簡介：關本人所呈交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版，允即論義被查I、蒯和借閱。本人授權山東農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的個部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制于段保存論文和匯編本學位論文，同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫并向社會公眾提供信息服務。F澩密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文作者簽導師簽日期2絲．C膨目錄IIIIIIIRLITTIIIIIIIILY21I6932中文摘要．．．．．．???．．．??．．．．?．．?．．．．．??．．??．??．．IABSTRACT????????．????????????．III1引言．．．．．?．．．．．．．．．．?????．．?．．．．?．．???．．．．．．?．11．1環(huán)境昆蟲概述???????????????????．11．2環(huán)境昆蟲在養(yǎng)殖污染治理中的應用現(xiàn)狀????????????31．2．1養(yǎng)殖業(yè)污染現(xiàn)狀?．‘????????????????．．31．2．2當前畜禽廢棄物資源化處理的技術現(xiàn)狀???????????．41．2．3環(huán)境昆蟲在畜禽養(yǎng)殖污染治理中的應用???????????．61．3水虻科研究進展??????????????????．．61．3．1水虻科的分類概況?????????????????．61．3．2水虻科代表種一黑水虻的研究概況????????????．．81．4亮斑扁角水虻研究現(xiàn)狀????????????????．121．4．1亮斑扁角水虻的分類地位???????????????121．4．2亮斑扁角水虻的成蟲形態(tài)描述楊再華，2007????????．121．4．3亮斑扁角水虻的地理分布???????????????131．5昆蟲腸道微生態(tài)的研究????????????????．141．5．1昆蟲腸道環(huán)境的構造和功能??????????????．141．5．2昆蟲腸道細菌的研究概況???????????????151．6課題研究的目的和意義????????．????????172．材料與方法????????????????????．182．1供試材料??．．．?．．??．?．?．．．．．．．．．??．??．．．??182．1．1試驗蟲源???????????????????．．182．1．2培養(yǎng)基????????????????????．182．1．3試驗儀器???????????????????．．182．2研究方法????????????????????．182．2．1亮斑扁角水虻的人工養(yǎng)殖???????????????182．2．2亮斑扁角水虻的形態(tài)特征與生物學????????????．192．2．3溫度與亮斑扁角水虻發(fā)育的關系?????????????19

簡介：謹以此論文獻給我敬愛的導師、我至愛的家人以及所有幫助、關心我的人董根短蛸人工繁育過程中的基礎生物學研究學位論文完成日期指導教師簽字答辯委員會成員簽字

簡介：謹以此論文獻給從事遠洋漁業(yè)事業(yè)的工作者一周游西南大西洋兩種主要經(jīng)濟魚類的生物學初步研究學位論文完成日期Z絲ZJL指導教師簽專二竺至莖；；；；；白一答辯委員會成員簽字L絲盔型端角伊眵趣玲

簡介：分類號85R37UDC碩士學位論文密級童壘密級F乙印弓形蟲單克隆抗體的制備及生物學活性的初步鑒定劉明如論文答辯日期2Q12生三旦2壘旦學位授予日期2Q12生魚旦2墨旦答辯委員會主席亟駕遺主堡醫(yī)垣論文評閱人郭建圖』研究旦王室田躉I』盟究旦■Y弋F，弓形蟲單克隆抗體的制備及生物學活性的初步鑒定摘要剛地弓形蟲ZGD耽疣I是一種全球性的人畜共患寄生蟲，該種寄生蟲病的流行與傳播不僅嚴重地影響著畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，同時也對人類的生命與健康造成嚴重的威脅及危害。本實驗目的在于利用分子生物學中的蛋白表達技術及單克隆抗體的制備等分子及免疫學相關技術，選用弓形蟲速殖子抗原及膜表面主要致病性抗原P30作為免疫原，制備出弓形蟲單克隆抗體為接下來建立弓形蟲病快速、簡便診斷方法和進一步的研究打下基礎。通過對弓形蟲P30基因的PCR擴增、克隆、測序，成功的構建了原核表達重組質粒PET32AP30，并成功的誘導表達了弓形蟲P30重組蛋白抗原，經(jīng)純化制備出了可溶性弓形蟲P30重組蛋白抗原。同時采用小鼠腹腔收集弓形蟲速殖子方法，用胰蛋白酶法純化制備了弓形蟲速殖子抗原，為后續(xù)試驗提供了免疫抗原。用弓形蟲P30重組蛋白抗原和弓形蟲速殖子抗原分別免疫小鼠、經(jīng)細胞融合，利用建立的間接ELISA方法對融合胞融克隆進行檢測篩選，成功的用表達的P30蛋白制備了2株單克隆抗體雜交瘤細胞分別命名為5D5、2A1；用速殖子抗原制備了2株單克隆抗體雜交瘤細胞，分別命名為586、2D2。對這4株雜交瘤細胞分泌的單克隆抗體的生物學特性進行了鑒定經(jīng)間接ELISA測定586、2D2、5D5、2A1四株雜交瘤細胞單克隆抗體上清的效價

