人早孕絨毛組織間充質干細胞生物學特性鑒定及其在大鼠心梗修復中作用的實驗研究.pdf

1、蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不含其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名：日期：型q生人早孕絨毛組織問充質干細胞生物學特性鑒定及其在大Itt警梗修復中作用的實驗研

2、究中文摘要中文摘要目的：建立人6—8周新鮮早孕絨毛組織來源的間充質干細胞(Mesenchymalstemcellsderivedfromfirsttrimesterchorionicvilli，F(xiàn)CMSCs)及足月胎盤絨毛來源間充質干細胞(Mesenchymalstemcellsderivedfromtermchorionicmembrane，TcMscs)體外擴增體系，體外比較人F—CMSCs、TCMSCs向多種細胞分化的潛能及形成毛

3、細血管樣結構能力。建立大鼠心肌梗死模型兩周后，經開胸在左心室壁梗死區(qū)及邊緣區(qū)注射人F—CMSCs、TCMSCs，觀察其改善心功能的效果，進一步研究其作用機制。方法：選取正常健康孕婦68周的藥流術排出的新鮮早孕絨毛組織、剖腹產足月胎兒的胎盤組織，分離培養(yǎng)人FCMSCs、TCMSCs細胞，流式細胞儀檢測人F—CMSCs、TCMSCs細胞表型、特異性染色檢測人FCMSCs、TCMSCs三系分化潛能、毛細血管形成實驗檢測人兩群MSC細胞體外成血

4、管能力：本實驗采用結扎大鼠左冠狀動脈前降支的方法建立大鼠心肌梗死模型，建模成功兩周后，開胸在心室壁梗死區(qū)及周圍區(qū)行細胞移植。實驗動物分為三組：空白對照組；TCMSCs移植組；F—CMSCs移植組。細胞移植四周后，熒光顯微鏡下觀察GFPF—CMSCs細胞在大鼠局部心梗區(qū)存活情況，超聲心動圖檢查觀察大鼠心臟功能的改善情況。結果：1流式細胞檢測表明，培養(yǎng)的P3代人FCMSCs、TCMSCs均高表達CD73、CD90、CDl05，不表達血系細胞

5、標志CDl4、CD34、HLADR，不表達滋養(yǎng)細胞標志CKl8。2三系分化潛能測定表明人F—CMSCs具有和人TCMSCs相似的分化潛能，經成骨誘導后VOIlKossa染色可見細胞呈集落生長并出現(xiàn)鈣結節(jié)；經成脂肪誘導，細胞內有明顯的脂滴出現(xiàn)，油紅O染色陽性；經成軟骨誘導，甲苯胺藍染色可見細胞被染成藍色。3流式細胞儀分析表明，體外培養(yǎng)的人FCMSCs表達VEGF受體l，2即FLT1和KDR，向內皮細胞誘導后，人FCMSCs表達內皮細胞標志