簡介：華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文樹突狀細胞分泌的EXOSOMES的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用的初步研究姓名任亞娜申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師高峰范華驊20070501華東師范大學(xué)2007屆碩士論文樹突狀細胞分泌的EXOSOMES的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用的初步研究院系生僉拄堂堂睦專業(yè)壘塹絲堂盞金量生塹堂方向僉至魚疰堂研究生堡堊縫指導(dǎo)老師壺堅盈壅屋堇坐壁煎窒基摘要樹突狀細胞DCS分泌的CXOSOMES是來源于內(nèi)吞途徑的小囊泡，表達MHCI、Ⅱ類分子和共刺激分子等，能夠活化T細胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答，在抗腫瘤免疫治療中有著誘人的前景。為了建立DCS分泌的EXOSOMESDEX的制各方法，分析其生物學(xué)特性和在抗腫瘤免疫中的功能，本研究從正常人外周血單個核細胞中誘導(dǎo)未成熟DCSIMDC并使其負載K562腫瘤細胞的抗原，然后用脂多糖1IPOPOLYSACCHARIDE，IJPS誘導(dǎo)DCS成熟MDCS，通過多次超速離心結(jié)合膜超濾的方法提取IMDCS和MDCS分泌的EXOOME酷。檢測CXOSOMCS的粒徑并通過電子顯微鏡分析CXOSOMCS的形態(tài)，WESTERNBLOT法檢測EXOSOMES的表面分子。比較MDCS和IMDCS分泌的CXOSOLLLES引起的針對飚62抗原特異性T細胞的增殖、CD69的上調(diào)、細胞因子刀FN。Y的分泌及對腫瘤細胞殺傷能力。實驗結(jié)果顯示，制各的EXOSOMES為碟狀小囊泡，平均粒徑為723RIM，表達CD80、CD86、HIADR、FASL、CD54和MFGE8MILKFATGLOBULEEPIDERMALGROWTHFACTORFACTORVIⅡ。與IMDCS相比，MDCS分泌的EXOSOMES的CD80表達較高而MFGE8的表達較低，并且在體外MDCS分泌的EXOSOMES能夠更顯著地引起特異性T細胞的增殖和免疫應(yīng)答。體外在MDC存在的情況下，20PG／MLINDEX可有效活化T細胞，T細胞增殖后2

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文ABCG2在肺癌中的表達及其對肺癌細胞生物學(xué)行為的影響姓名牛海艷申請學(xué)位級別博士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師申洪20080415中文摘要胞。目前認為ABCG2就是SP細胞的表型標志，是潛在的干細胞標志物。因此，ABCG2既是一個新的耐藥基因，又和SP細胞、腫瘤干細胞密切相關(guān)，研究其在肺癌中的表達，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，揭示其對肺癌細胞基本生物學(xué)特性的影響，有助于深入研究ABCG2與肺癌的關(guān)系，可能會為肺癌的發(fā)生和防治提供新策略。方法1．ABCG2在肺癌中表達的定量研究1應(yīng)用免疫組化SP法觀察了86例肺癌鱗癌42例、腺癌31例、大細胞癌5例，小細胞癌8例，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者33例和24例癌周肺組織距腫物5CMABCG2蛋白的表達2應(yīng)用原位雜交觀察了86例肺癌組織中鱗癌42例、腺癌31例、大細胞癌5例，小細胞癌8例ABCG2MRNA的表達3應(yīng)用顯微圖像定量分析，測試靶細胞ABCG2蛋白及MRNA表達的陽性單位PU值。2．ABCG2基因沉默對肺癌細胞體外生物學(xué)特性的影響I在倒置顯微鏡下觀察肺腺癌細胞GLC．82和A549的形態(tài)學(xué)特點；應(yīng)用HE細胞爬片和組織切片比較二者形態(tài)異同；應(yīng)用免疫細胞化學(xué)、細胞原位雜交、RT熒光定量PCR、WESTERNBLOT和HOECHST33342染色比較GLC．82和A549中ABCG2基因表達程度。2應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染方法，將含有不同片段的4個干擾質(zhì)粒、一個陽性對照質(zhì)粒和一個陰性對照質(zhì)粒，通過脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)入GLC．82，用G418反復(fù)篩選純化克隆。用RTPCR法鑒定陽性對照中GAPDH的干擾效率，再用RT熒光定量PCRRTQPCR法鑒定各干擾各隆的干擾效率，并通過免疫細胞化學(xué)和WESTEMBLOT驗證。3應(yīng)用MTR法測OD值并繪制細胞生長曲線，流式細胞術(shù)檢測細胞周期分布，克隆形成實驗檢測單細胞克隆形成率，比較干擾前后細胞生長增殖能力Ⅱ