簡介：雞傳染性支氣管炎AVIANINFECTIOUSBRONCHITIS，IB是由雞傳染性支氣管炎病毒AVIANINFECTIOUSBRONCHITISVIRUS，IBV引起的一種急性、高度接觸傳染性疾病，其臨床特征為病雞咳嗽、噴嚏、氣管啰音；幼雞流鼻液蛋雞產(chǎn)蛋數(shù)量和品質下降，是嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的主要傳染病之一。疫苗免疫是當前預防和控制雞傳染性支氣管炎的主要措施，針對不同致病型或血清型的病毒，國內(nèi)外均有多種疫苗毒株和疫苗效力評價用強毒株。一些毒株用傳統(tǒng)的種毒鑒定方法很難準確鑒別，尤其是血清型相同的毒株，因此有必要建立分子生物學鑒別方法，進一步完善IBV特異性檢驗方法，從而對IBV種毒進行鑒定，并對國內(nèi)外疫苗進行純凈性檢測。本研究以中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所菌種中心保存的不同年代的32株H120株、H52株和M41株種毒為研究對象，采用自行設計的特異性引物經(jīng)RTPCR技術擴增得到病毒的S1蛋白基因片段。經(jīng)過序列分析，種毒H52中，1993年3月25日與1993年3月28日凍干的H52種毒的S1基因序列與其他代次不同，但與M41株一致。查閱種毒原始記錄，該批次種毒檢定不合格，安全檢驗表明接種該批次H52病毒的雞出現(xiàn)了呼吸噦音、甩頭等癥狀。1983年10月7日和1992年12月凍干的種毒與其他幾株相比，分別存在2個和9個核苷酸突變。H120種毒中未發(fā)現(xiàn)明顯堿基變異。M41株可分成兩組79年、88年、91年、96年、93年4月、01年凍干的種毒序列一致；而76年、93年3月、06年凍干的種毒序列一致，與H120相似。將從GENBANK上下載的H52株、H120株、M41株以及歐洲使用的疫苗491株的全基因序列全長276KB進行比對分析，從中找出他們之間序列差異較明顯的區(qū)域，使用自行設計的四對引物引物對A、引物對B、引物對C、引物對D對這四種毒株進行擴增。用引物對A時，能擴增出M41株全基因組序列中2900～4690BP處長度為1791BP的目的片斷，所需的M41株最低病毒滴度為1035EID50ML，而無法擴增出H52株和H120株，因此用該對特異性引物能夠區(qū)分M41株與H52株、H120株。用引物對B時，能夠擴增出H52株和H120株全基因組序列中21588BP～23288BP處長度為1700BP的目的片斷，所需的H120H52株最低病毒滴度為1035EID50ML，再利用限制性內(nèi)切酶NAEI對PCR純化產(chǎn)物進行酶切，H120株能夠被切成1000BP和700BP兩個片斷，而H52株的擴增產(chǎn)物由于不存在該酶切位點，所以無法切開。因此利用特異性引物對B并結合酶切的方法可以區(qū)分H52株和H120株。使用引物對C時，能夠擴增出491毒株S1基因序列中長度為1351BP的目的片斷，所需的491株最低病毒滴度為1025EID50ML，并結合使用引物對D進行套式PCR就能擴增出491株S1基因中1066BP的目的片斷，而無法擴增H52株、H120株和M41株，因此使用引物對C和引物對D能夠有效區(qū)分491疫苗株和H52株、H120株、M41株，三對引物A、B、C均具有很好的特異性。從全國疫苗企業(yè)中隨機抽取了19個疫苗企業(yè)共75批IBV活疫苗、從市場上抽取了11個企業(yè)的共16批IBV活疫苗、從5個外國企業(yè)中國代理中共抽取了15批IBV活疫苗，對其進行S1基因測序并使用上述建立的分子生物學鑒別方法進行檢測。結果顯示H120株疫苗和H52株疫苗用引物對B進行檢測時，結果符合率為100％，用引物對C和引物對D檢測發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)禽苗企業(yè)的75批疫苗中有6個企業(yè)9批疫苗、市場上抽取的16批禽疫苗中有1批疫苗出現(xiàn)了491株特異性片段，而從外企抽取的活疫苗均未出現(xiàn)491株特異性片段。綜上所述，本研究通過對中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所菌種中心保存的IBV種毒株的主要免疫原性基因S1基因進行測序分析，并對IBV的H52株、H120株、M41株及國外流行疫苗毒株491株的全基因組進行分析，建立的雞傳染性支氣管炎病毒種毒的分子生物學鑒別方法，進一步完善了種毒特異性檢驗方法。并將該方法應用于國內(nèi)外市場中的雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗的純凈性檢測，為今后IBV疫苗種毒、疫苗鑒別檢驗技術支撐。

