提供更好的細(xì)胞研究平臺(tái)。關(guān)鍵詞家蠶卵巢細(xì)胞系生長(zhǎng)曲線(xiàn)病毒敏感性N

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文北京油雞骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎生殖細(xì)胞重要生物學(xué)特性研究姓名陳莉娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師關(guān)偉軍20070601ABSTRACTTOCLARIFYTHEKEYBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFBONE“MARROWMESENCHYMALSTEMCELLANDEMBRYONICGERMCELLFROMBEIJINGFATTYCHICKEN，THESTUDYRESEARCHEDONISOLATION，MULTIPLICATION，IDENTIFICATION，TRAUSFECTIONANDDIFIERENTIATIONOFTWOKINDSOFSLMCELLSTHERESULTSAREASFOFLOWSITHEMSCSGALLBEDERIVEDFROM3060DBEIJINGFATTYCHICKENBONEMARROWBYDENSITYGRADIENTCENTRIFUGESEPARATIONORCELLATTACHMENTTOTISSUECULTUREPLATESMSCSCALLBEEXPANDEDSTABLYINVITROANDSUBCULTUREDTO7THPASSAGEINMORPHOLOGYTHEGOATMSCSAREFUSIFORM，POLYGONAL，ANDROUND8SAMPLES，25FREEZINGTUBESHAVEBEENCRYOPRCSERVEDTHESURVIVALRATEBEFOREANDAFTERCRYOPRESERVATIONWERE98％875％2THECHICKENMSCSHAVEBEENIDENTIFIEDBYTHEFOLLOWINGMETHODMICROBIALDETECTIONINDICATENOBACTERIAFUNGI，VIRUSANDMYCOMPLASMACONTAMINATIONINCELLCULTUREKARYOTYPEANALYSISSHOWEDTHECELLSKEPTDIPLOIDCONDITIONANDTHEHEREDITARYFEATUREISSTABLEPASRESULTEDPOSITIVEAKPNEGATIVEANDCELLULARMARKERSDETECTIONPOSITIVEINCD44CD54，SSEA4ANDNEGATIVEINCD34。CD45，SSEA1EKIT3MSCSWERETRANSFERREDBYLIPOFEETAMINEMEDIATEDPLASMIDEXPRESSINGPEGFPTHEEXPRESSIONOFPEGFPREACHEDOPTIMALSTATEIN48H96H，WITHTHETRANSFECTIONEFFICIENCYABOUT40％，REMAINEDSTRONGEXPRESSIONWITHIN1WEEK4UNDERINDUCTIONOFMEDIUMWITHDEXAMETIMSONE，∞EORBATEPHOSPHATE，PGLYCEROPHOSPHATE，ANDMEDIUMWITHFRESHBONEPARTICLESMSCSDIFFERENTIATEDINTOOSTCOBLAST，WHICHEXPRESSEDHIGHLEVELALKALINEPHOSPHATASEALIZARINREDSTAINPOSITIVEANDTETRACYCLINESTAINPOSITIVE5PRIMORDIALGERMCELLSWEREGOT蚵ISOLATINGEMBRYONICGONADANDSURROUNDINGTISSUEFROMCHICKENEMBRYO55DAYSOFINCUBATIONPGCSWERECOCULTUREDWITHTHEIRGONADALSOMATICCELLSWEREWELLGROWNINPRIMARYCULTUREWHENSUBCULTURE，USINGPRIMARYMICEEMBRYONICFIBROBLASTPMEFASFEEDERCELLS，EGWERESUBCELTUREDTOTHE7THPASSAGETHEPGCSHADAHI曲NUCLEUSTOCYTOPLASMRATIO，PROMINENTNUCLENLI，ANDDENIESWEREUNIFORMLYROUND，MULTILAYEREDANDWELLDELINEATEDINTHERESEARCH，SSAMPLES25FREEZINGTUBESHAVEBEENCRYOPRESERVED6THECHICKENEGHAVEBEENIDENTIFIEDBYTHEFOLLOWINGMETHODMICROBIALDETECTIONINDICATENOBACTERIAFUNGI，VIRUSANDMYCOMPLASMACONTAMINATIONINCELLCULTUREKARYOTYPEANALYSISSHOWEDTHECELLSKEPTDIPLOIDCONDITIONANDTHEHEREDITARYFEATUREISSTABLETHEPUTATIVEEGCELLSCONTINUEDTOBEPASPOSITIVEANDEXPRESSEDALKALINEPHOSPHATUSE，SSEAL，SSEA4，TRAI一60ANDTRAI8I7EGWERETRANSFERREDBYLIPOFACTAMINEMEDIATEDPLASMIDEXPRESSINGPEGFPTHEEXPRESSIONOFPEGFPREACHEDOPTIMALSTATEIN24HWITHTHETRANSFECTIONEFFICIENCYABOUTL84％GUNDERSUSPENSIONCULTUREWITHOUTCYTOKINES，THEPUTATIVEEGCLONICSCOULDBEINDUCEDTOFORMSIMPLEEMBRYOIDBODIESUNDERINDUCTIONOFDEXAMETHASONEAACORBATEPHOSPHATE，AND13一GLYCEROPHOSPHATE，PGCSANDMSCSDIFFERENTIATEDINTOOSTEOBLAST，WHICHCANBESTAINEDBYALIZARINREDKEYWORDBONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLEMBRYONICGERMCELLBIOLOGICALCHARACTERISTICS

簡(jiǎn)介：密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文體細(xì)胞克隆牛生物學(xué)特性的初步研究PRIMARYSTUDYONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFSOMATICCLONEDCATTLE申請(qǐng)人郝海生指導(dǎo)教師朱化彬研究員申請(qǐng)學(xué)位類(lèi)別農(nóng)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)動(dòng)物遺肯育種與繁殖研究方向動(dòng)物繁殖理論與技術(shù)培養(yǎng)單位北京畜牧獸醫(yī)研究所砑煳提交日期2007年5月ABSTRACTTHESTUDYHAVEDISCUSSEDBODYGROWTH，HAEMATOLOGYANDSERUMBIOCHEMISTRYREPRODUCTIONCAPABILITYABOUTCLONESMAINCONTENTFOILOWEXPERIMENTLTHESTUDYHAVEOBERSERVEDBODYGROWTHOFCLONESFROMBIRTHTO15MONTHAGETHERESULTSHOWEDTHATPARAMETERSOFWEIGLLTANDBODYSIZEARESIMILARBETWEENCLONESANDCONTROLSP005EXPERIMENT2THESTUDYHAVEMEASUREDREPRODUCTIONCAPABILITYOFCLONESTHERESULTSHOWEDTHATPUBERTYOFCLONESSIGNIFICIANTLYLONGERTHANTHATOFCONTROLP005BETWEENTWOGROUPSCLONESWERESUPEROVULATEDBYUSINGFSHFOR3TIMESIGNIFICIANTLYPO05ABOVERESULTSINDICATED，GROWTHANDDEVELOPMENTOFCLONESISNORMALFROMBIRTHTOL5MONTHAGEPUBERTYANDESTROUSCYCLEOFCLONESARENORMALCLONESCANBESUPEROVULATEDASDONORBYUSINGFSH，ANDPREGNANCYRATEOFEMBRYOTRANSFERISNORMALHAEMATOLOGYANDSERUMBIOCHEMISTRYPARAMETERSOFCLONESARCNORMALKEYWORDCLONEDEARLE，WEIGHANDBODYSIZEBLOOD，REPRODUCTIONCAPABILITY

簡(jiǎn)介：CONSTRUCTIONOFSRTAGENEDELETIONMUTANTSTRAINSOFLISTERIAMONOCYTOGENESANDRESEARCHONSOMEBIOLOGICALCHARACTERISTICSADISSERTATIONSUBMITTEDTOSHIHEZIUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRICULTUREBYWUXUELINGPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEDISSERTATIONSUPERVISORPROFMAXUNJUNE,2015

簡(jiǎn)介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文冰草生態(tài)生物學(xué)及細(xì)胞學(xué)初步研究姓名高海娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)草業(yè)科學(xué)指導(dǎo)教師云錦鳳20070501PRIMARYSTUDIESONECOBIOLOGYANDCYTOLOGYOFAGROPYRONCRISTATUMBSTRACT11LESTUDIESONBOTANICAL，EC0BIOLOGICAL，CYTOLOGICALCHARACTERISTICSANDPRODUCEPERFORMANCEOFAGROPYRONCRISTATUMWERECARRIEDOUTON“EXPERIMENTALDEMONSTRATIONBASEFORINDUSTRIALIZINGPRODUCTIONTECHNIQUEOFAGROPYRONCRISTATUM”DURINGTHEYEARSFROM2002TO2004INTHEWESTSUNITEBANNEROFXILINGOL，INNERMONGOLIA．