多種解磷、解鉀、固氮菌混合發(fā)酵制備菌糠菌肥的研究.pdf

1、本文旨在篩選具有解磷、解鉀和固氮能力的微生物菌種，并以篩選到的微生物為菌種來源，用廢棄菌糠進(jìn)行混菌發(fā)酵制備菌糠菌肥，檢驗菌糠菌肥對農(nóng)作物生長的促進(jìn)作用，實現(xiàn)廢棄菌糠的再利用。
　　首先從鹽堿地土壤中篩選出4種解磷菌（P5、P7、P8、P9），4種解鉀菌（K5、K8、K9、K10）和4種固氮菌（N3、N5、N7、N9），分析了菌株的解磷能力，解鉀能力和固氮能力，并對菌株耐高溫、高銨濃度、高鹽濃度和pH值條件進(jìn)行了研究。通過分子鑒定手

2、段結(jié)合形態(tài)分類學(xué)分別對篩選出的12株菌做了16S rDNA序列解析，初步的推斷P5為Pseudomonas putida，P7為Bacillus megaterium, P8為Pseudomonasfluoresens，P9為Bacillus subtilis；K5為Actinomycete,，K8為Bacillus amyloliquefaciens，K9為Bacillus subtisli，K10為Bacillus lichenif

3、ormis；N3為Micrococcus，N5、N7、N9為Bacillus licheniformis。
　　其次初步研究了解磷菌P8的解磷機理，發(fā)現(xiàn)解磷量，有機酸量和pH值三者之間具有相關(guān)性。在發(fā)酵第3d，解磷量達(dá)到最大值412.85mg/L，此時有機酸量也達(dá)到最高值389.22mg/L，p H值處于最低值5.2，初步證明產(chǎn)有機酸是解磷菌P8的一種解磷機理。
　　進(jìn)而以菌糠為載體，選用篩選到的12株菌與實驗室保藏的解磷菌

4、 FL7、解鉀菌K3和固氮菌N1共15株菌進(jìn)行混菌發(fā)酵，制備菌糠菌肥。通過單因素實驗確定了半固態(tài)混菌發(fā)酵的最適溫度為30℃，培養(yǎng)基最適初始pH值為7，培養(yǎng)基最適初始含水量為70％，最適轉(zhuǎn)速為200rp m，最適裝載量為400 g/L，最適顆粒直徑為60目，最適氮源為蛋白胨，最適氮源濃度為0.2%，最適無機鹽為磷酸氫二鉀，最適無機鹽濃度為0.2%。發(fā)現(xiàn)解磷量、解鉀量和固氮量的變化曲線與菌體生長變化曲線具有正相關(guān)性。15株菌等量混合后接種到

5、半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，以解磷量、解鉀量和固氮量為指標(biāo)對培養(yǎng)基成分以及發(fā)酵培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，當(dāng)溫度為31.4℃，pH值為7.08，含水量為73.2%時，可得最大解磷量745.861mg/L；當(dāng)溫度為30.9℃，pH值為7.13，含水量為73.0%時，可得最大解鉀量1467.64μg/L。當(dāng)溫度為31.2℃，pH值為7.15，含水量為74.5%時，可得最大固氮量1511mg/L。在溫度30.9℃~31.4℃，pH值7.08~7.15，含水量73

6、.0%~74.5%范圍下進(jìn)行驗證試驗，測得解磷量為744.745 mg/L，解鉀量為1463.96μg/L，固氮量為1503.79 mg/L。
　　最后進(jìn)行了盆栽實驗，發(fā)現(xiàn)多種解磷菌、解鉀菌、固氮菌制備的復(fù)合菌肥可使土壤中的有效磷含量、有效鉀含量、總氮含量和植物干重分別上升至113.37 mg/K g土壤，有效鉀含量達(dá)367.6137 mg/K g土壤，總氮含量達(dá)731.461 mg/Kg土壤，植物干重達(dá)0.5478g，分別比使用