簡介：沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文異色瓢蟲的生物學、生態(tài)學特性及其保護利用的研究姓名馬菲申請學位級別碩士專業(yè)特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)指導教師高德三20050601前言刖茜異色瓢蟲【HARMONIAARYRIDISPALLAS】屬鞘翅目COLEOPTERA瓢甲科COCCINELLIDAE瓢甲亞科COCCINELLINAE異色瓢蟲屬HARMONIA，分布于中國、俄羅斯、蒙古、朝鮮、日本等地，基本上在我國各地均有分布。瓢蟲俗稱“花大姐”、“花蓋蟲”、“放牛小”、“貨郎挑”等。絕大多數(shù)是有益的，成蟲和幼蟲都捕食蚜蟲、蚧殼蟲、粉虱等害蟲，也有一些種類是取食病菌孢子的，對農(nóng)業(yè)也有一定好處，還有一些是取食植物的，屬于農(nóng)業(yè)害蟲。所以瓢甲科昆蟲相對應分為捕食性、菌食性和植食性三大類。捕食性瓢蟲的著名種類有澳洲瓢蟲RODOLIACARDINALISMULS、七星瓢蟲『COCCINELLASEPTEMPUNCTATALINN】、孟氏隱唇瓢蟲CRYPPTOLAEMUSMOTROUZIERIMULS、紅點唇瓢蟲CKUWANAESILV、龜紋瓢蟲PROPYLAEAJAPONICATHUNBERG、多異瓢蟲ADONIAVARIEGATAGOEZE等，本研究中的異色瓢蟲就屬于此類。一、本課題研究的目的和意義一研究目的異色瓢蟲是多種害蟲的天敵，對各類蚜蟲、某些蚧殼蟲、粉虱、木虱、螨類以及某些鱗翅目、鞘翅目害蟲的卵和低齡幼蟲具有控制作用，特別是對蚜蟲的控制作用最為廣泛。所以在農(nóng)業(yè)和林業(yè)上異色瓢蟲是一種重要的捕食性天敵昆蟲，在分布地得到廣泛應用。但是在蠶業(yè)上，異色瓢蟲是為害柞蠶業(yè)發(fā)展的害蟲之一，在我國各柞蠶區(qū)均有分布。其越冬成蟲為害春期小蠶，尤其是小眠蠶，以背風向陽的把場被害最重。本課題就是本著趨利避害的原則，對異色瓢蟲的生物學、生態(tài)學特性以及其控害效能、抗逆性、越冬成蟲的保護等進行了研究，為更加有效地發(fā)揮其害蟲天敵的角色，從而為其在害蟲生防上的利用提供理論依據(jù)，為服務于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)奠定基礎。

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文DHAV1感染性克隆構建及其部分生物學活性研究姓名陳君豪申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師姜世金20120613DHAV1感染性克隆的構建及衍生病毒的部分生物學活性的分析組分別皮下注射025ML104TCID50的拯救病毒和母本病毒104一TCIDSO，對照組皮下注射相同劑量的無菌PH74的PBS。結果顯示拯救病毒感染性與母本病毒相似，感染鴨臨床特征明顯。LY0802株DHAV1的感染性克隆的成功構建為下一步深入開展DHAV1的致病機理的研究奠定了重要的基礎。關鍵詞IHAV1；全長CDNAI拯救病毒；感染性克??；生物學活性研究LI