ITPROVIDESBASICDATAANDTECHNICALSUPPORTFORCULTIVATIONANDMANAGEMENTANDSEEDPROPAGATIONOFAGROPYRONCRISTATUMINARIDREON．N璩RESULTSSHOWEDASFOLLOWS1AGROPYRONCRISTATUMISCROSSPOLLINATEDFORAGE．THEREWEREGREATDIFFERENCEAMONGPLANTSWITHINPOPULATIONS．ITHASABOUNDGENETICDIVERSITYINECOTYPEANDLIFCFORMOFROOTSYSTEM,HAIRCHARACTERSOFSEEDLEMMAANDLEAFEPIDERMIS．2ITHASGREATDIFFERENCEINPHENOLOGICALPERIOD,TILLERINGABILITYANDGRASSANDSEEDYIOLDOFAGROPYRONCRISTATUMATDIFFERENTYEARS．THEGROWTHANDDEVELOPMENTAREINFLUENCINGFACTORSONTHEDIFLORENCE．MOISTUREISLIMITINGFACTORONNORMALGROWTHANDDEVELOPMENTANDGRASSANDSEEDYIELD．NLEDRYGRASSYIELDSOF2003ALE4878．30KG／LLIN2ANDSEEDYIELDSOF2003ARE710．07KG／BM2，THEYAREHIGHEST；ITHASWEAKTILLERINGABILITYANDLOWGLASSANDSEEDYIELDIN2002WHICHISTHESECONDYEARGROWING．ITHASLOWGRASSANDSEEDYIELDFORLATEPHENOLOGIEALPERIODANDRETURNINGGREENSTAGEIN2004WHICHISDROUGHTYEAR．3111EROOTS，STEMSANDLEAVESOFAGROPYRONCRISTATUMFORMSPECIALMORPHOLOGYANDSTRUCTURETOADAPTEXTERNALENVIRONMENT．INCROSSSECTIONEDROOTFORM2MIDDLEBANKLAYERNEXTINTERNALBARKLAYERESPECIALSTRUCTUREOFREGULARLYARRAY；EPIDERMISCELLOFSTEMSANDLEAVESHAVEDEVELOPEDTHICKENEDEPIDERM,LEAVESEPIDERMISCOVERSHAIR9ITFORMEDDEVELOPEDVASCULARBUNDLES．4CHROMOSOMESOFAGROPYRONCRISTATUMISTETRAPLOID．ITSKARYOTYPEFORMULAIS2N2822M6SM．NLEKARYOTYPEBELONGTOSTEBBINSLATYPE．KEYWORDSDROUGHTREGION，AGROPYRONCRISTATUM；ECOBIOLOGY，CYTOLOGICALDIROOTEDBYYUNJINFENGDPLICANTFORMASTERDEGREEGAOBAIJUANGRASSLANDSTATURECOLLEGEOFECOLOGYANDENVTRONMENTALOFLNNERMONGOLIAA鰣CULTURALUMVCRSITY，HUHHOT010018，CHIHA

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠大鼠雌性雌性生殖干細(xì)胞建生殖干細(xì)胞建系、生物學(xué)特性研究與生物學(xué)特性研究與應(yīng)用應(yīng)用作者姓名周勵(lì)學(xué)院BIOX研究院專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)班級(jí)A0908092學(xué)號(hào)0090809002研究方向細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師吳際教授二零一三年十一

簡(jiǎn)介：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬流行性腹瀉病毒細(xì)胞感染受體的生物學(xué)特性鑒定姓名李寶賢申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師李一經(jīng)20070620THESTUDYONTHECELLULARRECEPTORFORPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSABSTRACTPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSPEDVEAASALETHALDIARRHEAINPIGLETSTHATLEADSTOGREATECONOMICL稍S囂INEASTASIA．ITWASREPORTEDTHAT帥INOP叩TIDA辨NAPNISTHERECEPTORFORTRANSMISSIBLEGASTROENTCRITISVIRUSTGEV，HUMANCORONAVIMS229EHCOV229EANDFELINECORONAVIRUSFECOVWHICHALLBELONGTOGROUPICORONAVIRUSINCLUDING∞WELLASPEDMITWASALSOCONFIRMEDPREVIOUSLYTHATPORCINEAMINOPCPTIDASENPAPNCANBINDTOPEDV,ANDANTIPAPNANTIBODIESMAYINHIBITTHECOMBINATION．