葛根素O-W、W-O型微乳口服吸收機(jī)理的初步研究.pdf

1、一、目的
　　 葛根素(Puerarin，Pue)是從豆科植物野葛或甘葛藤中提取出的一種異黃酮類化合物，臨床上廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療。由于葛根素在水中的溶解度小，口服生物利用度低等原因，使其臨床應(yīng)用受到了一定的限制。微乳(Microemulsion，ME)能顯著提高水難溶性藥物的口服生物利用度，是繼脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納米粒等發(fā)展起來(lái)的含脂質(zhì)新型遞藥系統(tǒng)。微乳主要分為O/W和W/O型，具有熱力學(xué)穩(wěn)定、粒徑小且滲透力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，同

2、時(shí)可避免胃腸道中的酶降解而具有很好的應(yīng)用前景?，F(xiàn)有研究報(bào)道，O/W和W/O型口服微乳能不同程度的提高藥物的生物利用度，但其口服吸收機(jī)制尚未闡明。本文以葛根素為模型藥物制備了葛根素O/W-ME、W/O-ME，擬通過(guò)乳糜微粒流阻滯法阻滯大鼠淋巴的轉(zhuǎn)運(yùn)，以考察兩種微乳口服后經(jīng)淋巴途徑轉(zhuǎn)運(yùn)的比例，探討微乳口服吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的通道，并通過(guò)大鼠在體原位胃灌注和在體單向腸灌流實(shí)驗(yàn)分別考察兩種類型的微乳在胃和腸道中的吸收情況及其差異，為闡述口服微乳吸收機(jī)理提

3、供理論依據(jù)，也為微乳制劑的設(shè)計(jì)提供參考。
　　 二、方法與結(jié)果
　　 1.葛根素O/W、W/O型微乳經(jīng)淋巴途徑轉(zhuǎn)運(yùn)的研究
　　 通過(guò)乳糜微粒流阻滯技術(shù)將大鼠的淋巴途徑阻滯后，對(duì)葛根素O/W-ME、W/O-ME經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的情況進(jìn)行了考察。結(jié)果表明，葛根素O/W-ME、W/O-ME和混懸液在大鼠淋巴阻斷組和淋巴未阻斷組的Cmax分別為0.486±0.098和1.029±0.208、0.618±0.102和1.966±

4、0.362、0.408±0.048和0.740±0.099，AUC0→∞分別為4.008±1.407和6.998±0.683、4.373±0.326和7.669±1.866、3.679±2.871和3.939±0.980。由各組的AUC0→∞分別計(jì)算出其經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的比例，其中葛根素O/W-ME、W/O-ME經(jīng)淋巴途徑轉(zhuǎn)運(yùn)的比例分別為43.0％和42.7％，而混懸液組只有6.6％(P＜0.05)，結(jié)果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME均

5、能顯著地提高葛根素經(jīng)淋巴途徑轉(zhuǎn)運(yùn)的比例，證實(shí)了微乳促進(jìn)藥物經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)是微乳提高藥物口服生物利用度的重要原因之一。
　　 2.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在體胃吸收研究
　　 建立了HPLC法測(cè)定胃灌注液中葛根素濃度的測(cè)定方法，結(jié)果提示胃灌流液不干擾葛根素的測(cè)定，該方法專屬性好，線性關(guān)系、精密度、回收率和穩(wěn)定性均符合生物樣品的分析要求。采用大鼠在體原位胃灌注實(shí)驗(yàn)考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中的吸收情況，結(jié)

6、果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中2h的吸收百分率大于葛根素混懸液組(P＜0.05)，W/O-ME與O/W-ME相比，有促進(jìn)葛根素在胃中的吸收趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果表明葛根素微乳可增加葛根素在胃中的吸收，且由于W/O-ME的助表面活性劑為乙醇，因此W/O-ME更能促進(jìn)葛根素在胃中的吸收。
　　 3.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在體腸吸收研究
　　 通過(guò)繪制偽三元相圖制備了不同碳鏈長(zhǎng)度油相

7、的葛根素W/O-ME，并對(duì)其進(jìn)行了初步質(zhì)量評(píng)價(jià)，篩選出了三種不同碳鏈長(zhǎng)度油相的W/O-ME: EO-W/O-ME、IPM-W/O-ME、和乙酸乙酯-W/O-ME。采用大鼠在體單向腸灌流法考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在大鼠體內(nèi)的腸吸收特征，并分別對(duì)各自的吸收機(jī)制進(jìn)行了初步探討，其中重點(diǎn)考察了含不同碳鏈長(zhǎng)度油相的W/O-ME在不同腸段的吸收特征。研究結(jié)果顯示，不同葛根素制劑在腸道中的Ka和Papp值大小約為:葛根素W/O-ME＞O

8、/W-ME＞混懸液(P＜0.05)，其中不同碳鏈長(zhǎng)度油相的葛根素W/O-ME吸收表現(xiàn)為吸收率與油相碳鏈長(zhǎng)度呈正相關(guān)關(guān)系(EO-W/O-ME＞IPM-W/O-ME＞乙酸乙酯-W/O-ME)(P＜0.05)，結(jié)果提示W(wǎng)/O-ME與O/W-ME相比更能促進(jìn)葛根素的腸道吸收。
　　 三、結(jié)論
　　 葛根素W/O-ME、O/W-ME與口服混懸液組相比，微乳能增加葛根素經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的比例，提高葛根素的口服生物利用度;同時(shí)微乳還增加了葛