簡介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)基因馬鈴薯表達體系中人白細胞介素12的純化及生物學(xué)活性的鑒定姓名黃進申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師葛正龍20080501遵義醫(yī)學(xué)院顧I學(xué)位論文轉(zhuǎn)皋L大I馬鈴薯表達休系中人山細胞介索一12的純化及生物學(xué)活代的糝定遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。學(xué)位論文中除了特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻均已在學(xué)位論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名簽字日期年月日遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解遵義醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即遵義醫(yī)學(xué)院有權(quán)保留并向有關(guān)部門或機構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)遵義醫(yī)學(xué)院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存學(xué)位論文，即遵義醫(yī)學(xué)院具有學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)，信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名簽字日期年月日導(dǎo)師簽名簽字日期年月日

簡介：西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文STAT3基因轉(zhuǎn)染牛乳腺上皮細胞及轉(zhuǎn)染后細胞的生物學(xué)特性觀察姓名劉甲申請學(xué)位級別碩士專業(yè)發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師張涌20080501THEB10LOGICALCHARACTERISTICSOFBOVN呵EMAMMARYEPITHELIALCELLSTRANSFECTEDWITHSTAT3GENEABSTRACTSTATSARELATENTTRANSCRIPTIONFACTORS也ATMEDIATECUT拋NE鋤DGROWTHFACTORDIRETED仃蜀11LS謝PTIONKMANYHMNALLCANCERS吼D仃觚SFOMED∞LLLINES，STAT3ISPERSISTENTLYACTICATED，ANDINCENCULTⅧC，ACTIVESTAT3ISEITHERREQUIRED南R仃ANSFOMATION，E11HANCES仃孤SF0MATION，ORBLOCKSAPOPTOSISSTAT3GELLESWERE仃ALLSCRIPTIONFACTORSRALHERACTIVCLYSTLLDIEDINRECEILTYEARSMANYRESE∞CHRESULTSSHOWEDTHATSTAT3EXPRESSEDABNONNALLYINLOTSOF劬MORTISSUESANDCEUSYSTEMS，W，HICHW部CLOSELYRCLATCDT0MEPROLIFERATION鋤DDI任打E加『TIATIONOFTUMOR，CELLAPOPTOSIS，HNMUNEESCAPE，GEILESISOFBLOODVESSELS，ANDIILVASIONMDMETASTASISTHISEXPCRIMENT仃AILS斷EDTHEP1撇IDWHICHWAS誦THSTAT3GENETOBOVINEM鋤M哪EPITLLELIALCELLSN啪UGHTHE1IPOFACT鋤INE2000A11DSTUDIEDNLE111EBI010百CALCHARACT鰣STICSOFBOVINEM鋤MARREPITHELIALCELLS，PUTA劬D鋤EN謝ST印SFORPRODUCING仃ANSGELLICA11IMALSANDCELLIMMORTALIZATION1、BOVINEM鋤儺ARY印ITHELIALCELLSWEREIS01ATED鋤DP戚矗EDBYUSINGCOLLAGENASEDIGESTIONOFTHEM鋤MARR西AILDTISSUEFORMEPFIMA巧CELL伽LTURE，ANDSUBSCQU鋤TLYUSING仃YPSINSELECTEDDIGESTIONOFME饑