溶磷菌YM3-2S溶磷特性及溶磷基因的克隆.pdf

1、磷是生物生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)元素，施用磷素一直是保證農(nóng)業(yè)生產(chǎn)增產(chǎn)的重要手段之一，但磷素的大量應(yīng)用也產(chǎn)生了許多環(huán)境問(wèn)題。溶磷微生物可將土壤中難溶性的磷酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性鹽供作物生長(zhǎng)利用，能提高磷肥的利用率，減少土壤對(duì)磷酸鹽的吸附固定，避免磷肥過(guò)量使用造成環(huán)境污染。因此從土壤中篩選高效溶磷微生物生產(chǎn)生物肥料，以減少磷肥施用量，對(duì)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，具有重要的生態(tài)和社會(huì)意義。 本實(shí)驗(yàn)以四川省7個(gè)市縣所采集的土壤為材料，從中分離出具有溶磷能力的細(xì)

2、菌，并對(duì)其進(jìn)了鑒定，對(duì)其生長(zhǎng)特性和溶磷特性進(jìn)行研究，其結(jié)果如下： 1.從土壤樣品中分離純化出一株高效無(wú)機(jī)溶磷細(xì)菌YM3-2S，對(duì)它的生理生化性狀及其16S rDNA進(jìn)行序列分析后，將其鑒定為洋蔥伯克霍爾德菌Burkholderia cepacia。 2.對(duì)該菌株的生長(zhǎng)特性和溶磷特性研究表明，YM3-2S代時(shí)短，其代時(shí)為25min，生長(zhǎng)迅速，產(chǎn)酸能力強(qiáng)，對(duì)磷礦粉的最大解磷量達(dá)40.96 mg/L，其溶磷量隨發(fā)酵液pH值降低

3、而增加，其溶磷能力與其產(chǎn)酸能力密切相關(guān)。 3.抑菌實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，菌株YM3-2S對(duì)玉米大斑病，玉米小斑病，玉米彎孢病，禾谷廉刀病等十幾種病原真菌具有抑制作用。 4.通過(guò)紙層析對(duì)YM3-2S的發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分析，推測(cè)其可能只含有一種有機(jī)酸成分，有機(jī)酸的成分有待進(jìn)一步研究。 5.盆栽實(shí)驗(yàn)中不同的處理測(cè)定了雅安石灰性紫色土和遂寧石灰性紫色土中速效磷下降順序?yàn)镃K>CK+NK>CK+磷礦粉+NK>CK+YM3-2S+NK

4、>CK+NK+YM3-2S+磷礦粉+食用菌發(fā)酵料。表明YM3-2S能夠溶解土壤中難溶性磷，從而增加土壤中磷的有效性，改善了土壤供磷情況，促進(jìn)了土壤中無(wú)效磷的溶解。 6.對(duì)溶無(wú)機(jī)磷基因gabY基因克隆后，得到了一個(gè)陽(yáng)性克隆pD6034，核苷酸序列測(cè)定表明，D6034與U10242具有97.49％的一致性。核苷酸序列推導(dǎo)的D6034的編碼產(chǎn)物具有28個(gè)氨基酸的信號(hào)肽，說(shuō)明該基因編碼產(chǎn)物能直接分泌到胞外。通過(guò)SDS-PAGE分析D60