簡介：分類號華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文密級華中地區(qū)豬源與牛源腸出血性大腸桿菌分離鑒定及生物學特性研究CHARACTERIZATIONOFENTERHEMORRHAGICESCHERICHACOLIISOLATESFROMSWINEANDCOWINHUAZHONGAREA研究生郭銳指導教師吳斌教授指導小組吳斌教授周銳教授方六榮教授何啟蓋教授譚臣副教授專業(yè)預防獸醫(yī)學獲得學位名稱農(nóng)學碩士研究方向動物傳染病獲得學位時間2014年6月華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院二。一四年六月華中地區(qū)豬源與牛源腸出血性大腸桿菌分離鑒定及生物學特性研究目錄摘要????????????????????????????????????????????．IABSTRACT??????????????????????????????????????????．．III英文縮略語表ABBREVIATION?????????????????????????．V1文獻綜述???????????????????????????????????～11．1腸出血性大腸桿菌的流行與危害????????????????????11．2腸出血性大腸桿菌的毒力因子?????????????????????21．2．1志賀毒素??????????????????????????一21．2．2腸出血性大腸桿菌毒力島????????????????????31．2．3溶血素??????????????????????????????31．2．4凝集素????????????????????????????一41．2．5脂多糖???????????????????????????41．2．6外膜蛋白????????????????????????????41．2．7菌毛????????????????????????????41．2．8其它相關因子?????????????????????????????．51．3腸出血性大腸桿菌檢測方法??????????????????????51．3．1EHEC0157傳統(tǒng)的細菌分離培養(yǎng)?????????????????．61．3．2EHEC0157免疫學檢測?????????????????????．61．3．3EHEC0157分子生物學檢測?????????????????????81．3．4非0157EHEC的分離與鑒定?????????????????????．91．4腸出血性大腸桿菌基因分型?????????????????????一91．4．1脈沖場凝膠電泳?????????????????????????．91．4．2多位點序列分析??????????????????????????????。101．4．3基于特異性位點PCR限制性片段長度分析?????????????．101．4．4基因間重復序列聚合酶鏈式反應?????????????????111．4．5核糖體基因分型????????????????????????．111．5腸出血性大腸桿菌的綜合防控????????????????????。．111．5．1消滅傳染源????????????????????????????．．121．5．2切斷傳播途徑?????????????????????????????一121．5．3免疫預防??????????????????????????122研究目的與意義???????????????????????????????????143材料與方法?????????????????????????????。153．1材料????????????????????????????????153．1．1菌種????????????????????????????????????．15

簡介：廣西大學學位論文原創(chuàng)性和使用授權聲明本人聲明所呈交的論文，是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除已特別加以標注和致謝的地方外，論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，也不包含本人或他人為獲得廣西大學或其它單位的學位而使用過的材料。與我一同工作的同事對本論文的研究工作所做的貢獻均己在論文中作了明確說明。本人在導師指導下所完成的學位論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬廣西大學。本人授權廣西大學擁有學位論文的部分使用權，即學校有權保存并向國家有關部門或機構送交學位論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或其它復制手段保存、匯編學位論文。本學位論文屬于口保密，在年解密后適用授權。日采葆密。請在以上相應方框內(nèi)打“√”論文作者簽名乃彩乙指導教師簽名蓮／J專堅作者聯(lián)系電話F≯矽％鈺7／日期沙，76堰日期矽，6Ⅶ電子郵箱了多協(xié)仙眇31白M