1衄司CELLSFORODLP嘶FICATIONMO訕0109ICAL0BSERVATIONREVEALEDMATT11ECULTLLRCDCELLSPOSSESSEDTLLETYPICALCHARACTCROF印ITHELIALCELLS2、STAT3SI朗ALTRANSDUCERANDACTIVATOROFTRANS嘶PTION3GENEWASAMPLIFIED舶MPOTB7PLASMID訛CHCONTAINEDHUM鋤STAT3GCLLECDNA矗孵NEILT，TLLEILINS叭EDMOPEGFPCLVECTORTOCONS仃UCTREC0MBINANTPLASMID3、WBCULTILREDTHEBOVINEMAMMA巧EPITHELIALCELLSUSINGDMEMWITH15％FBS，也EN竹ANS斷EDTHESTAT3GEILETOCELLSOF廿LISTYPEMROU曲NLELIPOFACT鋤INE2000ANER48H，WEEX鋤INCDTLLEEXPRESSIONOFEGFPUSILLGNUORESCENTMICROSCOPE，24HOURSAREREXPO則RETOTHERECOMBINANTPL砌IDTLLE乜眥SFECTIONRALEOFTHEBEVCELLSW部L6％，SCREELLEDⅡLECLONEUSING600U咖LG418，也％MAKEDTHEDONEPFOPAGANDAUSING300UG／MLG4184、D舐VEDRNA舶MPOSITIVECLONECDLSALLDDESI弘EDTHEP枷CULARPRIMERTOGOT0THEIMPCRST印ATLAST，MEPOSITIVECELLSSHOWTHEAIMBAND2332BP，THENEGATIVECELLSHAVENOTHESAMEBAND5、FLOWCYTOME缸YWASUSEDT0ANDIYZEMECELLCYCLES、MULTIPLICATIONCAPACITYAND

簡介：Y927257分類號UDC學(xué)校代碼密級學(xué)位論文人細胞中HIW1因子生物學(xué)特性的研究劉長國指導(dǎo)教師姓名睦國塞絲籃塹劌盤堂婆蒸塹劌IQQ2絲監(jiān)盎盟壅亟主盟瞳亟堡壘直塹I墾室QQ申請學(xué)位級別盛學(xué)科專業(yè)名稱勉塹遣堡直壁魚鳘墮論文提交日期2QQ魚生5旦論文答辯日期2QQ魚生三旦學(xué)位授予單位塹劌盤鱟學(xué)位授予日期答辯委員會主席堂選煎攮論文評閱人型叢生塹塞基周盈揚墊絲盆主墊塾籃2006年5月16℃表達16H能夠產(chǎn)生更高的產(chǎn)量。將大腸桿菌破碎液的上清加入到NINTA純化柱中，然后用含20RAM咪唑的PBS充分洗滌后，最后用含LOOMM咪唑的PBS能純化得到質(zhì)量較好的PET22BN391。13將純化得到的HIWSL一N391蛋白免疫大白兔制各多克隆抗體，該抗體特異地識別AL834178所預(yù)測蛋白上的第3至391位氨基酸。用該抗體對HCTLL6細胞中總蛋白進行WESTERN雜交實驗，結(jié)果有兩個蛋白被特異性地識別，其中信號最強的蛋白大小約92KDA，與AL834178所預(yù)測蛋白的分子量一致。該結(jié)果證明人細胞中存在HIWSL蛋白因子，并進一步表明該因子嚴格地遵循GENBANK中AL834178所預(yù)測的ORF。2小鼠1WSLMLWSL的組織表達分析由于HIWSI與它的小鼠同源物MOUSEIWSL，MIWSL具有很高的同源性84％的相似性，因此本研究利用小鼠為實驗對象研究動物中IWSI的組織表達分布情況。首先從小鼠體內(nèi)分離出有關(guān)器官組織，其中包括大腦、心臟、肝臟、肺、脾臟、胃、腎臟、前列腺、睪丸、子宮、大腸與小腸。接著將這些器官組織中的總RNA提取出來并反轉(zhuǎn)錄成EDNA，然后以這些EDNA為模板進行半定量RTPCR分析。結(jié)果表明MIWSL是個組織器官普遍性表達的因子；并且在不同器官組織中的表達量差異較大，其中腎臟中表達量最高，其次是睪丸、大腸、小腸與脾臟，而心臟中的表達量最低。這些結(jié)果意味著IWSL對于動物機體是個必需因子，并且它的功能具有組織偏好性。3HIWSL的亞細胞定位、31將HLWSI的全長EDNA構(gòu)建到綠色熒光蛋白質(zhì)粒PEGFPC1中，然后將該重組質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染HCTLL6和U20S細胞。熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明GFPHIWSI在細胞中表達后主要定位在細胞核中，說明HIWSL因子是個核蛋白。32針對HIWSL的核蛋白特性，對HIWSI因子的肽鏈序列進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在HIWSL因子的兩個功能域的銜接區(qū)第350至557位氨基酸之間有幾個類似核定位信號NUCLEARLOCALIZATIONSIGNALS，NLSS的基序。為了檢驗這個銜接區(qū)是否具有NLSS作用，將HIWSLEDNA的各種缺失突變體構(gòu)建到綠色熒光蛋白質(zhì)粒PEGFPC1中，然后將這些重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HCTLL6。熒光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果表明GFPN391分布在細胞核內(nèi)，而GFPN355主要分布在細胞質(zhì)中，這些結(jié)果表明在HLWSL因子的第356位至第391位氨基酸之間含有NLSS。類似地，GFPC389

