輻射誘導(dǎo)重組質(zhì)粒pEgr-P16在黑素瘤B16細胞中的表達特性與凋亡作用.pdf

1、背景和目的:根據(jù)電離輻射可誘導(dǎo)早期生長反應(yīng)因子-1(Egr-1)基因啟動子激活、啟動下游基因表達的機制和抑癌基因p16抑瘤作用,研究pEgr-p16重組質(zhì)粒在轉(zhuǎn)染的黑素瘤B16細胞中的輻射誘導(dǎo)表達特性,驗證其聯(lián)合放射治療體外抑制B16細胞增殖的作用,為臨床上對黑色素瘤進行基因-放射聯(lián)合治療奠定基礎(chǔ)。
　　材料和方法:在已構(gòu)建了含有放射敏感性啟動子的Egr-1和人源性p16基因重組表達質(zhì)粒pEgr-p16基礎(chǔ)上,將脂質(zhì)體包裹的pEg

2、r-p16重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染B16細胞株中;采用定量PCR方法檢測不同劑量X射線誘導(dǎo)后p16的表達和同一劑量X射線誘導(dǎo)下p16的表達時程;采用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率的變化;用MTT法檢測pEgr-p16基因協(xié)同放療治療后B16細胞的存活情況。
　　結(jié)果:研究結(jié)果表明pEgr-p16重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染B16細胞,不同劑量X射線均可誘導(dǎo)p16表達增強,為假照組的3.78~6.67倍(P<0.01);2 Gy X射線照射后,p16表達隨時間延長

3、而逐漸增強,在照射后72h達到最高值。p16基因聯(lián)合放射可誘導(dǎo)B16細胞凋亡,凋亡率高于單純照射組和單純基因誘導(dǎo)組(P<0.05~0.01);轉(zhuǎn)染 pEgr-p16質(zhì)粒的細胞經(jīng)2 Gy X射線照射,8 d后細胞數(shù)明顯低于同時間其它實驗組(P<0.05~0.001)。
　　結(jié)論:pEgr-p16基因-放射聯(lián)合治療有明顯的抑制黑素瘤B16細胞生長的作用,其作用優(yōu)于單純給予射線或基因轉(zhuǎn)染。本研究結(jié)果為探索新的腫瘤治療方案,提高腫瘤放射治