簡介：INFLUENCEOFELEVATEDC02ONNILAPARVATALUGENSS馕1INBIOLOGYANDFITNESSCOSTSOFBUPROFEZINRESISTANCEWUSHANSHANTHEDISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREESUPERVISEDBYPROFESSORLIBAOPINGDEPARTMENTOFENTOMOLOGYNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING，210095，PRCHINAMAY，2012目錄目錄中文摘要IABSTRACTIIL第1章文獻綜述111C02濃度變化對植物昆蟲互作關系的影響1111大氣中C02含量的變化對作物的影響11111大氣中C02含量的變化及其對作物生長和生理的影響11112大氣中C02含量變化對水稻的影響2112昆蟲對大氣中C02含量變化的響應21121大氣中C02含量變化對昆蟲影響的研究方法一21122大氣中C02含量變化對昆蟲取食、發(fā)育、存活及繁殖的影響3】2大氣中C02濃度升高與其他因素互作對昆蟲的影響4121C02濃度升高與氮素互作對植食性昆蟲的影響41211N素對植食性昆蟲的影響41212氮對褐飛虱發(fā)育和繁殖的影響，41213氮素與C02濃度互作對褐飛虱的潛在影響5122C02濃度升高對昆蟲抗藥性及抗性代價的影響51221害蟲的抗藥性及抗性代價。51222褐飛虱的抗藥性及抗性代價61223氣候變化對褐飛虱抗性代價的影響71。23C02濃度升高對昆蟲取食行為的影響71231刺探電位圖譜EPG技術的原理及應用71232EPG在褐飛虱取食行為研究中的應用91233C02濃度升高對昆蟲耿食行為的影響913本學位論文的研究內(nèi)容、意義和技術路線10131研究內(nèi)容及其意義10132主要技術路線～11第2章C02濃度和旌氮量提高對褐飛虱生長發(fā)育及繁殖的影響1321材料與方法14211供試昆蟲和水稻來源14212試驗方法142121卵歷期和孵化率觀察14

簡介：關于學位論文原創(chuàng)性和使用授權的聲明本人所呈交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權山東農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文，同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫，并向社會公眾提供信息服務。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文作者簽名導師簽名日期盜易一濁必筮疊咔～’A、符號說明

簡介：分類號學校代碼Q542密級學號201001140149紅鯽與翹嘴紅鮪不同倍性水平雜交魚的形成及其生物學特征研究STUDIESONFORMATIONOFTHEDIFFERENTPLOIDY1EVELHYBRIDSOFREDCRUCIANCARPCARASSIUSAURATUSREDVAR早TOPMOUTHCULTERERYTHROCULTERILISHAEFORMISBLEEKER6、ANDTHEIRBIOLOGICALCHARACTERISTICS研究生姓名指導教師姓名、職稱學科專業(yè)研究方向何偉國魚類及水生經(jīng)濟動物生殖生理與育種湖南師范大學學位評定委員會辦公室二零一二年六月摘要多倍化是指基因組中額外一套或多套染色體的滲入現(xiàn)象，他在植物和動物中是一種流行的物種形成機制。導致多倍化的途徑有多種，包括體細胞加倍、非減數(shù)配子的融合、多精受精或“三倍體橋“。現(xiàn)在普遍認為雜交在引發(fā)多倍化過程中起著重要的作用。多倍體物種在植物中相當常見，然而在動物中則相對較少。即便如此，多倍化現(xiàn)象在許多魚類中卻廣泛存在著。并且，許多人工誘導的多倍體魚已經(jīng)用來制備不育的魚類品種和促進生產(chǎn)。另外，魚類中的多倍體還可以作為一種有用的模式系統(tǒng)用來檢驗基于植物研究得出的關于多倍化起源和結果的理論。在本研究中，通過遠緣雜交和遺傳選育的生物學方法與技術，將鯉科魚類中的紅鯽CARASSIUSAURATUSREDVAR，RCC9，2N100與翹嘴紅魚自ERYTHROCULTERILISHAEFOL。MISBLEEKER，TC艿，2N48雜交在脊椎動物中首次獲得了存活的二倍體鯽魚白2NRT、三倍體鯽鮐3NRT和四倍體鯽鮐4NI盯雜交魚。并且，對這些不同倍性水平雜交魚的倍性、染色體數(shù)目、核型、DNA含量、外形特征、SOX基因、5SRDNA的結構組成與變異以及他們在染色體上的定位情況等生物學特征進行了系統(tǒng)研究，主要研究內(nèi)容如下1通過遠緣雜交技術將雌性紅鯽與雄性翹嘴紅鮐雜交獲得了二倍體鯽魚自、三倍體鯽魚自和四倍體鯽魚白三種不同倍性水平的雜交魚后代。并利用染色體計數(shù)、核型分析和血細胞平均DNA含量測定方法