簡介：Y1414211學(xué)校代碼10023學(xué)號B2005252中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生畢業(yè)學(xué)位論文小鼠多潛能成體干細胞生物學(xué)特性及向樹突狀細胞分化的研究BIOLOGICALCHARACTERISTICSOFMOUSEADULTPIURIPOTENTSTEMCESANDDIFFBRENTIATIONINTODENDRITICCELLS所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專業(yè)研究方向完成日期基礎(chǔ)學(xué)院劉瑞趙春華教授趙春華組內(nèi)科學(xué)成體干細胞2008年6月英文摘要中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文MOSTOFT11EADULTSTEMCELLSR10T011LYGENERATETHOSEMATURECELLT，PESCORRESPONDINGT0T11EI“SSUEOFORIGIN，BUTALSOCROSSTISSUEORGEMLAYERBOUND撕EST0GENERATECELLT，PESOFDI丘ERENTLINEAGES，W11ICHW懿I砌EDASADULTSTEMCELLPLASTICI饑HO、ⅣEVER，TLLEEXPLANATIONSOFADULTSTEMCEUPLASTIC塒REMAINAPOINTOFDISCUSSION鋤DCONTROVERSYONE、ⅣELLACCEPTEDPOSSIBLEMECHANISMFOROBSEN，ATIONOFADULTSTEMCELLPLASTICITRRELATESTOTHEACTIONOFRAREPLURIPOTENTSTEMCELLSPSCSPRESENTINTILETESTCELLPOPULATIONILLTHEFIRSTPART，WEHAVESUCCEEDEDINISOLATINGSCA1CD117LIN。塒MITI、，EPLURIPOTENTSTEMCELLS丘。OMMEMOUSEEMBRYOILICFIBROBLASTPOPULAITONTHISCEUPOPULATIONPOSSESSESTLLEMAINCHARACTERISTICSOFPRIMITIVEPL嘶POTEMSTEMCELLS，INCLUDINGEXPRESSIONOFEMB驢MCSTEMCELLSESCSM婦R’ABIL時OFGIVINGRISETOMULTIPLE咖ESOFT11REEGE珊LAYERSA11DPOTENTIALOFIMMUNOREGULATIONINVIVOSTUDIESINDICATEDTLLATNLECELLPOPULATIONCOULDPROLONGTHESUⅣIVALOFALLOGENEICSKIILGRARS，AILDSTRILINGLYPROMOTET11ESKINB啪W(wǎng)OULDHEALINGBYDI疏RENTIATINGINTOMULTIPLET，PESOFCELLSMMEDEMALANDEPIDE肌ALTISSUESOUR咖DYWILLHELPUSBETTER吼DERSTAILDTHEPROPERTIESOFPLASTIC時ANDMAYGREATLYCONTRIBUTETOTHEUSEOFSTEMCELLS嬲ATA】唱ETFORCELLTMSPLAILTATIONANDGENE11LESECONDPARTIILDICATEDTHATT11ESCA1CDLL7。LINPLURIPOTENTSTEMCELLSCOULDBEMDUCEDT0DI位RENTIATEINTOCD11BH訕I(yè)ALOWCD11C10WDEND礬CCELLSDCS晰TLLS仃ONGREGULATO巧缸LCTIONSC印ABLEOFSUPPRESSINGMIXEDLYMPHOCYTEREACTION，ALLOGENEICDELAYEDTYPEHYPERSENSITIVITRA11DREJECTIONOFALLOGENEICSHNGMFTSTHEIII】衄UILEREGULATO巧缸1CTIOILSOFTLLESEDENDRITICCELLSWEREFOULLDT0BEMEDIATEDBYJAGGED2OURSTLJDIESREVEALEDTHATESCLIKEPLURIPOTENTSTEMCELLSEXISTIIL丘ESLLLYISOLATEDMOUSEEN】【BRROILICFIBROBLASTPOPULATIONAILDTHEYC孤DI髓RENTIATEIMODCS晰THS們NGREGULATO巧矗MCTIONSKEYWORDSPLURIPOTENTSTEMCELLSPSCS，MESENCHYMALSTEMCELLSMSCS，DENDRITICCELLSDCS，DIFRERENTIATIOIL，JAGGED3

