水稻msp1-4和Osfh5突變體的遺傳與定位分析.pdf

1、為了研究水稻花藥的發(fā)育機(jī)理和植物細(xì)胞骨架的裝配及其調(diào)控機(jī)制，本課題利用圖位克隆、載體構(gòu)建、RT-PCR等分子生物學(xué)手段并結(jié)合宏觀表型觀測的方法，對二個由水稻粳稻品系9522輻射誘變而來的隱性單基因控制的突變?nèi)后wmsp1-4和Osfh5進(jìn)行了研究。 通過對粳稻9522輻射誘變，得到一隱性核不育的突變體msp1-4，msp1-4與秈稻品系龍?zhí)馗雜交，并通過自交獲得F2代分離群體進(jìn)行遺傳定位。我們將該基因座位定位在分子標(biāo)記WY4和W

2、Y8之間，相距0.8cM，物理距離247kb。測序分析表明這247kb中MSP1基因的編碼區(qū)在第260bp到269bp之間發(fā)生了10個堿基的缺失。對msp1-4的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明該突變體和已經(jīng)報道的msp1突變體的表型基本一致。為了分析水稻其它花藥發(fā)育相關(guān)基因在msp1-4中的表達(dá)變化，通過半定量RT-PCR檢測我們發(fā)現(xiàn)影響絨氈層和花粉發(fā)育的重要基因UDT1和GAMYB的表達(dá)在msp1-4中降低，這表明UDT1和GAMYB基因在調(diào)控花

3、藥發(fā)育過程中可能位于MSP1基因的下游。這為進(jìn)一步研究MSP1基因的功能和揭示水稻雄性不育的分子機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。 我們把用同樣方法獲得的突變體Osfh5與秈稻廣陸矮4號雜交，并用其自交獲得F2代分離群體進(jìn)行遺傳定位。通過遺傳定位方法，首先將突變基因座位定位在水稻第7號染色體SSR標(biāo)記RM234和RM3423之間。為了對OsFH躔位進(jìn)行精細(xì)定位，我們在RM234和RM3423之間發(fā)展了9對有多態(tài)性InDel分子標(biāo)記，將該基因座位定