TOINVESTIGATEWHETHERPAPNISARECEPTORFORPEDV．WEWANSFEETEDMDCKCELLSWITHPORCINEAMINOLXPTIDASEOAPNEDNAANDTHISENABLEDNONSUSCEPTIBLECELLSTOSUPPORTPEDVREPLICATIONANDSERIALVIRALPROPAGATION．MOREOVER,THEINFECTIONWASBLOCKEDBYANTIBODIESAGAINSTPAPN，IMPLIESTHECRITICALROLEOFPAPNDURINGVIRUSENTRY．INADDITION,IMMUNOFLUORESCCNCEASSAYSFORDETECTIONOFPAINANDPEDVANTIGENS，TOGETHERWITHNEUTRALIZATIONASSAYSUSINGANTIBODIESAGAINSTPAPN，F(xiàn)URTHERCONFIRMEDTHECORRELATIONBETWEENPAPNEXPRESSIONANDVIRALMPLIEATIONINPAPNTRANSFEETEDMDCKCELLS．THESERESULTSINDICATETHATPAPNISAF_IINETIONALRECEPTORFORPEDV．KEYWORDSRECEPTOR,PORCINEAMINOPEPTIDASE；PORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUS；COROANVIRTBCANDIDATELIBANXIANSPECIALITYPREVENTIVEVETERINARYMEDICINESUPERVMORPROF．LIYIJING

簡(jiǎn)介：弋7．14,5267分類(lèi)咎UDC四門(mén)L農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文密級(jí)學(xué)號(hào)豎至QQ堡QQ魚(yú)玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育的分子生物學(xué)研究許珂指導(dǎo)教師姓名榮廷昭哲怒菊院士四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教授四川農(nóng)業(yè)大學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別盟±’P業(yè)名稱(chēng)縫塑塑絲離拙論文提交日期2鯉2笙12目論文答辯日期2QQ2生12目學(xué)位授予單位和日期四刪叁羔￡叁堂．生旦旦答辯委員會(huì)主席評(píng)閱夕。2007年12月PQ川農(nóng)業(yè)人學(xué)博I論義下米C型細(xì)胞質(zhì)雄件小育的分了生物學(xué)研究對(duì)玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系C482及其保持系N482苗期葉片線(xiàn)粒體蛋白質(zhì)、單核期和雙核期花藥線(xiàn)粒體蛋白質(zhì)進(jìn)行了分離，經(jīng)過(guò)考馬斯亮藍(lán)染色，得到了重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。PDQUEST軟件分別在苗期、單核期和雙核期的雙向電泳圖譜上可識(shí)別約280、260、220個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，將其中23個(gè)重復(fù)性比較好且差異表達(dá)在兩倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)采用基質(zhì)輔助激光解析分離飛行時(shí)間質(zhì)譜進(jìn)行了肽指紋圖譜分析，然后用MASCOT軟件對(duì)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，其中7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)得到了鑒定。這7個(gè)蛋白質(zhì)分別是FI．ATP合成酶、ATP合成酶、磷脂酰肌醇．3激酶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶、谷氨酸脫氫酶和電壓依賴(lài)陰離子通道蛋白2個(gè)點(diǎn)。它們分別參與ATP的合成、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、新生肽段的折疊、氮代謝和線(xiàn)粒體外膜的通透性等?？傊?，本文利用AFLP和雙向電泳技術(shù)分別對(duì)玉米線(xiàn)粒體DNA和線(xiàn)粒體蛋白質(zhì)進(jìn)行了分析，為闡明玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞玉米；細(xì)胞質(zhì)雄性不育；線(xiàn)粒體DNA；AFLP；線(xiàn)粒體蛋白質(zhì)雙向電泳

