腰骶部顯性脊柱裂胎鼠臀肌運動終板及肌發(fā)育形態(tài)學觀察.pdf

1、目的：觀察腰骶部顯性脊柱裂胎鼠臀肌運動終板及肌發(fā)育形態(tài)學變化，為腰骶部顯性脊柱裂臀肌可否移植提供理論參考。
　　 方法：模型制作：將孕9d健康昆明種小白鼠隨機分為平行組(5只)、對照組(5只)和實驗組(15只)。于妊娠9d0h給予實驗組孕鼠三次連續(xù)灌服全反式維甲酸，劑量：3×10ml/kg.bw，用藥時間依次間隔6h。對照組同法灌服等劑量黃豆油，平行組正常飼養(yǎng)，各組均于孕18天時剖宮取出胎鼠；灌服全反式維甲酸組共獲胎鼠123只，

2、其中腰骶部皮膚完整顯性脊柱裂胎鼠70只，腰骶部皮膚缺損顯性脊柱裂胎鼠16只，外觀正常胎鼠23只，其它畸形胎鼠14只；平行組孕鼠共得胎鼠51只，對照組孕鼠共得胎鼠44只，平行組和對照組外觀均未見畸形胎鼠。實驗分組：腰骶部皮膚完整顯性脊柱裂胎鼠為T1組(10只)，腰骶部皮膚缺損顯性脊柱裂為T2組(10只)，對照組(黃豆油)D1組(10只)；灌服全反式維甲酸實驗組中外觀正常胎鼠為D2組(10只)；平行組為D3組(10只)。研究內容及觀察指標：

3、臀肌形態(tài)學病理改變(大體和HE染色)；臀肌運動終板帶分布及形態(tài)觀察，用乙酰膽堿酯酶染色法染色，專業(yè)圖像處理軟件對運動終板帶計算平均光密度和積分光密度值。統(tǒng)計學處理：數(shù)值采用方差分析，用統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，P<0.05表示差異有顯著統(tǒng)計學意義。
　　 結果：1.形態(tài)學觀察：大體觀察見胎鼠臀肌起止面廣泛，呈菱形，自上而下起于髂骨翼外面和骶骨背面，肌束斜向下外，并以短腱起于髂后上棘、臀后線以后的髂骨臀面、髂骨下部與尾骨及兩骨之間的韌

4、帶，止于股骨粗隆。各組胎鼠臀肌外觀鮮紅、外觀無大的區(qū)別；HE染色光鏡下見：D1組、D2組、D3組可見椎管及脊髓結構完整，脊髓灰白質分界清晰，中央管居中，可見完整分布的神經(jīng)元及神經(jīng)膠質細胞，高倍鏡下亦可見神經(jīng)元及神經(jīng)膠質細胞胞質中的尼氏體。臀肌肌纖維清晰，橫紋明顯，肌纖維形態(tài)學正常：T1組胎鼠腰骶部脊髓組織水腫，間質增多，神經(jīng)元胞體略變圓，胞漿淡染，神經(jīng)元數(shù)量較其它各組少，神經(jīng)膠質細胞清晰可辨。胎鼠臀肌的肌纖維排列規(guī)則清晰，橫紋明顯；T2

5、組胎鼠腰骶部脊髓組織明顯水腫，組織結構松散，凌亂，間質明顯增多，神經(jīng)元很少，神經(jīng)膠質增生明顯，可見散在紅色的神經(jīng)元。臀肌肌纖維排列稍紊亂，較清晰，橫紋明顯；2.臀肌運動終板分布及形態(tài)：D1組、D2組、D3組臀肌運動終板位于臀肌深面或中間部，呈“C”形、“一”字形，運動終板染色均勻，呈棕褐色。T1組和T2組臀肌運動終板位于臀肌深部或中間部，呈“C”形、“一”字形：T1組運動終板染色比D1組、D2組、D3臀肌運動終板染色淺、淡，染色均勻：T

6、2組臀肌運動終板除染色比D1組、D2組、D3組運動終板染色淺、淡，染色不均勻外，呈棕褐色，還伴有運動終板畸形或缺損：3.T1組運動終板平均光密度(0.8500±0.0310)和積分光密度值(8079.4296±102.4552)低于D1組(0.8625±0.0248，8200.0330±235.8933)、D2組(0.8574±0.0144，8145.6800±136.5118)、D3組(0.8691±0.0153，8255.9750±

7、145.8148)：T2組運動終板平均光密度(0.8124±0.043)和積分光密度值(7718.5600±413.7121)低于T1組、D1組、D2組、D3組的平均光密度和積分光密度值；4.統(tǒng)計學分析用統(tǒng)計方差分析，T1組平均光密度和積分光密度值與D1組、D2組、D3組比較，無明顯差異(p>0.05)；T2組平均光密度和積分光密度值與D1組、D2組、D3組平均光密度和積分光密度值比較，差異有顯著統(tǒng)計學意義(p<0.01)；T1組平均光

8、密度和積分光密度值與T2組平均光密度和積分光密度值比較，差異有顯著統(tǒng)計學意義(p<0.01)。其余各組間兩兩比較，無明顯差異(p>0.05)。
　　 結論：1.全反式維甲酸誘導腰骶部顯性脊柱裂胎鼠是較好的方法：2.腰骶部皮膚缺損顯性脊柱裂胎鼠臀肌發(fā)育比腰骶部皮膚完整顯性脊柱裂胎鼠臀肌發(fā)育稍差；3.顯性脊柱裂胎鼠臀肌運動終板染色比正常胎鼠臀肌運動終板淺淡，腰骶部皮膚缺損顯性脊柱裂胎鼠臀肌運動終板形態(tài)學有發(fā)育不良表現(xiàn)；4.部分顯性脊