水稻短根突變體Osksr4基因的克隆及功能的初步研究.pdf

1、β-酮脂酰-ACP合酶在脂肪酸代謝中發(fā)揮重要作用，同時也影響了水稻根系的生長發(fā)育。我們從水稻中克隆獲得一個控制水稻根系長度的OsKSR4基因。該基因位于第6染色體上，由465個氨基酸組成，編碼一個大小為49kD的β-酮脂酰-ACP合酶（KASI）。它包含7個外顯子和6個內(nèi)含子，點突變（C突變?yōu)門）發(fā)生在ATG后770bp處。
　　該基因的突變嚴重影響植株的生長發(fā)育，尤其是水稻根系，突變體主根長度不及野生型的15％，側(cè)根和不定根伸長

2、也受到抑制，分蘗數(shù)減少，花粉活力降低，結(jié)實率下降，產(chǎn)量降低，葉片寬度減少。染色實驗發(fā)現(xiàn)突變體分生區(qū)長度僅為野生型的60%，且積累了大量的活性氧；樹脂切片顯示突變體根尖細胞長度減少，伸長區(qū)和成熟區(qū)的細胞排列較規(guī)則。我們認為，基因的突變導(dǎo)致活性氧在根尖分生區(qū)和側(cè)根的累積，影響了伸長區(qū)細胞的伸長和成熟區(qū)細胞的發(fā)育，導(dǎo)致根系變短。
　　半定量RT-PCR和GUS染色分析表明，OsKSR4基因在根、莖、葉、花和種子上都有表達，除花外其他表達

3、都較強，可見該基因呈組成型表達。把P35S::OsKSR4::GFP載體轟擊到洋蔥表皮細胞，最終將該蛋白定位在質(zhì)體上。
　　脂質(zhì)含量測定與組分分析實驗證實該基因參與了脂肪酸的合成調(diào)控途徑，影響某些脂肪酸的去飽和途徑，同時也影響了甾醇的含量。具體的調(diào)控方式目前尚不清楚，還需對此做進一步的深入研究。由于 Osksr4突變體葉片基本正常，但根系發(fā)育受到明顯的抑制，與已發(fā)現(xiàn)的擬南芥kasI突變體的表現(xiàn)不太相似，推測KASI基因在單子葉和雙