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)S8148單位代碼10364密級(jí)公開(kāi)學(xué)號(hào)11720673安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細(xì)胞豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的獲取及獲取及生物學(xué)特性生物學(xué)特性GENERATIONACTERIZATIONOFPCINEPARTIALLYREPROGRAMMEDINDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLS研究生魏超指導(dǎo)教師張運(yùn)海教授合作指導(dǎo)教師章孝榮教授申請(qǐng)學(xué)位門(mén)類(lèi)級(jí)別農(nóng)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向動(dòng)物胚胎工程所在學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院答辯委員會(huì)主席二零一四年六月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡(jiǎn)介：摘要重組牛、豬和雞P干擾素在CHO細(xì)胞中的高效穩(wěn)定表達(dá)及其生物學(xué)活性研究摘要I型干擾素對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物病毒感染的免疫防治腫瘤疾病治療等相關(guān)基礎(chǔ)研究具重要意義，并有著廣闊的應(yīng)用前景基因工程重組干擾素技術(shù)具有巨大的優(yōu)越性，但目前廣泛采用的人類(lèi)和動(dòng)物I型干擾素重組表達(dá)生產(chǎn)系統(tǒng)不僅純化，復(fù)性工藝復(fù)雜，而且其表達(dá)產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)，生物學(xué)活性與真正天然干擾素相比存在明顯差距同時(shí)，現(xiàn)有I型干擾素的生物學(xué)活性鑒定與定量分析方法也存在費(fèi)時(shí)，繁瑣，不夠精確，特異性差等一系列缺陷，亟待改進(jìn)創(chuàng)新針對(duì)目前畜禽I型干擾素基礎(chǔ)研究和生產(chǎn)應(yīng)用中存在的問(wèn)題，本研究建立了便捷、敏感準(zhǔn)確特異的干擾素生物學(xué)活性定量分析方法，并構(gòu)建了一系列基因工程哺乳動(dòng)物細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了具有天然活性的牛、豬和雞B干擾素在CHO細(xì)胞中的高效、穩(wěn)定表迭，并對(duì)它們的生物學(xué)活性進(jìn)行了研究，為畜禽I型干擾素的基礎(chǔ)研究和生產(chǎn)應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)試驗(yàn)I基于重組VSVGFP病毒的干擾素抗病毒活性定量分析方法的建立使用表達(dá)綠色熒光蛋白GFP的重組水皰性口炎病毒VSVGFP于MDBK細(xì)胞上進(jìn)行干擾素抗病毒活性滴定A、，A此方法在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行操作，通過(guò)GFP檢測(cè)定量半數(shù)病毒復(fù)制抑制來(lái)替代通過(guò)細(xì)胞染色定量半數(shù)CPE抑制檢測(cè)GFP時(shí)，直接加50止裂解液至VSVGFP感染的MDBK細(xì)胞上清100止裂解細(xì)胞釋放GFP，同時(shí)病毒被滅活，然后使用儀器檢測(cè)GFP的相對(duì)熒光值RFU來(lái)定量GFP蛋白的相對(duì)含量這與細(xì)胞染色方法定量半敷CPE相比，步驟得到極大簡(jiǎn)化酚紅對(duì)GFP的檢測(cè)有影響，于無(wú)酚紅培養(yǎng)液中的檢測(cè)結(jié)果更敏感、更準(zhǔn)確，但GFP無(wú)論在舍酚紅還是無(wú)酚紅培養(yǎng)液中，其濃度和檢測(cè)的RFU值都呈良好的線(xiàn)性相關(guān)使用干擾素標(biāo)準(zhǔn)品，病毒復(fù)制時(shí)問(wèn)對(duì)最終抗病毒活性計(jì)算值幾乎沒(méi)有影響此方法具有良好的重復(fù)性使用標(biāo)準(zhǔn)品，批次內(nèi)和批次間檢測(cè)的變異系數(shù)分別為121％和138％，且檢測(cè)結(jié)果和基于細(xì)胞染色方法的檢測(cè)結(jié)果基本吻合此外，細(xì)胞形成匯合單層有利于提高最終GFP表達(dá)量。從而提高檢測(cè)的敏感性和準(zhǔn)確|生；GFP于濕盒中4℃保存可穩(wěn)定保存至少1周而不影響檢測(cè)結(jié)果試驗(yàn)Ⅱ基于MX啟動(dòng)子和螢光素酶報(bào)告基因定量檢測(cè)雞I型干擾素生物學(xué)活性的研究克隆了雞MX啟動(dòng)子MXP，并在其下游連接螢光素酶1UCIFERASE，1UC報(bào)摘要重組POIFNB的CHO細(xì)胞克隆CHOPOIFNB，可在無(wú)G418壓力篩選下穩(wěn)定表達(dá)至少20代在25CM2的細(xì)胞瓶5ML培養(yǎng)液中，重組POIFNB的累積表達(dá)水平達(dá)到7710’AUML～，每天的表達(dá)量可達(dá)4，6105AUML4或046AU／個(gè)細(xì)胞表達(dá)的重組POIFNB可以誘導(dǎo)PKL5細(xì)胞表達(dá)豬MX蛋白，并且能夠激活雞H僅啟動(dòng)子控制的螢光素酶報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，證實(shí)其具有天然豬I型干擾素的生物學(xué)活勝此外，其可以完全保護(hù)PKL5細(xì)胞抵抗LOOOTCIDSO