柑橘采后致病青霉的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、青霉菌是柑橘類水果采后主要致病菌，也可使多種果蔬腐爛。目前，國(guó)內(nèi)外大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，引起柑橘采后腐爛的青霉菌為意大利青霉(Penicillium italicumWehmer)與指狀青霉(Penicillium digitatum Sacc)兩種，但也有人提出不同的看法。本文對(duì)分離獲得的柑橘采后致病青霉菌不同菌株間的形態(tài)學(xué)特征、致病力及生物學(xué)特性等方面進(jìn)行綜合性了研究，以期為柑橘采后致病青霉的快速鑒定及其病害的及早防治提供了有益的參考。主

2、要研究結(jié)果如下： 1.柑橘采后致病青霉菌的鑒定 本研究應(yīng)用rDNA-ITS分子標(biāo)記分析和傳統(tǒng)真菌形態(tài)學(xué)鑒定相結(jié)合的方法，對(duì)從不同產(chǎn)地分離獲得的能引起柑橘貯藏期間腐爛的8株青霉菌(L、Q、PL、PQ、CL、CQ、PTY-1、PTY-2)進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明：菌株P(guān)L與CL為指狀青霉(Penicillium digitatum Sacc)，菌株L為擴(kuò)展青霉(Penicillium expansum(1ink)thom)，菌株

3、Q為產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenus Thom)，PQ、CQ、.PTY-1、PTY-2這4個(gè)菌株均為波蘭青霉(Penicillium polonicum Thom)。 2.青霉致病性 試驗(yàn)結(jié)果表明：在一定范圍內(nèi)，青霉菌接種量與病害發(fā)生率呈正相關(guān)。分離到的8株柑橘致病青霉菌中，P.digitatum(PL、CL)對(duì)柑橘果實(shí)致病能力最強(qiáng)，條件適宜的情況下，從果實(shí)發(fā)病到全果腐爛只要7d～10d時(shí)間；其次

4、為P.expansum(L)；再次是P.polonicum(PQ、CQ、PTY-1、PTY-2)；而P.chrysogenum(Q)的致病力最弱。傷口和帶菌量是柑橘采后致病的關(guān)鍵因子。 3.生物學(xué)特性 1)同一菌株在不同培養(yǎng)基上或不同菌株在同一培養(yǎng)基上培養(yǎng)，平均日生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量、菌落顏色以及菌落厚度有顯著不同。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基既有利于青霉菌菌絲體的良好生長(zhǎng)，也有利于病原孢子的大量產(chǎn)生。 2) 青霉菌生長(zhǎng)溫度范

5、圍在5℃～35℃，菌絲體生長(zhǎng)和孢子形成適宜溫度為15℃～3015℃，其中P.戶digitatum菌絲體生長(zhǎng)最適溫度為20℃，產(chǎn)孢的最適溫度為25℃；P.chrysogenus和P expansum菌絲體生長(zhǎng)和孢子產(chǎn)生的最適溫度均為25℃；P.polonicum均為20℃。對(duì)于同一青霉菌株來說，同一溫度范圍內(nèi)，菌絲體生長(zhǎng)快慢與產(chǎn)孢量基本成正比。 3)光照條件對(duì)青霉菌菌絲體的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢能力的影響差異并不顯著。 4)青霉菌對(duì)多

6、種單糖、雙糖和多糖等碳源及有機(jī)氮、無機(jī)氮均可利用，其中P.digitatum、P.polonicum、P.expansum、P.chrysogenus最適碳源分別為葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖；最適氮源均為蛋白胨和酵母浸膏，硫酸銨和氯化銨會(huì)抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)。 5)致死溫度測(cè)定試驗(yàn)表明：青霉菌.P.digitatum與P.expansum致死溫度在70℃左右。P. polonicum的4個(gè)菌株之間存在一定差異，但并不顯著，致死溫度

7、范圍為75℃～85℃。 6) 隨著紫外輻照時(shí)間的延長(zhǎng)，青霉菌孢子致死率逐漸增加。相同紫外輻照條件下，青霉菌菌株間孢子致死率差異顯著。經(jīng)紫外輻照5min，8株青霉菌菌株的孢子致死率在40.00％～80.00％范圍內(nèi)，其中P.chrysogenum的抗紫外能力最強(qiáng)，輻照9min的孢子致死率儀為71.43％；P.expansum的抗紫外能力最弱，致死率高達(dá)90.00％；P.digitatum(PL與CL)致死率分別為88.00％，84