簡介：本文對兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)、鑒定及生物學(xué)特性進行了研究。文章通過穿刺抽取兔髂骨骨髓，用密度梯度離心法和貼壁培養(yǎng)法相結(jié)合，分離兔骨髓間充質(zhì)干細胞，進行體外培養(yǎng)擴增，繪制其生長曲線，計算倍增時間，測定細胞貼壁率和細胞活力，用倒置顯微鏡、透射電鏡觀察細胞的生物學(xué)性狀。通過免疫熒光組織化學(xué)鑒定細胞，了解其部分表型特點。研究表明密度梯度離心與貼壁培養(yǎng)相結(jié)合，可有效分離和擴增骨髓MSCS；分離培養(yǎng)的骨髓MSCS生長穩(wěn)定，增殖力強，可選用前5代傳代細胞作為軟骨組織工程的種子細胞細胞表面標志CD34陰性、CD44陽性可作為鑒定骨髓間充質(zhì)干細胞MSCS的一種方法。

簡介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人粒細胞集落刺激因子的克隆、表達、純化和PEG單修飾以及修飾前后的體內(nèi)外生物學(xué)活性姓名張兵申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師宋禮華20080501學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確說明并表示謝意學(xué)位論文作者簽名臺JL日期的越K巴纊學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或其指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)將學(xué)位論文用于非目的的少量復(fù)制并允許論文進入學(xué)校圖書館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，有權(quán)將學(xué)位論又的標題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論義在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名純要、導(dǎo)師簽日期塒摻彳日

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的細胞分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究論文題目建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的細胞分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究作者姓名作者姓名徐鶯徐鶯指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師施農(nóng)農(nóng)教授施農(nóng)農(nóng)教授學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)遺傳學(xué)遺傳學(xué)所在學(xué)院所在學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院提交日期提交日期2008年4月1日2008年4月1日STUDYOFMOLECULARCELLBIOLOGYANDIMMUNOLOGYOFCYMBIDIUMMOSAICVIRUSANDODONTOGLOSSUMRINGSPOTVIRUSADISSERTATIONFORMASTER’SDEGREESUBMITTEDTOTHEGRADUATESCHOOL,HANGZHOUNORMALUNIVERSITYHANGZHOU,ZHEJIANG,CHINAGRADUATESTUDENTXUYINGSUPERVISORPROFESSORSHINONGNONGMAJORGENETICSAPRIL2008