的豬傳染性胃腸炎病毒TGEV和偽狂犬病毒PRV的感染，顯示了良好的臨床應(yīng)用前景試驗(yàn)V1I重組雞D干擾素在CHO細(xì)胞中的高效穩(wěn)定表達(dá)及其生物學(xué)活性研究把雞B干擾素CHIFNB的ORF基因亞克隆至真核穩(wěn)定表達(dá)栽體PCINEOCHIFN6在高效啟動(dòng)子CMV控制下表達(dá)，并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至CHOKL細(xì)胞，篩選出可穩(wěn)定表達(dá)重組CHIFNB的CHO細(xì)胞克隆CHOCⅫFND，可在無(wú)G418壓力篩選下穩(wěn)定表達(dá)至少20代在25CM2的細(xì)胞瓶5ML培養(yǎng)液中，重組CHIFNB的累積表達(dá)水平達(dá)到69104AUML1，每天的表達(dá)量可迭43104AUML|L或O043AU／個(gè)細(xì)胞表達(dá)的重組CHIFNB可以誘導(dǎo)原代雞胚成纖維細(xì)胞CEFS表達(dá)雞MX蛋白，并且能夠激活雞H僅啟動(dòng)子控制的螢光素酶報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)此外，其還可以完全保護(hù)CEFS細(xì)胞抵抗1000TCID50的禽流感病毒H5NL亞型強(qiáng)毒株的感染本研究構(gòu)建了能夠?qū)型干擾素效應(yīng)產(chǎn)生螢熒光素報(bào)告基因特異應(yīng)答反應(yīng)的MDBK工程細(xì)胞系，并建立了快捷敏感，準(zhǔn)確、特異的I型干擾素生物學(xué)活性新型定量檢測(cè)系統(tǒng)此外，本研究建立的基于CHO工程細(xì)胞的I型干擾素生產(chǎn)系統(tǒng)具有一系列突出優(yōu)點(diǎn)首先，CHO很久以前即被批準(zhǔn)用于人類(lèi)和動(dòng)物臨床應(yīng)用疫苗及細(xì)胞生物制品的制備，其安全性已經(jīng)得到充分證明其次，作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，其產(chǎn)物IFND為最接近天然干擾素；同桿狀病毒感染昆蟲(chóng)細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)水平相似，但完全避免了后者糖基化修飾等翻譯后加工方式的差異，這對(duì)其體內(nèi)生物學(xué)活性及與結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的保持降低抗原反應(yīng)性具有關(guān)鍵意義，并且生產(chǎn)、純化工藝大大簡(jiǎn)化，簡(jiǎn)單處理甚至不經(jīng)處理即可用于動(dòng)物L(fēng)占床同病毒刺激組織原代淋巴細(xì)胞生產(chǎn)系統(tǒng)相比，干擾素的表達(dá)水平大幅度提高，在產(chǎn)物純度，生物安全性及經(jīng)濟(jì)成本方面更是后者無(wú)法比擬的本研究結(jié)果為深入系統(tǒng)開(kāi)展病原一宿主之問(wèn)感染與抗感染天然免疫機(jī)制研究及I型干擾素的生產(chǎn)應(yīng)用研究提供了良好的技術(shù)平臺(tái)和研究基礎(chǔ)關(guān)鍵詞牛；豬；雞；I型干擾素；桿狀病毒；CHO細(xì)胞；表達(dá)；H僅生物學(xué)活性III

簡(jiǎn)介：中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院博士學(xué)位論文楊樹(shù)與潰瘍病菌（BOTRYOSPHAERIADOTHIDEA）互作中的細(xì)胞生物學(xué)、活性氧代謝及細(xì)胞過(guò)敏性反應(yīng)姓名王媛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)森林保護(hù)學(xué)指導(dǎo)教師張星耀梁軍20070701繼續(xù)進(jìn)行干旱脅迫，研究了干旱與潰瘍病菌共同作用下，楊樹(shù)干部潰瘍病害發(fā)生及與樹(shù)皮超微結(jié)構(gòu)變化之間的關(guān)系特征。結(jié)果顯示1隨著干旱脅迫程度的增加，2種楊樹(shù)潰瘍病害發(fā)生漸趨嚴(yán)重；2干旱脅迫下，楊樹(shù)樹(shù)皮組織細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離，并隨脅追程度的增加而嚴(yán)重；3干旱脅迫下接種病原菌，2種楊樹(shù)細(xì)胞發(fā)生不同程度的損傷，主要表現(xiàn)為細(xì)胞器發(fā)生較大變化，如出現(xiàn)葉綠體腫脹變形、線(xiàn)粒體數(shù)量增多，質(zhì)膜模糊不清等現(xiàn)象；隨接種時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞器受到進(jìn)一步損傷，葉綠體被膜折皺，嚴(yán)重時(shí)局部破裂，基質(zhì)外滲，并部分最終解體；4毛白楊中的菌絲主要在細(xì)胞間隙中穿行，而北京楊的菌絲除在細(xì)胞間隙中生長(zhǎng)之外，侵入細(xì)胞內(nèi)部也較多，直接導(dǎo)致細(xì)胞的解體；5干旱脅迫下細(xì)胞的損傷促進(jìn)了病原菌的侵染，干旱和病原菌的雙重脅迫加劇了病害的發(fā)生程度，并且病原菌侵染對(duì)細(xì)胞的破壞程度大于水分脅迫。干旱和潰瘍病菌共同作用對(duì)于寄主有促進(jìn)病害發(fā)生和加重病情的作用。