不同解磷菌配比解磷能力比較及解無機(jī)磷基因的克隆.pdf

1、磷素是植物生長(zhǎng)的重要限制因子，單純依靠大量施用磷肥來解決磷素缺乏已經(jīng)出現(xiàn)資源浪費(fèi)、環(huán)境污染等諸多弊端。解磷微生物在土壤中磷循環(huán)相關(guān)的生物學(xué)系統(tǒng)中擔(dān)任著重要的角色，它可以將難溶磷素轉(zhuǎn)化為可溶性磷，提高磷肥利用率，本論文圍繞解磷微生物開展相關(guān)工作，取得以下結(jié)果： 本試驗(yàn)通過平板檢測(cè)法、磷鉬藍(lán)比色法對(duì)黑龍江大學(xué)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供的九株解磷菌的解磷能力進(jìn)行檢測(cè)，以菌種和解磷能力為依據(jù)，選取五株解磷能力較強(qiáng)的菌株HDBP2、HDBP5

2、、HDBP6、HDFPI和HDAPI，分別兩兩以1:1，1:2和2:1的體積進(jìn)行配比，測(cè)定配比后培養(yǎng)液中可溶性磷含量并比較解磷能力。 試驗(yàn)表明，試驗(yàn)用所有解磷菌株都能在以Ca<,3>(PO<,4>)<,2>或卵磷脂為唯一磷源的平板中形成菌落，說明這九株菌都能分解Ca<,3>(PO<,4>)<,2>或卵磷脂供其自身生長(zhǎng)發(fā)育。在無機(jī)磷平板上，HDBP5、HDBP6、HDFP1和HDAP1的菌落的四周均出現(xiàn)了較明顯的透明圈：在有機(jī)磷

3、平板上，HDBP5和HDAP1的菌落的四周出現(xiàn)了較明顯的透明圈。液體培養(yǎng)時(shí)，以HDBP2：HDBP5=2:1時(shí)解無機(jī)磷能力最強(qiáng)，培養(yǎng)液中可溶性磷含量可達(dá)到90.25μg/mL。 目前對(duì)解磷細(xì)菌解無機(jī)磷基因的研究較少，公開發(fā)表的文章局限于細(xì)菌產(chǎn)酸途徑中的調(diào)節(jié)基因。其中PQQ(吡咯喹啉醌)合成基因(pqqE)最具代表性，其編碼產(chǎn)物可以促進(jìn)細(xì)菌對(duì)無機(jī)磷的溶解利用。本試驗(yàn)根據(jù)GenBank上發(fā)表的蠟狀芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌的pqqE

4、基因序列，利用primer premier 5軟件設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行了HDBP1、HDBP2、HDBP4和HDBP5四株菌的pqqE基因的克隆。 通過對(duì)HDBP1和HDBP2進(jìn)行細(xì)菌解無機(jī)磷基因的克隆得到了大小為494bp的PqqE基因片段，分別與GenBank中蘇云金芽孢桿菌的pqqE基因序列比對(duì)，同源性分別達(dá)到93.52％和93.72％；通過對(duì)HDBP4和HDBP5進(jìn)行細(xì)菌解無機(jī)磷基因的兜降得到了大小為494bp的pqqE基因