簡介：廈門大學(xué)博士后學(xué)位論文蘭花生殖生物學(xué)研究雄配子體發(fā)育觀察及精細胞、胚囊、合子、胚分離操作姓名伍成厚申請學(xué)位級別博士后專業(yè)植物學(xué)指導(dǎo)教師田惠橋20081101ABSTRACTABSTRACTBASEDONTHEMATERIALSOFDORITISPULCHERRIMAANDPHALAENOPSISHYBRID，THEDEVELOPMENTOFMALEGAMETOPHYTESWEREOBSERVEDBYTHEMETHODSOFPARAFFINSECTIONSANDPOLLENCOMPRESSIONTHEISOLATIONOFSPERMCELLS，LIVINGEMBRYOSACS，EGGOCELLS，ZYGOTES，ANDPROEMBRYOSINTHESETWOKINDSOFORCHIDWERESTUDIEDRESULTSPRESENTEDINTHISTHESISCANBESUMMARIZEDASFOLLOWS一THEMICROSPORETETRADSARETETRAHEDRAL，ISOBILATERAL，DECUSSATE，TSHAPEDANDREMAININMASSULAEATMATURESTAGETHEPOLLENGRAINSARE2CELLEDPOLLENTUBESWEREINDUCEDINTHEOVARYAFTERMANUALPOLLINATIONANDSPERMCELLSWEREISOLATEDFROMTHETUBESBYIMMEDIATEBLOWUPINABROKENSOLUTIONCONTAINING5％12％MANNIT01THETWOSPERMCELLSISOLATEDWEREDIMORPHISMONEISBIGANDTHEOTHERISSMALL，ANDTHEFLUORESCENTINTENSITYWASDISTINCTLYTHETWOSPERMCELLSCANBEDIVIDEDINTOTWOINDIVIDUALGROUPSBYUSINGAMICROMANIPULATOR一LIVINGEMBRYOSACSCOULDBEISOLATEDBYMANUALMICRODISSECTIONFROMOVLUESAFTERAPRETREATMENTOFCOMBINNATINGENZYMATICMACERATIONWITHSHAKING，BUTEGGCELLSWERENOTISOLATEDINTHEEXPERIMENTSZYGOTESANDPREEMBRYOSCOULDBEISOLATEDBYMANUALMICRODISSECTIONCOMBINNATEDWITHENZYMATICMACERATIONTOTHEOVULESTHEISOLATIONOFMATUREEMBRYOSNEEDNOTENZYMATICTREATMENTKEYWORDSORCHIDACEAE，SPERMCELL，EMBRYOSAC，ZYGOTE，EMBRYO，ISOLATION

簡介：匪河瞎蓮科六蠆碩士研究生畢業(yè)論文SCF和G．CSF聯(lián)合動員小鼠外周血培養(yǎng)問充質(zhì)干細胞的生物學(xué)特性的初步研究研究生王東來導(dǎo)師馮建剛教授專業(yè)二級學(xué)院研究起止日期提交日期外科學(xué)第四臨床醫(yī)學(xué)院2004年9月2006年3月2006年3月中文摘要對照，兩組均采用密度梯度離心結(jié)合貼壁法篩選MSC。用含15％胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，48小時后首次換液，去除未貼壁細胞，以后35天換液一次，3周左右傳代。取生長良好的細胞進行生長曲線測定、細胞周期檢測、貼壁率檢測、克隆形成能力檢測，并應(yīng)用流式細胞分析結(jié)合免疫組化方法鑒定MSC。同時利用含有轉(zhuǎn)化生長因子．PTGF．B1的高糖DMEM培養(yǎng)液誘導(dǎo)第三代MSC向軟骨細胞分化，應(yīng)用免疫組化的方法檢測II型膠原的表達情況。結(jié)果1對照組無一份培養(yǎng)出MSC，試驗組7份成功培養(yǎng)出MSC。原代MSC首次傳代時間為4周左右，細胞形態(tài)趨向于多角形，傳代之后細胞生長速度明顯增快，經(jīng)過35天的潛伏期后，出現(xiàn)5．7天的對數(shù)生長期，而后進入平臺期，約3周左右傳代，細胞呈均勻分布的集落樣生長，形態(tài)更趨向于長梭形，細胞的均質(zhì)性明顯提高，傳至第五代時細胞出現(xiàn)老化。2細胞周期檢測發(fā)現(xiàn)第三代的MSC中SG2M期的細胞占21．4％，GO／GL期的細胞約占78．6％，說明絕大多數(shù)細胞處于靜止期。貼壁率檢測發(fā)現(xiàn)24小時貼壁率達到45％，48小時貼壁率為81．5％。PO代細胞平均細胞集落形成率為L。25／106，P】、P3、P5代細胞的平均細胞集落形成率分別為21．32％，16．13％，9．63％。37份生長良好的第三代貼壁細胞行表面標志物檢測，流式細胞分析結(jié)果顯示表達相關(guān)的抗原標記CD29和CD44，不表達造血細胞系的表面標志CD34和CD45。4免疫組化顯示第三代MSC的II型膠原，層粘連蛋白