3．對(duì)過(guò)氧化物酶的細(xì)胞定位研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論抗病楊樹(shù)還是感病楊樹(shù)，接種后均發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中有過(guò)氧化物酶反應(yīng)產(chǎn)物，通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，毛白楊過(guò)氧化物酶的活性不僅明顯高于未接種的對(duì)照，也明顯高于接種處理后的北京楊，并且定位更廣泛，在細(xì)胞壁、細(xì)胞間隙、葉綠體膜、線(xiàn)粒體膜及液泡膜上均有大量定位，而北京楊酶反應(yīng)產(chǎn)物主要分布于細(xì)胞壁上，在細(xì)胞膜、核膜局部有少量定位，定位范圍及強(qiáng)度均小于毛白楊。毛白楊過(guò)氧化物酶產(chǎn)生早，積累量大，北京楊過(guò)氧化物酶的積累量明顯低于毛白楊。4．測(cè)定了接種潰瘍病菌BOTRYOSPHAERIADOTHIDEA后2種楊樹(shù)POPULUSSPP．樹(shù)皮中O。．2、H202、超氧化物歧化酶SOD、過(guò)氧化物酶POD、過(guò)氧化氫酶CAT、抗壞血酸過(guò)氧化物酶APX及膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛MDA含量的動(dòng)態(tài)變化，分析了楊樹(shù)與潰瘍病菌互作中活性氧REACTIVEOXYGENSPECIES，ROS的產(chǎn)生、抗氧化酶活性及膜脂過(guò)氧化水平的變化規(guī)律及與楊樹(shù)抗病性的關(guān)系。結(jié)果顯示，隨接種時(shí)間的延長(zhǎng)，2種楊樹(shù)O。2產(chǎn)生速率和H202含量均有上升趨勢(shì)，毛白楊出現(xiàn)了較明顯的“氧化爆發(fā)”，北京楊則不明顯；POD活性持續(xù)上升，毛白楊上升幅度大于北京楊；SOD、CAT活性先上升后下降，北京楊2種酶活性在后期受到的抑制更明顯；APX活性則在2種楊樹(shù)中變化較大，毛白楊明顯比北京楊變幅大；MDA含量增加，表明“氧化爆發(fā)”啟動(dòng)了膜脂過(guò)氧化，北京楊在后期MDA含量大幅上升，并且MDA含量與O2產(chǎn)生速率呈顯著正相關(guān)。5．對(duì)潰瘍病菌侵染后不同時(shí)間的楊樹(shù)愈傷組織進(jìn)行DAPI特異性染色，在熒光顯微鏡下觀(guān)察，發(fā)現(xiàn)接菌后24H，毛白楊部分細(xì)胞核表現(xiàn)染色質(zhì)的不均一，核質(zhì)濃縮并“趨邊化”，呈棒形或彎月形，但大多數(shù)細(xì)胞核仍為近圓形；接菌48H后，大多數(shù)細(xì)胞核形狀Ⅱ

簡(jiǎn)介：南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文兩優(yōu)培九劍葉葉綠體衰退進(jìn)程中的細(xì)胞生物學(xué)特性初探姓名雷華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)植物學(xué)植物生理生化指導(dǎo)教師陳國(guó)祥20080401摘要均可以觀(guān)察到葉綠體中淀粉粒的存在，葉綠體衰退早期淀粉粒的數(shù)目少，且個(gè)體較小，到葉綠體衰退中后期淀粉粒數(shù)目增多，體積變大，導(dǎo)致淀粉粒擴(kuò)展，基粒類(lèi)囊體膜散亂。本部分觀(guān)察結(jié)果表明，兩優(yōu)培九在光合能力上有一定的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢(shì)；可能是其高產(chǎn)的生理原因之一。一方面，它細(xì)胞內(nèi)葉綠體數(shù)目較多，基粒緊密，片層數(shù)目多；另一方面，其細(xì)胞核結(jié)構(gòu)在整個(gè)劍葉衰老過(guò)程中都相對(duì)完整，核出現(xiàn)衰老特征變化比較晚，意味著兩優(yōu)培九可以有較長(zhǎng)的光合同化時(shí)間。關(guān)鍵詞兩優(yōu)培九；衰老葉綠體；抗氧化系統(tǒng)；超微結(jié)構(gòu)Ⅱ

簡(jiǎn)介：CONSTRUCTIONPARTIALBIOLOGICALACTERISTICSOFNCRNARLI60DELETIONSTRAINOFLISTERIAMONOCYTOGENESADISSERTATIONSUBMITTEDTOSHIHEZIUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFMASTEROFAGRICULTUREBYPENGYELONGPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEDISSERTATIONSUPERVISPROFQIAOJUNJUNE2015