簡介：華中農(nóng)業(yè)大學植物科技學院COLLEGEOFPLANTSCIENCETECHNOLOGYHUAZHONGAGRICULTURALUNIVERSITY二。一二年六月JUNE，2012㈣㈣㈣㈣㈣Y2162205華中農(nóng)業(yè)大學學位論文獨創(chuàng)性聲明及使用授權書學位論文磊如需保密，解密時間年月日是否保密獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料，指導教師對此進行了審定。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中做了明確的說明，并表示了謝意。研究生簽名部直腩時間諺1工年6月R日學位論文使用授權書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學關于保存、使用學位論文的規(guī)定，即學生必須按照學校要求提交學位論文的印刷本和電子版本；學校有權保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容，為存在館際合作關系的兄弟高校用戶提供文獻傳遞和交換服務，同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權力。注保密學位論文即涉及技術秘密、商業(yè)秘密或申請專利等潛在需要提交保密的論文在解密后適用于本授權書。學位論文作者張軒A蹈導師始力細勃簽名日期7沙。2年6月R日簽名日期WIX年多月3日

簡介：分類號分類號S79227授予學位單位代碼授予學位單位代碼10434學號2014120250山東農(nóng)業(yè)大學全日制碩士專業(yè)學位論文多花刺槐多花刺槐有性有性生殖生物學研究生殖生物學研究THESTUDYONSEXUALREPRODUCTIONBIOLOGYINROBINIANEOMEXICANAVARLUXURIANS2016年6月5日姓名姓名姜麗娜姜麗娜學位類別學位類別專業(yè)學位專業(yè)學位專業(yè)專業(yè)林業(yè)林業(yè)研究方向研究方向林木遺傳育種林木遺傳育種學院學院林學院林學院指導教師指導教師荀守華研究員荀守華研究員孫居文副教授孫居文副教授關于學位論文原創(chuàng)性和使用授權的聲明本人所呈交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權山東農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文，同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫，并向社會公眾提供信息服務。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文作者簽名導師簽名日期