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簡介：Y1022二08後旦大學(xué)學(xué)校代碼10246學(xué)號031107172博士學(xué)位論文小鼠心臟神經(jīng)嵴細胞的生物學(xué)特性及其相關(guān)基因研究院系蘭型苧墮專姓業(yè)名指導(dǎo)教師完成日期兒科學(xué)彭濤黃國英教授2006年10月15曰C143基因敲除小鼠圓錐動脈干畸形的發(fā)病機制研究中文摘要小鼠心臟神經(jīng)嵴細胞的生物學(xué)特性及其相關(guān)基因研究中文摘要圓錐動脈干是在心臟胚胎發(fā)育時期連接動脈弓的動脈干和連接心室的圓錐部的總稱。心臟圓錐動脈干缺損是圓錐動脈干發(fā)育障礙所造成的一類先天性心臟病，包括法洛四聯(lián)癥、大動脈轉(zhuǎn)位、右室雙出口、永存動脈干等多種導(dǎo)致紫紺和低氧血癥的心臟復(fù)雜畸形，這類復(fù)雜心血管畸形約占先天性心臟病的30％。人類CID的發(fā)病機制復(fù)雜，但近二十年來的研究發(fā)現(xiàn)提示，CO蚰EXIN43CX43基因及心臟神經(jīng)嵴細胞與心臟錐干部發(fā)育密切相關(guān)心臟神經(jīng)嵴細胞是從枕部神經(jīng)嵴分化出來的一群細胞，這群細胞通過第3，4，6咽弓向原始心管遷移，最后停留在動脈干和動脈圓錐等部位分化為問充質(zhì)細胞，主要參與心臟流出道隔及大血管的形成。研究發(fā)現(xiàn)，如果在遷移之前切除散發(fā)到第3、4、6咽弓的神經(jīng)嵴細胞，就會出現(xiàn)永存動脈干、主動脈騎跨、右室雙出口、主動脈弓畸型和室間隔缺損等心血管畸形，且切除的長度與畸形的種類相關(guān)，如切除長度大于兩個體節(jié)可產(chǎn)生永存動脈干，切除長度小于兩個體節(jié)則產(chǎn)生右室雙流出道，由此可見，心臟神經(jīng)嵴細胞對于心臟圓錐部的發(fā)育意義重大。CX43是細胞縫隙連接基因家族的成員之一，近年的研究發(fā)現(xiàn)其與心血管發(fā)育密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，CX43基因剔除小鼠、過量表達CX43的CMV43轉(zhuǎn)基因小鼠和顯性失活抑制CX43組成的細胞間隙的信息交流的FC轉(zhuǎn)基因小鼠均可見右室流出道畸形和梗阻，從而說明，精確的C“3基因表達對于圓錐部的發(fā)育至關(guān)重要。在小鼠胚胎發(fā)育過程中，CX43大量表達于遷移性神經(jīng)嵴細胞之上最早于ED95D即可見，并參與形成心臟神經(jīng)嵴細胞的縫隙連接。越來越多的研究提示CX43可能通過調(diào)節(jié)心臟神經(jīng)嵴的行為而間接影響心臟的形態(tài)發(fā)生。因此，本課題利用CX43基因剔除1MOCKOUT，K0小鼠模型結(jié)合日益發(fā)展的基因芯片技術(shù)進行研究，旨在研究CX43基因?qū)π呐K神經(jīng)嵴的誘導(dǎo)、發(fā)生、分離、遷移、分化的調(diào)控機制，進一步闡明CX43影響心臟圓錐發(fā)育過程其可能的分子機制2

簡介：中南林業(yè)科技大學(xué)博士學(xué)位論文擬南芥懸浮細胞生物學(xué)及其遺傳轉(zhuǎn)化模式姓名李建安申請學(xué)位級別博士專業(yè)森林培育指導(dǎo)教師胡芳名譚曉風20060618“白化”的穩(wěn)定效果。有關(guān)懸浮細胞“白化”原因及頭孢霉素逆轉(zhuǎn)效應(yīng)機理，有待進一步研究。3、擬南芥懸浮細胞耐受性試驗選擇與其遺傳轉(zhuǎn)化相關(guān)的常溫靜置、低溫靜置、高溫振蕩、蔗糖饑餓和常溫振蕩對照幾種不同處理方式，從其生長和細胞活性兩個方面，研究其對環(huán)境脅迫的耐受性，以更好地制定擬南芥懸浮細胞基因轉(zhuǎn)化時細胞同步化或預(yù)處理及共培養(yǎng)的方案和條件。結(jié)果表明擬南芥懸浮細胞對各種脅迫處理的耐受性表現(xiàn)出明顯的差異，整體耐受性強弱依次為常溫振蕩對照蔗糖饑餓高溫振蕩低溫靜置常溫靜置，常溫靜置最低。擬南芥懸浮細胞對脅迫處理的不適應(yīng)表現(xiàn)在多個方面，總生物量增長很少或不能增長，細胞相對活性及活細胞生物量不斷下降，耐受系數(shù)低。隨著時間的變化，擬南芥懸浮細胞對脅迫處理的耐受性或不適應(yīng)性的表現(xiàn)呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律，這種變化的可能機制與細胞間協(xié)同與競爭、細胞自我適應(yīng)機制的調(diào)節(jié)等有關(guān)。4、擬南芥懸浮細胞超低溫保存試驗探索一般實驗室條件下擬南芥懸浮細胞的簡便保存技術(shù)，為中長期保存遺傳背景穩(wěn)定一致的擬南芥懸浮細胞起始材料提供有效的方法。通過一系列試驗，本文獲得了擬南芥超低溫保存的適宜方法。優(yōu)化方案如下選擇繼代后2D的擬南芥懸浮細胞，洗滌1次，細胞沉淀重懸浮于6％蔗糖培養(yǎng)基，于40C低溫下鍛煉6H；濃縮細胞使之有較高的細胞密度0250309／M1，加入16％W／V甘油作為冰凍保護劑，直接置于一80℃深冷冰箱保存；使用時以37℃快速解凍，離心后除去保護劑，然后可用去離子水洗滌后進行活性檢測，也可用基本培養(yǎng)基洗滌后重新進行懸浮培養(yǎng)。