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文豆科山羊豆屬牧草的細(xì)胞生物學(xué)特性研究姓名張新宇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師高洪文劉大林20080601II一揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文方山羊豆的大小為赤道軸極軸143135～15O126121～137岬，山羊豆的大小為赤道軸極軸137123～148124106～130岬?；ǚ勰讣?xì)胞減數(shù)分裂為同時(shí)型胞質(zhì)分裂，終變期染色體構(gòu)型為8Ⅱ，沒(méi)有出現(xiàn)落后染色體及微核現(xiàn)象。小孢子四分體為四面體型。減數(shù)分裂過(guò)程有一定規(guī)律，與花蕾大小，顏色有密切關(guān)系。減數(shù)分裂進(jìn)程存在一定差異，同一個(gè)花蕾中的不同花藥花粉母細(xì)胞分裂速度基本相同，所處的時(shí)期及觀(guān)察的分裂相一致，在同一個(gè)花藥中的不同花粉母細(xì)胞中，可見(jiàn)各種不同時(shí)期的細(xì)胞。關(guān)鍵詞山羊豆屬；核型；帶型；花粉母細(xì)胞；減數(shù)分裂；花粉形態(tài)；孢粉學(xué)

簡(jiǎn)介：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文貓泛白細(xì)胞減少癥病毒XJ株的分離及生物學(xué)特性研究姓名蘇潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)動(dòng)物醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師曲連東20080620ABSTRACTRESEARCHONTHEISOLATIONANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFFELINEPANLEUKOPENIAVIRUSXJSTRAINABSTRACTINTHISSTUDYTHEVIRUSINTHEFECESSPECIMENSFROMTHEINTESTINEOFTHECATINXINJIANGPROVINCEWERECOLLECTEDANDPROLIFERATEDONCRFKTHETITEROFTISSUECULTUREINFECTIVEDOSETCIDSOOFTHETHIRDGENERATIONCELLCULTURESWAS10421THETYPICALAPPEARANCEOFPARVOVIMSWITHTHEREALANDAIRCOREDPARTICLESWASOBERSEVEDUNDERELECTRONMICROSCOPETHEDISTINCTIVEFLUORESCENCEWASFOUNDAFTERTHECULTURINGMEDIUMWASRECOGNIZEDBYTHEMCABMONOCLONALANTIBODYOFFPLVTHECATSOFTWOMONTHSOLDWEREINFECTEDANDDIEDINTHESEVENTHDAYAFTERINOCULATEDTHECULTURINGMEDIUMTHEINOCULATEDCATSAPPEAREDTHESPECIFICPATHOLOGICALSYMPTOMSOFINFECTIONBYFPLL譏THEVP2GENEOFTHEVIRUSWASAMPLIFYIEDBYPCRANDWASCONSISTENTWITHFPLVTHEISOLATEDVIRUSWASNAMEDFPLVXJUNDERTHECONDITIONOF4℃，THECULTURINGMEDIUMCANAGGLUTINATETHEREDBLOODOFPIGSANDTHEAGGLUTINATIONWASINHIBITIEDBYTHEFPLVMCABTHETITEROFHEMAGGLUTINATIONOFFPLVXJWAS512WHILE，THECULTURINGMEDIUMCANNOTAGGLUTINATETHEREDBLOODOFRABBITS，CHOOKS，DOGSANDKUNMINGMICETHEFPLVXJPROLIFERATEDINTHEMDCK，BUTNOTINHEMVERO，DF1ANDPK一15THECULTIVATIONCHARACTERISTICOFTHEVIRUSPROLIFERATEDINTHECRFKOBERSEVEDBYIFA24HOURSINTERVALWASTHATTHEVIRUSWASRELEASEDFROMCRFKINTHE6THDAYAFTERQUICKLYMULTIPLICATIEDFOR5DAYSBYSYNCHRONALINOCULATIONTHEPCRPRODUCTSOFVP2ANDNS1GENEWEREAMPLIFYIEDANDSEQUENCEDTHERESULTSHOWSTHATTHEFULLLENGTHVP2GENECONTAINED1755BPWHICHENCODES584AMINOACIDSTHENUCLEOTIDEIDENTITYOFVP2GENESBETWEENTHEFPLVXJSTRAINAND4CPVSTRAINSAND5STRAINSFPLVINTHEGENBANKWASMORETHAN99％BYTHESEQUENCINGANALYSISCORRESPONDINGLY，THEAMINOACIDIDENTITYWAS985％～997％VP2GENEOFTHEFPLVXJSTRAINSDIDIN’TCHANGEREMARKABLYFORNS1GENE，ITCONTAINED2007BPWHICHENCODES668AMINOACIDSHOMOLOGIESOFNUCLEOTIDEANDAMINOACIDSSEQUENCESOFTHENS1GENEBETWEENFPLVXJAND5CPVSTRAINSAND6FPLVSTRAINSWAS987％一993％AND985％993％PHYLOGENETICANALYSISOFNSIGENESHOWTHATTHERELATIONBETWEENTHEFPLVXJSTRAINANDCPVBWASCLOSERTHERESULBIII