基于功能核酸的新型熒光傳感器研究.pdf

1、核酸能夠攜帶和傳遞遺傳信息以及指導蛋白質的合成，在生物體中起著至關重要的作用。然而特定序列的核酸分子還能夠識別目標分子或催化某些反應，基于核酸的特異識別作用可以設計和發(fā)展各種快速簡單的生物分析方法。本論文利用光學分析方法，研究了熒光分子與G-四鏈體和三鏈DNA結構之間的作用，并構建了用于相應離子檢測的生物傳感器。具體內(nèi)容如下:
　　(1)系統(tǒng)地研究了核黃素與一系列可形成G-四鏈體的富G序列之間的相互作用。研究發(fā)現(xiàn)核黃素與PW17、

2、G3T2、AGRO100、G3T、G3T4TT之間的相互作用較強，作用后熒光淬滅最高達90％。與ssDNA、dsDNA相比，核黃素對G-四鏈體結構有高度的特異性，可作為一種新的G-四鏈體熒光配體。核黃素與各種序列的G-四鏈體間的作用不同，對平行或反平行的不同結構并沒有明顯的選擇性區(qū)別。比較了PW17分別與核黃素、FMN和FAD間的作用，發(fā)現(xiàn)PW17對核黃素有較強的選擇性，可作為核黃素的一種良好的適配體序列。
　　(2)基于核黃素與

3、PW17間的作用對K+有高度依賴性，設計了簡單快速的高靈敏K+熒光傳感器。利用該傳感器對尿樣中的K+含量進行了檢測，測得的加標回收率為84％～109％，說明其適用于實際生理樣品的檢測。
　　(3)研究了熒光分子鹽酸小檗堿(berberine)和DNA三鏈之間的作用，發(fā)現(xiàn)berberine能夠嵌入Ag+參與形成的三鏈結構中，與其和酸性條件下形成的三鏈作用類似，熒光強度成倍增大。利用該方法檢測Ag+時，在0～15μM內(nèi)有良好的線性關系