此方法保存30D后的細胞相對活性達O8左右，可以滿足實驗室一般研究用。如果對其保存后的活性要求不很嚴，還可以進一步簡化，例如，預(yù)處理前以懸浮細胞自然沉降代替離心洗滌后收集細胞沉淀免去高滲預(yù)處理，直接加入冰凍保護劑后在低溫下鍛煉6H；室溫下解凍等。5、農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化與制備對本文擬使用的PBIB／GUS、PBM／SARS、PBINMGFP5ER等幾種質(zhì)粒載體構(gòu)建和工程菌制備及其生長特性等進行了系列試驗。通過酶切和PCR檢測實驗，證明所構(gòu)建的PBIB／GUS、PBIB／SARS載體正確，含有相應(yīng)的標志基因，可以用于后續(xù)的擬南芥懸浮細胞基因轉(zhuǎn)化。采用電轉(zhuǎn)化法，成功地將PBINMGFP5ER質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌細胞，轉(zhuǎn)化頻率為2152X104個舢G質(zhì)粒，并在一系列檢測實驗中得到證明。擬用的幾種不同質(zhì)粒具有基本相似但不完全相同的生長特性，而且接種量及培養(yǎng)條件等，對其生長量有很大影響。采用本文方法，成功地制備了可用于植物基因轉(zhuǎn)化的一系列工程菌株。6、轉(zhuǎn)化模式與轉(zhuǎn)化細胞選擇比較3種擬南芥懸浮細胞轉(zhuǎn)化方案，共培養(yǎng)后均獲得GUS的瞬時表達，但僅模式Ⅲ成功地獲得抗性愈傷組織。在模式Ⅲ基礎(chǔ)上，對所獲得的抗性愈傷組織Ⅱ

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文骨髓源肝干細胞的克隆化及其生物學(xué)特性的研究姓名陳少紅申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)指導(dǎo)教師趙國強20060516骨髓源肝干細胞的克隆化及其生物學(xué)特性的研究方法富集的細胞是不是一致性的。因為沒有一種或一組聯(lián)合抗體對MSCS是特異性的。即使現(xiàn)今報道的非常純化的群體由于在傳代中分化祖細胞，即過渡細胞的產(chǎn)生，使得這種純化的細胞群體也異質(zhì)化。而且，隨著傳代，某些MSCS會保留其多向分化潛能，但也有一些要么只能朝某個特定方向分化，要么開始衰老死亡。因此，成體干細胞在體外傳代和擴增的困難極大地限制了它們的應(yīng)用。很明顯，在L臨床廣泛應(yīng)用之前，必須要建立一種在體外大量擴展MSCS，但又不能影響其分化潛能的方法。我們基于非平衡細胞動力學(xué)的抑甫0SACKN論，應(yīng)用了一種新的方法去建立成體干細胞株系并在體外培養(yǎng)擴增。非平衡細胞動力學(xué)對于成體干細胞保持其在體內(nèi)的功能是必需的，卻是體外擴增的阻力，因此，從非平衡細胞動力學(xué)向平衡細胞動力學(xué)的轉(zhuǎn)變將促使成體干細胞的指數(shù)增殖并保持其在體外長期傳代的穩(wěn)定性。黃苷XS便充當了這種角色。在前期工作中，我們以2AAF／CCL4程序構(gòu)建急性肝損傷動物模型，取損傷后的肝臟萃取物作為骨髓間質(zhì)干細胞的實驗組刺激物進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，用RTPCR技術(shù)檢測細胞分子表面標志的變化。結(jié)果顯示實驗組BMSCS誘導(dǎo)至1LD表達幼稚肝細胞標志M2一PK、GSTP，而對照組誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細胞無此改變，這說明損傷的肝臟能夠產(chǎn)生某種因子，可以激活干細胞向肝細胞方向的分化。那么，本實驗所得到的單細胞克隆能否對這些因子產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng)了通過這種誘導(dǎo)的方法，我們可以篩選出能夠向肝細胞方向分化的干細胞。實驗方法1、利用貼壁法分離培養(yǎng)原代雄性大鼠骨髓間質(zhì)干細胞，培液中含400LAMXS和1NG／MLEGF，2、再高度稀釋這種混合細胞并以單細胞接種于96孔板。記錄并培養(yǎng)擴增單細胞的克隆。3、采用3％2．AAF／CCL4急性肝損傷模型雌性SD大鼠的肝組織勻漿誘導(dǎo)這些單細胞克隆，取誘導(dǎo)第十一天和第二十天細胞，R11PCR檢測BSTL、GSTP、M2．PK及ALBMNINMRNA的表達；同時用正常同種雌性大鼠肝勻漿作對照培養(yǎng)。4、對比培養(yǎng)細胞，優(yōu)化細胞培養(yǎng)方法。結(jié)果L、得到14株單細胞克隆，記為C1、C2、C3??C14等；II