簡介：陳燕燕豬水腫病毒素STX2E基因突變體原核表達及重組蛋白的免疫生物學特性研究豬水腫病毒素STX2E基因突變體原核表達及重組蛋白的免疫生物學特性研究摘要豬水腫病EDEMADISEASEOFSWINE，ED是斷奶仔豬的一種急性致死性疾病，主要由產(chǎn)II型志賀毒素變異體E亞型STX2E，SHIGATOXIN2E的大腸桿菌引起。STX2E是致水腫病大腸桿菌的主要毒力因子?？苟舅孛庖呖梢员Ｗo動物免受產(chǎn)毒素大腸桿菌的侵襲，并已經(jīng)成為水腫病研究的重點之一，毒素或類毒素的獲取是研究抗毒素免疫機制及效果的關鍵。制備類毒素的方法主要有兩種一種利用提取的天然STX2E，然后利用化學滅活的方法制備，但研究表明利用該法制備的類毒素免疫動物會產(chǎn)生影響動物體重增加或導致體重下降的副作用；另外一種是采用基因工程的方法，突變STX2E的酶活性位點，獲得基因工程法生產(chǎn)的類毒素，這種類毒素不需使用化學試劑滅活，對動物的體重等生產(chǎn)性能沒有影響。根據(jù)GENEBANK收錄的STX2EA、B亞基的基因設計了四對引物。一對用于擴增出STX2EB不包含信號肽的基因序列，兩對用于用PCR法將STX2EA的第167位編碼GLU的密碼子突變?yōu)榫幋aGLN的密碼子，第170位編碼ARG的密碼子突變?yōu)榫幋aLYS的密碼子，再用最后一對引物用PCR重疊延伸法擴增出突變的不包含信號肽的STX2EA基因序列。將PCR產(chǎn)物分別與克隆載體PMD18一TSIMPLEVECTOR相連接，重組克隆分別命名為PMD18TAINU和PMD18TB，經(jīng)酶切鑒定正確后進行序列測定，并將測序結果與GENEBANK上收錄的STX2E的A、B基因分別進行比對，A亞基的基因序列同源性結果在99O％～996％之間，其編碼的氨基酸序列的同源性為983％～99O％，且成功地將第167位的GLU突變?yōu)镚LN，第170位的ARG突變?yōu)長YS；B亞基的基因序列同源性為995％～100％，其編碼的氨基酸序列的同源性為986％～100％。提取克隆載體PMD18一TAMU和PMD18一TB，分別對其進行雙酶切，獲得STX2EAMU和STX2EB基因片段，將兩目的片段與原核表達載體PETDUET1連接，構建同時表達STX2EA亞單位突變體和B亞單位的質粒載體，命名為PETABMU，使用兩個啟動子分別驅動A亞單位和B亞單位在同～載體上表達，將重組質粒轉化入大腸桿菌陳燕燕豬水腫病毒素STX2E基因突變體原核表達及重組蛋白的免疫生物學特性研究PROKARYOTICEXPRESSIONOFSHIGATOXIN2EGENEMUTANTANDSTUDYOFIMMUNOBIOLOGICALPROPERTIESOFRECOMBINANTPROTEINSABSTRACTEDEMADISEASEEDOFSWINEISALLACUTEDEADLYDISEASEOFWEANINGPIGLETS，ITRESULTSFROMECOTIPRODUCINGSHIGATOXIN2ESTX2ESTX2EISTHEMAJORTOXICFACTOROFECOLIWHICHCANRESULTINEDEMADISEASEOFSWINEANTITOXICIMMUNITYCANPROTECTANIMALSFROMINFECTIONOFTOXIGENICECOLI，ANDITALREADYBECAMEONEOFTHEFOCALPOINTOFEDSTUDYTHEEXTRACTIONOFTOXINORTOXOIDISTHEKEYOFTHEMECHANISMANDEFFECTOFANTITOXICIMMUNITYSTUDYTHEREARETWOMETHODSOFTOXOIDPREPARATIONONEMETHODISINACTIVATENATURALSTX2EBYCHEMICALMETHOD，BUTTHETOXOIDPREPAREDBYTHISMETHODCANPRODUCESIDEEFFECTSOFDISTURBINGWEIGHTINCREASEORLEADINGTOWEIGHTDECREASEOFANIMALS；THEOTHERMETHODISMUTATETHEENZYMEACTIVITYSITESOFSTX2ETOOBTAINTOXOIDBYGENETICENGINEERING，ANDTHISKINDOFTOXOIDDOESN’TNEEDTOINACTIVATEBYCHEMICALMETHODOREFFECTANIMALS’WEIGHTOROTHERPRODUCTIONPROPERTIESACCORDINGTOTHEA、BGENEOFSTX2EFROMGENBANK，F(xiàn)OURPAIRSOFPRIMERSWEREDESIGNEDTHEONEOFTHEFOURPAIRSWASUSEDTOAMPLIFYTHESEQUENCEOFBSUBUNITDELETINGITSSIGNALPEPTIDETWOPAIRSOFPRIMERWASUSEDTOAMPLIFYGENETICALLYMUTATIVESTX2EASUBUNITBYPCR，INTRODUCINGDOUBLEPOINTMUTATIONSATRESIDUES167GLUGINAND170ARGLYSTHEFINALPAIROFPRIMERWASUSEDTOAMPLIFYTHESEQUENCEOFMUTATIVESTX2EASUBUNITDELETINGITSSIGNALPEPTIDEUSINGOVERLAPEXTENSIONPCRTECHNIQUETHEPCRPRODUCTSWERECLONEDINTOCLONINGVECTORPMD18TSIMPLEVECTORANDRESULTINGRECOMBINANTSWERECALLEDPMD18TAINUANDPMD18TBTHESEQUENCINGRESULTSHOWEDTHATTHENUCLEOTIDEHOMOLOGYOFAUNITWAS99。0％996％ANDAMINOACIDHOMOLOGYWAS983％990％COMPAREDWITHTHESTX2EAGENEFROMGENBANK，ANDSUCCEFULLYGOTPOINTMUTATIONSATRESIDUES167GLUGINAND170ARGLYS；THENUCLEOTIDEHOMOLOGYOFBUNITWAS995％100％ANDAMINOACIDHOMOLOGYWAS986％100％COMPAREDWITHTHESTX2EBGENEFROMGENBANKCOLLECTTHERECOMBINANTPLASMIDSPMD18一TAMUANDPMD18TB，ANDOBTAINSTX2EAMU