紫杉醇前體生物合成的分子生物學(xué)和抗癌萜類吲哚生物堿的代謝工程.pdf_第1頁(yè)
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1、紫杉醇的生物合成來(lái)源于經(jīng)典的MVA途徑和新近發(fā)現(xiàn)的DXP途徑.為研究紫杉醇前體生物合成途徑的分子生物學(xué),該文首先建立了從成熟的曼地亞紅豆杉等裸子植物的各種成熟組織中提取高質(zhì)量RNA的方法;在此基礎(chǔ)上,采用RACE方法從曼地亞紅豆杉中首次克隆了MVA途徑上三個(gè)重要基因的全長(zhǎng)cDNA,包括tmhmgr(曼地亞紅豆杉3-羥基-3-甲基戊二酰CoA合成酶基因),tmfps(曼地亞紅豆杉法呢基焦磷酸合成酶基因),tmipi(曼地亞紅豆杉異戊烯焦磷

2、酸異構(gòu)酶基因);同時(shí)克隆了DXP途徑上的兩個(gè)限速酶tmdxs(曼地亞紅豆杉5-磷酸脫氧木酮糖合成酶基因)和tmdxr(曼地亞紅豆杉5-磷酸脫氧木酮糖還原異構(gòu)酶基因)的全長(zhǎng)cDNA;克隆了為紫杉醇提供二萜骨架(20碳原子)的tmggpps(曼地亞紅豆杉香葉基香葉基焦磷酸合成酶基因)的基因組序列,并獲得全長(zhǎng)cDNA;由于這些基因都是首次從裸子植物中獲得,故對(duì)這些基因及其編碼的酶進(jìn)行了詳盡的生物信息學(xué)分析.喜樹堿、羥基喜樹堿、長(zhǎng)春花堿和長(zhǎng)春新

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